Boule基因在小鼠精子发生过程中的动态表达

目的:研究雄性不育相关基因Boule在小鼠出生后首个精子发生波中的动态表达,探讨Boule在精子发生过程中的调控作用。方法:运用免疫印迹法分析BOULE蛋白在多组织中的表达情况。运用实时荧光定量、免疫组织化学和免疫荧光技术检测Boule m RNA和BOULE蛋白在雄性小鼠出生后首个精子发生波各个时间点中的表达。结果:1免疫印迹法显示BOULE蛋白在睾丸中特异性高表达,在出生后16 d睾丸可被检测到,并在随后的发育中睾丸和成年睾丸持续表达;2实时荧光定量方法证实Boule m RNA在雄鼠出生后14 d睾丸中可被检测到,20 d呈现表达高峰;3免疫组织化学显示在精母细胞及圆形精子细胞胞质中存在BOULE蛋白阳性信号。结论:Boule在精子发生过程中的表达是在发育水平精密调控的,在粗线期精母细胞和圆形精子细胞阶段的特异表达提示Boule可能在精母细胞进程和圆形精子细胞中发挥作用。     

营养不良蛋白—Duchenne型肌营养不良位点的蛋白产物

本文作者报告用鼠DMD蛋白产物的抗体进行正常人。正常鼠、Duchenne肌营养不良(DMD)病人及病鼠组织中DMD产物-营养不良蛋白的研究。作者将代表鼠DMD cDNA的绝大部分但互不重叠的两个片段分别与E.colitrp E基因连接,再重组入载体pATH_2中分别表达,得到两个分别与33kd trp E蛋白相联的30kd mDMD蛋白和60kd mDMD蛋白,将这两种融合蛋白经聚丙稀酰胺电泳纯化后,     

一个Duchenne型肌营养不良症家系的调查和Xp21区RFLP分析

应用限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析法对一个Duchenne型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy. DMD)家系进行了遗传学研究,包括家系调查和用8种限制性酶及由X染色体Xp21区不同部位获得的9种DNA探针,对Xp21区的13个位点进行了RFLP分析。从中发现该家系中DMD基因携带者有5到6个位点具有杂合的多态性,可以用作遗传标记,进行DMD携带者的检测和产前基因诊断。     

分子遗传学在临床神经病学中的应用

不久以前,揭示大多数神经系统疾病的分子遗传学机制,仍被看作似乎是一件遥远的事。而现在,分子生物学技术的应用[显示限制性片段长度多态性(RFLPS)的DNA探针与连锁分析],已把几种该类疾病的基因,在染色体上定位。此外,更为精细的细胞遗传学方法,已使与某些该类疾病有关的染色体畸变(缺失、易位或重复)得到识别。另外,几种常染色体隐性的溶酶体贮积症的异常基因,现在已被克隆。本文将综述几种受到这些最新发现而促进神经系统疾病研究的进展。     

缺失PUF家族基因的卵母细胞可以成熟和受精

目的:研究PUF家族基因[Pumilio1(Pum1)和Pumilio2(Pum2)]在雌性生育能力和生殖细胞减数分裂过程中的作用?方法:在Pum1基因位置携带loxP位点的Pum2基因全敲鼠的基础上,利用生殖细胞特异性表达的Cre-Vasa-Cre介导Pum1基因条件性敲除,以此获得Pum基因双敲小鼠模型Vasa-cre:Pum1F/F Pum2-/-(VDKO)?同时,对Pum基因双敲小鼠进行生殖表型分析?结果:①交配实验结果表明,雌性VDKO小鼠的生育能力显著下降,但仍可以产生后代;②VDKO小鼠卵母细胞体外成熟过程不受影响?结论:Pum蛋白不影响小鼠卵子发生发育过程?