人体寄生虫学教学改革探索

1998年和2000年分别在武汉、承德召开了全国高等医学院校以寄生虫学教学改革为主题的教学研讨会，为落实会议精神，适应21世纪医学发展的新形势，我们在人体寄生虫学的教学中，对教学观念、教学内容及教学方法进行了初步改革探索。现介绍如下。     

卡氏肺孢子虫感染动物模型建立与电镜观察

（1）目的 观察卡氏肺孢子虫及病变肺组织超微结构,探讨卡氏肺孢子虫的可能致病机制。（2）方法 肌注地塞米松诱发大鼠卡氏肺孢子虫肺炎,取其肺组织,按常规方法进行透射电镜观察。（3）结果 电镜下第22-28天即可观察到卡氏肺孢子虫的感染,以包囊为主;第43-56天达重度感染,以滋养体为主,肺泡腔内多见,肺间质中少见,中性粒细胞、肺泡巨噬细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞内也可见到。（4）结论 大滋养体伸出丝状伪足与Ⅰ,Ⅱ型肺泡上皮细胞粘连使上皮细胞发生变化。Ⅱ型上皮细胞发生凋亡。     

大肠埃希菌基因间重复序列PCR反应体系的优化

目的对大肠埃希菌ERIC-PCR反应体系进行优化。方法提取大肠埃希菌基因组DNA作为ERIC-PCR反应的模板,通过设计一个L9（3^4）正交试验对Mg^2＋浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq DNA聚合酶4种因素进行优化。结果通过L9（3^4）正交试验优化的大肠埃希菌ERIC-PCR最佳反应体系（25μl）为：2.5μl 10×Loading buffer,Mg^2＋浓度2.0mmol/L,dNTPs浓度200μmol/L,引物浓度0.2μmol/L,Taq DNA聚合酶1.0U,模板DNA 40ng。应用该体系进行ERIC-PCR得到的DNA指纹图谱条带丰富、清晰、重复性好。结论采用正交试验优化的ERIC-PCR反应体系结果稳定可靠,对于大肠埃希菌在分子水平上的分型鉴定以及分子流行病学调查具有重要意义。     

寡核苷酸探针RNA原位杂交法检测肺孢子虫的研究

目的探讨RNA原位杂交法在肺孢子虫病理检测中的应用。方法采用小亚单位RNA位点来源的寡核苷酸探针、地高辛加尾标记、Wistar雌性大鼠皮下注射地塞米松建立肺孢子虫肺炎动物模型,取肺组织制备石蜡标本进行RNA原位杂交,并将结果与瑞氏-吉姆萨染色法进行比较。结果 RNA原位杂交法于感染后第3周检到虫体,呈游离分布;7～8周时检测到大量包囊;9～10周时滋养体大量出现;组织内肺孢子虫的检出率（32/32）高于瑞氏-吉姆萨染色法（25/32）。结论 RNA原位杂交法是一种敏感特异的肺孢子虫病理检测方法。     

寡核苷酸探针RNA原位杂交法检测肺孢子虫的研究

目的探讨RNA原位杂交法在肺孢子虫病理检测中的应用。方法采用小亚单位RNA位点来源的寡核苷酸探针、地高辛加尾标记、Wistar雌性大鼠皮下注射地塞米松建立肺孢子虫肺炎动物模型,取肺组织制备石蜡标本进行RNA原位杂交,并将结果与瑞氏-吉姆萨染色法进行比较。结果 RNA原位杂交法于感染后第3周检到虫体,呈游离分布;7～8周时检测到大量包囊;9～10周时滋养体大量出现;组织内肺孢子虫的检出率(32/32)高于瑞氏-吉姆萨染色法(25/32)。结论 RNA原位杂交法是一种敏感特异的肺孢子虫病理检测方法。     

人体寄生虫学教学多媒体课件的制作和应用

人体寄生虫学是基础医学和预防医学领域的一门重要专业课,形态学内容占有一定比例。由于寄生虫的生活史时间跨度大,生活环境复杂,导致宿主的病变千变万化。过去教师上课常用的挂图、投影片存在字小、图小或亮度不够且无动态变化等弊端,给教师的讲解和学生的学习均带来一定的影响。将幻灯片、投影片、录像带及显微电视等多种手段用于教学,     

人源隐孢子虫卵囊形态学参数的测定和分析

目的建立并分析人源隐孢子虫卵囊的形态学数据和参数。方法取阳性粪便涂片,金胺酚-改良抗酸染色法检测隐孢子虫卵囊。应用显微摄像系统采集1 138个人源隐孢子虫卵囊图像,使用计算机图像处理系统测量卵囊的长径、短径、等效直径、面积、体积及卵形指数。应用Excel数据处理软件对采集到的数据进行统计学分析。结果1 138个人源隐孢子虫卵囊长径均值为5.25μm,95%可信区间为3.79～6.72μm;卵囊短径均值为4.00μm,95%可信区间为2.72～5.28μm;卵囊面积均值为15.44μm~2;卵囊体积均值为46.55μm~3;卵囊等效直径均值为4.39μm;卵囊卵形指数1.33。结论建立了人源隐孢子虫卵囊形态学数据和参数,为量化及评价虫体的形态奠定了基础。     

牛带绦虫病2例报道

例 1:男 ,3 2岁 ,黑龙江人。 2 0 0 1年到宁夏打工半年后 ,发现粪便内有白色“虫体”排出。当地医院给予“肠虫清”口服 ,4片 /次 ,tid ,连服 6d。 2 0 0 2年来青岛打工 ,仍发现有“虫体”排出 ,再次服用“肠虫清”无效 ,到我室诊治。患者一般状况尚好 ,但较消瘦。自述经常腹部不适 ,肛门瘙痒 ,有时腹痛、腹泻。自发现“虫体”以来 ,精神紧张 ,经常失眠。患者带来的“虫体”经鉴定为牛带绦虫孕节 ,诊断为牛带绦虫病。治疗 :空腹嚼服新鲜南瓜子约 10 0 g(农贸市场购买 ) ,1h后服槟榔 (浸泡过夜 )煎剂 2 0 0ml ,3 0min后加服 5 0 %硫酸镁 3 0m…     

恶性疟原虫MSP1-19毕氏酵母真核表达克隆的构建

目的 构建恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白1C末端相对分子质量1．9万片段（MSP1-19）毕氏酵母真核表达克隆。方法 利用PCR技术扩增出MSP1-19，插入pPIC9载体中，鉴定正确的MSP1-19基因，插入毕氏酵母分泌型表达载体pPIC9k中，DNA测序鉴定序列的正确性，转化酵母细胞。结果 筛选出的阳性克隆为MSP1-19表达克隆。结论 用分子生物学方法重组构建的MSP1-19毕氏酵母真核表达克隆，为高效表达MSP1-19及其活性鉴定奠定了基础。