质粒pGH/BL_(21)在大肠杆菌中表达条件的研究

目的　寻找质粒 pGH/BL2 1在大肠杆菌中的最佳表达条件。方法　当它在大肠杆菌中表达时 ,考查不同IPTG诱导浓度及不同的诱导时间对表达产物的影响 ,表达产物的量以SDS -PAGE电泳方法分析。结果　该基因的最佳表达条件为 :IPTG诱导浓度 1.0mmol/L ,诱导时间 4h。结论　IPTG对不同的基因在不同的表达体系中需不同的诱导条件 ,只有找到它的最佳诱导条件才能保证终产物的最大产率     

转染人CXCR4细胞株的构建及其生物学功能的研究

目的：构建稳定表达人CXCR4基因的L929细胞株，分析CXCR4分子对转基因细胞迁移能力的影响。方法：TRIzol一步法抽提人外周血单个核细胞（PBMC）总RNA，RTPCR扩增出CXCR4基因，双酶切装入逆转录病毒载体pEGZTerm，与辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T，用其培养上清感染L929细胞72h后，经Zeocin筛选出稳定表达CXCR4分子的L929细胞株；利用微孔隔离小室检测转人CXCR4基因的L929细胞在SDF-1α作用下的迁移能力。结果：构建含CXCR4基因的重组逆转录病毒载体，经转染包装细胞293T后，筛选获得能稳定高表达人CXCR4蛋白的L929转基因细胞，转入人CXCR4基因的L929细胞在SDF-1α作用下介导迁移。结论：成功构建转染人CXCR4细胞株，为肿瘤迁移模型的研究和鼠抗人CXCR4 mAb的制备打下基础。     

二甲胂酸诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡的研究

目的探讨二甲胂酸（DMAA）诱导胃癌细胞SGC-7901的凋亡作用。方法用不同浓度的二甲胂酸与人的胃癌细胞SGC-7901共育一段时间后观察细胞的存活、形态学改变及生物学变化。结果其中以0．5～5．0mmol／L浓度的DMAA诱导其凋亡的作用最明显。主要形态学表现为细胞膜完整、染色质固缩、核碎裂、凋亡小体形成；电泳结果上则显示明显的梯形凋亡条带。而当DMAA浓度≥10mmol／L时细胞核和细胞质中的荧光减弱，细胞呈坏死趋势；同时，MTT结果显示随着DMAA浓度的升高，细胞的活性明显降低。结论DMAA在低浓度时能有效诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡，而高浓度时主要导致其坏死。     

质粒pGH/BL21在大肠杆菌中表达条件的研究

目的 寻找质粒pGH／BL21在大肠杆菌中的最佳表达条件。方法 当它在大肠杆菌中表达时，考查不同IPTG诱导浓度及不同的诱导时间对表达产物的影响，表达产物的量以SDS—PAGE电泳方法分析。结果 该基因的最佳表达条件为：IPTG诱导浓度1．0mmol／L，诱导时间4h。结论 IPTG对不同的基因在不同的表达体系中需不同的诱导条件，只有找到它的最佳诱导条件才能保证终产物的最大产率。