苦参碱通过抑制microRNA-192调控顺铂耐受肺腺癌A549细胞对顺铂的敏感性

目的探讨苦参碱通过调控microRNA影响顺铂耐受A549(A549/DDP)细胞对顺铂的敏感性。方法采用生物信息学手段对GEO数据库中的相关microRNA芯片数据(访问编号GSE43249)进行数据挖掘,筛选出与A549细胞顺铂敏感性相关的microRNA。体外培养对顺铂敏感的A549细胞及A549/DDP,使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法在体外培养的细胞中验证生物信息学的结果,并考察苦参碱对A549/DDP细胞中microRNA水平的影响。通过转染micro RNA-192(mi R-192)模拟序列上调A549/DDP细胞的mi R-192水平。CCK-8细胞活力实验考察苦参碱处理及(或)mi R-192上调对A549/DDP细胞顺铂敏感性的影响。结果芯片数据挖掘显示与顺铂敏感的A549细胞相比,A549/DDP细胞中共有11个microRNA存在显著变化(P0.05),其中mi R-192及mi R-194变化在体外培养的细胞中得到了验证。与未经处理的A549/DDP细胞相比,苦参碱处理后的A549/DDP细胞中mi R-192水平显著降低(P0.05)。苦参碱处理可以增加A549/DDP细胞对顺铂的敏感性,miR-192的上调可以消除这种效果。上调miR-192水平可诱导A549细胞的顺铂耐受。结论苦参碱可能通过抑制mi R-192调控A549对顺铂的敏感性。     

肝细胞色素氧化酶Ⅰ在非酒精性脂肪肝大鼠形成中的作用

目的研究肝脏线粒体DNA细胞色素氧化酶Ⅰ(COXⅠ)在非酒精性脂肪肝大鼠的表达及其意义.方法Wistar大鼠40只,随机分为正常对照组和高脂饲料2、4、8、12周组(其中每组各8只);紫外分光光度法测定肝脏细胞色素氧化酶活性,Western blot方法研究高脂饲料诱导的大鼠脂肪肝形成中肝细胞COX Ⅰ蛋白的表达变化,逆转录聚合酶链反应测定肝细胞COX Ⅰ mRNA表达变化.结果脂肪肝2、4、8和12周细胞色素氧化速率分别为(0.88±0.32)、(0.76±0.37)、(0.48±0.26)、(0.39±0.21)/win,与正常对照组(0.98±0.37)/min较明显降低(P＜0.01),肝细胞COX Ⅰ基因及蛋白表达随着脂肪肝程度的加重亦明显增强.结论非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素C氧化酶活性下降以及线粒体编码呼吸链相关的细胞色素C氧化酶COX Ⅰ基因和蛋白质降低,与脂肪肝引起的肝脏损害密切相关.     

犬急性心肌缺血后左室功能变化与心肌细胞凋亡

目的观察犬急性心肌缺血后左心室壁动度、射血功能、细胞凋亡与心肌组织中caspase3活性的变化。方法犬30只随机分为实验组15只及对照组15只,实验组结扎左冠状动脉前降支近端,结扎时间分别为10min、30min、60min,每一时间点5只,对照组游离左冠状动脉前降支近端,不结扎。心肌组织行三苯四氮唑(TTC)染色,梗死区为黄白色,非梗死区为砖红色。超声心动图测定左室前壁增厚率及左心室射血分数,原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法(TUNEL)检测梗死区心肌组织凋亡细胞数,行caspase3活性测定。结果TTC染色示左室前壁及部分前间隔染色为黄白色,其余区域为砖红色。实验组冠脉结扎后10min,左室前壁增厚率降低,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。左心室射血分数未发生明显改变,与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。冠脉结扎后30min至60min,前壁增厚率降低与左心室射血分数进一步下降,与对照组比较有非常显著性差异(P<0.01)。实验组冠脉结扎后10min,梗死区心肌TUNEL阳性细胞数与对照组比较无显著性差异;冠脉结扎后30min至60min,梗死区心肌TUNEL阳性细胞数明显增加,与对照组比较有非常显著性差异(P<0.01)。实验组冠脉结扎后10min,梗死区心肌caspase3荧光值升高,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。30min至60min梗死区心肌caspase3荧光值明显升高,与对照组比较有非常显著性差异(P<0.01)。结论急性心肌缺血后早期,促凋亡基因caspase3激活,缺血心肌细胞凋亡可能为急性心肌缺血的早期病理改变,并且与心肌室壁动度与左室收缩功能降低有一定关系。     

老年危重型新冠肺炎患者成功救治1例病例报告

目的:还原危重型新冠肺炎患者救治临床工作的真实情景,旨在为临床救治危重型新冠肺炎患者提供诊疗、护理经验。方法:选择医疗队接诊过程中于2020年2月6日收治的危重型新冠肺炎患者1例,以病例讨论形式,还原病程记录、护理记录,特护小组人员定期组织视频会议,针对护理操作时面临的困难、操作技巧等重点、难点问题,及时进行讨论,以求获得最有效、最适合的操作方法,并对实施效果进行评价。结果:患者成功撤机拔管,脱离生命危险,各项生命体征趋于稳定,鼻咽拭子、痰新冠病毒监测阴性,于4月4日出院。结论:加强危重型患者气道、氧疗、心理等各方面细节评估和管理,落实护理人员感染防护措施,及时有效进行小组讨论、总结经验,以提高救治效果,促进患者康复。     

超声造影在经皮肺周围型肿物穿刺活检中的价值

正肺周围型肿物临床多见,主要分为良性和恶性两类,恶性肿瘤治疗及预后差异明显[1],因此准确的病理诊断尤为关键。目前肺周围型肿物病理诊断方式包括痰细胞学、支气管肺泡灌洗、纤维支气管镜下活检及影像学(CT/超声)引导下经皮活检等,其中超声引导下穿刺活检因并发症少、取材成功率高,临床应用广泛[2]。本组通过对比分析常规超声与超声造影引导下经皮周围型肺肿物穿刺活检,探讨超声造影在经皮肺周围型肿物穿刺活检中的应用价值。     

非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P450 1A1基因及表达变化的意义

目的研究非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P450 1A1基因和表达变化及其意义.方法雄性Wistar大鼠40只,随机分为两组,正常对照组8只,高脂饮食组2、4、8、12各8只,紫外分光光度计法检测P450 1A1活性(7-乙氧异恶唑0-脱乙基酶,EROD);免疫组织化学和Western blot方法测定肝细胞色素P450 1A1表达变化,逆转录聚合酶链反应测定肝细胞色素P450 1A1 mRNA表达变化.结果脂肪肝2、4、8和12周EROD活性分别为325.07±59.68、345.25±49.28、468.95±55.28和548.68±43.25 nmol·mg-1·min-1,与正常对照组260.42±35.32 nmol·mg-1·min-1比较明显增高(P＜0.01),肝细胞色素P450 1A1基因及蛋白表达随着脂肪肝程度的加重明显增强.结论非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞色素P450 1A1基因和表达变化与脂肪肝引起的肝脏损害程度密切相关.     

地鳖纤溶蛋白口服时间/pH依赖结肠靶向微囊的开发及评价＊

地鳖中的纤溶活性蛋白是从地鳖中提取的具有抗栓及抗肿瘤作用的有效成分，其口服易被上消化道酶分解从而限制了应用。采用恒流泵滴制法开发地鳖纤溶活性蛋白时间/pH依赖口服结肠靶向微囊（EnpolypHaga fibrinolytic protein oral colon targeting microcapsules， CTM-EFP）。采用单因素实验和正交实验相结合的方法寻找到包封率为60.17 % ± 2.72 %、载药量为15.50 % ± 0.44 % 的最佳配方。扫描电子显微镜（SEM）显示微囊呈球形、表面光滑，在人工肠液中24 h的累积释放度为99.53 % ± 0.69 %，在人工胃液中24 h累积释放度为7.43 ± 1.04 %，通过时间/pH依赖达到结肠靶向作用。CTM-EFP在人工肠液中的体外释放曲线符合Korsmeyer方程，提示地鳖纤溶活性蛋白（EnpolypHaga fibrinolytic protein， EFP）是通过扩散和侵蚀机制结合释放的。CTM-EFP为EFP的口服给药提供了一种新的剂型，为EFP应用于临床提供参考。     

非酒精性脂肪肝患者肝静脉血流多普勒频谱形态的观测

目的观测非酒精性脂肪肝肝静脉血流频谱形态的变化情况。方法多普勒超声检测病例组138例非酒精性脂肪肝患者（弥漫性脂肪肝97例，局灶性脂肪肝41例）与对照组91例正常人肝静脉多普勒频谱。病例组所有患者均经超声检查及CT检查诊断脂肪肝，血脂增高，无长期大量饮酒史。对照组经超声及CT检查诊断无脂肪肝，血脂正常。根据多普勒频谱特点将肝静脉波形分为正常型、衰减型、平坦型。结果病例组异常肝静脉波形（衰减型与平坦型）所占比例（59％）较对照组（7％）显著增加，差异有显著性意义（P〈0．05），异常肝静脉波形中衰减型（59％）与平坦型（41％）所占比例差异无显著性意义（P〉0．05）。弥漫性脂肪肝异常肝静脉波形比例（69％）高于局灶性脂肪肝（37％），差异有显著性意义（P〈0．05）。结论脂肪肝患者肝静脉血流频谱可出现异常衰减型、异常平坦型，对脂肪肝肝血流动力学的进一步研究有助于提高对此疾病的诊断、治疗。