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基质金属蛋白酶-2C端片段pex的克隆、测序及真核表达载体的构建 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 :克隆小鼠基质金属蛋白酶 - 2 ( MMP- 2 ) C端片断 pex编码区的 c DNA序列 ,并构建其真核表达载体 ,为进一步研究其抑制肿瘤作用奠定基础。方法 :根据基因 Gen Bank中 MMP- 2基因的碱基序列 ,利用 RT- PCR的方法从 NIH3T3细胞中分别扩增信号肽及目的基因 pex,然后用多重 PCR的方法将两个片段拼接起来 ,再将拼接起来的目的片段 sig- pex与 p MD1 8T载体连接作全自动测序 ,利用亚克隆的方法将 sig- pex c DNA片段克隆到 pc DNA3.1载体中。结果 :DNA测序证实该片断序列与文献报道完全一致。结论 :成功构建出 pc DNA3.1 - sig- pex真核表达载体 相似文献
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乳腺良恶性组织中MMP-26表达及其与MMP-9、VEGF和MVD的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 检测人乳腺良恶性组织中基质金属蛋白酶-26(matrix metalloproteinase-26,MMP-26)、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,计数微血管密度(micro vesseldensity,MVD),探讨4项指标与乳腺浸润性导管癌(infiltrating ductal carcinoma,IDC)临床病理指标的关系,分析MMP-26与MMP-9、VEGF表达的相关性及与MVD的关系.方法 采用免疫组化SP法,检测正常乳腺组织、普通型导管增生(usual ductalhyperplasia,UDH)、导管内原位癌(ductal carcinoma in situ,DCIS)和IDC组织中MMP-26、MMP-9、VEGF的表达并进行评分,以CD34标记肿瘤间质微血管,计数MVD.结果 (1)54例IDC中,MMP-26,MMP-9及VEGF表达的阳性率分别为62.96%、68.52%和75.93%;3种蛋白相关性分析显示:MMP-26与MMP-9表达呈正相关关系(F=0.32,P<0.05),MMP-26与VEGF表达未见相关性(F=0.23,P>0.05),MMP-9与VEGF表达呈正相关关系(F=0.44,P<0.01).(2)3种蛋白表达均与淋巴结转移密切相关(P<0.05),在其他各临床病理参数间差异未见显著性(P>0.05).(3)MMP-26阳性表达率随着MVD的增高而增高,但在高、低MVD组差异未见显著性(P>0.05),高MVD组MMP-9和VEGF阳性表达率明显高于低MVD组(P<0.05).结论 MMP-26在乳腺癌浸润、转移中发挥重要作用;MMP-26可能通过激活MMP-9参与肿瘤血管生成和促进肿瘤的侵袭和转移. 相似文献
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创新意识、创新思维和创新能力是创新教育的三要素。吉林大学白求恩医学院通过实行教学机构优化重组,科学、系统地设置课程体系,以及采用丰富多样的教学方法和教学评价体系,着力进行创新意识的开发;通过融入科研思维及渗透临床思维的教学模式,促进创新思维的培养;通过建立以学生为主体及推行以科研为平台的教学模式,提高学生的创新能力。 相似文献
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生物素标记的免疫电镜技术对α-平滑肌肌动蛋白在乳腺癌新生血管表达研究中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :探讨生物素标记的免疫电镜技术在观察周细胞的形态特点及确定α-平滑肌肌动蛋白在乳腺癌组织中表达部位的应用。方法 :应用免疫电镜技术检测乳腺癌中 α-平滑肌肌动蛋白的表达。结果 :周细胞紧贴内皮细胞外侧 ,周细胞胞质中可见散布大量圆形黑色颗粒 ,而内皮细胞中见不到这些黑色颗粒。结论 :免疫电镜技术可作为蛋白精确定位的有效手段 ,α-平滑肌肌动蛋白可作为周细跑的标记物 相似文献
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目的 研究明胶酶A(MMP 2 )在不同病理分期、分级的膀胱移行细胞肿瘤 (TCCB)中的表达规律 ,并探讨以MMP 2来判断TCCB进展情况的可能性及方法。方法 通过免疫组织化学和明胶酶谱等方法对 4 7例手术切除的TC CB组织中MMP 2蛋白进行定量检测 ,同时取 5例正常膀胱组织作为对照。对检测结果进行统计学分析。结果 (1)MMP 2蛋白在TCCB中呈阳性表达 ,在正常膀胱组织中MMP 2不表达或呈微量表达 ;(2 )随着TCCB临床病理分期、分级的升高 ,MMP 2表达量呈现增高趋势 ,有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 MMP 2蛋白表达与TCCB的恶性发展密切相关。临床上可将MMP 2作为判断TCCB进展情况的标志物。 相似文献
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目的探讨早期诊断前列腺癌和逆转前列腺癌转移的标志物。方法采用一维SDS—PAGE结合高效液相色谱-串联质谱的方法分离并鉴定PC-3M细胞中的膜蛋白。结果在严格的过滤参数条件下(当Charge+1,Xcorr≥1.9;当Charge+2,Xcorr≥2.2;当Charge+3,Xcorr≥3.75;其中DelCN≥0.1),PC-3M细胞中鉴定出2023个蛋白,其中1391(69%)个蛋白经过基因本体评注(GOA)显示为已知细胞组分,其余为未知细胞组分。在已知细胞组分中527(38.30%)个蛋白为膜蛋白或者膜相关蛋白,其中18.32%的蛋白被预测至少有1个跨膜区,49.62%的蛋白有1~3个跨膜区,19.08%的蛋白有4~9个跨膜区,9.92%蛋白预测有≥10个跨膜区。除了已知的与膜相关的蛋白,很多新的蛋白也被鉴定,其中包括假设蛋白和一些cDNA序列。结论一种明显独特的质膜蛋白表达模式存在于高转移前列腺癌细胞系中。这将帮助进一步理解前列腺癌侵袭和转移的分子机制,并且为寻找前列腺癌转移相关的靶标分子提供实验基础。 相似文献
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近年来,原位杂交技术的发展和方法的不断改进,已广泛地应用于组织内的靶RNA定量定位分析。但由于组织的来源不同,进行原位杂交染色组织的各期处理也不尽相同,尤其是脑组织中其含大量磷脂成分,质地柔软,原位杂交染色一直难以取得令人满意的结果。本实验室采用大鼠脑缺血模型进行caspas-3原位杂交染色,结果较为理想。 相似文献
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目的:比较人高转移性前列腺癌细胞株(PC-3M) 和人低转移性前列腺癌细胞株(PC-3) 间差异表达的蛋白质,拟发现早期诊断和逆转前列腺癌转移的分子标志物。方法: 应用差异凝胶电泳(DIGE),分离PC-3M和PC-3 细胞株的总蛋白,用图像分析软件比较分析并识别细胞间的差异表达蛋白质。结果: 应用DIGE进行分离后,成功地获得了蛋白质组分辨率高、重复性好的双向凝胶电泳图谱,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)成功鉴定出11种蛋白质,其中9个蛋白质点仅在PC-3中有表达,2个蛋白质点仅在PC-3M中有表达。结论: 人高、低转移前列腺癌细胞株的蛋白质组表达存在明显差异,这些差异蛋白质有可能为进一步发现前列腺癌转移相关分子和阐明前列腺癌侵袭转移的分子机制提供实验证据。 相似文献
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瘙痒可分6大类瘙痒是一种常见的临床症状,其背后可能隐藏着多种原因,由此医生们也将瘙痒分成不同的类型.《慢性瘙痒管理指南(2018版)》将瘙痒分为:肤源性瘙痒:在绝大多数皮肤病中均伴随瘙痒,其中包括感染性皮肤病如真菌、细菌、病毒、疥虫、虱病;免疫炎症及过敏性皮肤病如特应性皮炎、药物不良反应、荨麻疹、银屑病等;自身免疫性皮肤病如大疱性皮肤病、皮肌炎、硬皮病等;还有肿瘤性皮肤病以及孕产妇、老年人等特殊人群的皮肤瘙痒等. 相似文献