VEGF反义寡核苷酸治疗小鼠Lewis肺癌的研究

肺癌与其它实体瘤一样,其生长、转移和预后均依赖血管生成,以新生血管为靶点,抑制肿瘤血管生成,阻断肿瘤的营养来源和迁移通道,已成为癌症治疗的新策略.有研究发现,血管内皮生长因子(Vascular en-dothelial growth factor,VEGF)为一高度特异的血管内皮细胞有丝分裂素,可直接诱导肿瘤血管生成[1].我们利用近年兴起的反义技术,设计VEGF反义寡核苷酸片断,使其特异性封闭肿瘤细胞中的VEGF mRNA,通过研究它对肿瘤细胞合成VEGF及对肿瘤生长的影响,探讨其对肺癌治疗新途径的可能性.     

大蒜素对2型糖尿病大鼠血糖的干预效应

目的：观察百合科植物大蒜球茎中分离出的一种化合物大蒜索对2型糖尿病大鼠血糖的影响及高血脂对糖代谢的影响。方法：实验于2004-10／2005-02在哈尔滨医科大学第一临床医学院实验动物中心完成。选择健康的雄性Wistar大鼠70只，将大鼠按随机数字表法分成2组：对照组10只，糖尿病造模组60只，糖尿病造模组大鼠以高脂高糖饲料（配方：20％蔗糖、2．5％胆固醇、10％猪油、1．0％胆盐、66．5％基础饲料）诱导4周加链脲佐菌素注射进行造模，空腹血糖≥11．1mmol／L为造模成功。将造模成功糖尿病大鼠56只纳入实验，随机数字表法分为5组，即阳性对照组12只，2型糖尿病模型组、大蒜素60，40，30mg／（kg&;#183;d）剂量组各11只。2型糖尿病模型组喂基础饲料；阳性对照组喂高脂高糖饲料加大蒜素60mg／（ks&;#183;d）；大蒜素60，40，30mg／（kg&;#183;d）剂量组喂基础饲料加大蒜素60，40，30mg／（kg&;#183;d）；连续喂养3周。观察不同剂量大蒜素对2型糖尿病、高脂糖尿病和正常大鼠血糖及尿量的影响。结果：对照组10只全部进入结果分析，糖尿病造模组大鼠56只造模成功，进入结果分析。④高脂高糖饲料喂养4周后，糖尿病2型糖尿病模型组大鼠血脂增高、空腹血糖和胰岛素水平升高，胰岛素敏感指数下降，与空白对照组比较，差异有显著性意义（t=5．63～14．22，P〈0．01）。②分组施加大蒜素等干预3周后空白对照组、阳性对照组、2型糖尿病模型组大鼠实验前后血糖无明显变化（t=0．180,P〉0．05）；大蒜素60，40，30mg／（kg&;#183;d）剂量组实验前后血糖均有所下降（t=9．48，7．70，2．35，P〈0．01～0．05）；实验后大蒜素60mg／（kg&;#183;d）剂量组血糖与阳性对照组比较，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。③实验后大蒜素60，40，30mg／（kg&;#183;d）剂量组糖尿病大鼠的尿量显著降低（P〈0．01）；阳性对照组大鼠尿量也略有降低，但是实验前后比较差异不大（P〉0．05）；大蒜素60mg／（kg&;#183;d）剂量组大鼠尿量与阳性对照组比较差异有显著性意义（P〈0.01）。结论：大蒜素能够降低2型糖尿病大鼠的血糖，降糖效果与给药剂量呈正相关，高血脂影响血糖的代谢。     

仙人掌粉抗氧化延缓衰老的作用及其机制研究

目的探讨仙人掌粉延缓衰老的作用。方法①分别以正常饲料(老龄对照组,n=10)、正常饲料加大、中、小剂量仙人掌粉(仙人掌大、中、小剂量组,n=10,10,10)喂养20月龄Wis-tar大鼠,于实验第31天测定血清丙二醛和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)水平。②观察以低、中、高剂量(5%,10%,20%)仙人掌粉加入玉米粉作为培养基的果蝇寿命。结果仙人掌低、中、高剂量组大鼠血清丙二醛明显降低,低、中、高剂量组分别为(4.62±0.55),(4.55±0.36),(3.95±0.48)mmol/L,与对照组(6.85±0.67)mmol/L比较,差异有显著性意义(t=8.10～11.17;P<0.01);血清SOD活性(L)明显高于对照组,低、中、高剂量组分别为(3.14±0.15),(3.19±0.15),(3.21±0.18)kat/L;对照组为(3.00±0.13)kat/比较,差异有显著性意义(t=2.18～3.10;P<0.05～0.01)。仙人掌粉明显延长果蝇的半数死亡时间、平均寿命及最高寿命,与对照组比较,差异有显著性意义(t=5.59～14.20;P均<0.01)。结论仙人掌粉能够改善机体内环境,有延缓机体衰老的作用。     

仙人掌粉对大鼠高脂血症的治疗作用

目的:探讨进食仙人掌粉对高血脂大鼠血脂水平的影响。方法:将造模成功的高血脂大鼠随机分为四组:分别为模型对照组和仙人掌粉高、中、低三剂量组,后者按高、中、低三种剂量给予样品。以上各组继续喂饲高脂饲料3周,于给样前、后分别取血测定血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇(high-densitylipoproteincholesterol,HDL-C),并且计算低密度脂蛋白胆固醇(low-densitylipoproteincholes-terol,LDL-C)、动脉硬化指数(arteriosclerosisindex,AI)等指标。结果:仙人掌粉高、中、低三剂量组均能显著降低高脂大鼠血清总胆固醇犤(4.55±1.49),(5.90±1.37),(7.25±1.48)mmol/L犦,LDL-C犤(3.03±1.36),(4.36±1.22),(5.68±1.32)mmol/L犦,AI(2.37±0.80,3.50±0.67,4.53±0.71),三酰甘油犤(0.87±0.15),(1.15±0.22),(1.32±0.23)mmol/L犦差异均有显著性意义(t=2.43～17.32,P<0.05～0.01),且其降脂作用与给药剂量有关。结论:仙人掌粉有较明显的调节血脂作用。     

马齿苋粉延缓衰老的实验研究

目的:研究马齿苋粉延缓衰老的作用,为马齿苋的应用提供理论依据。方法:将大鼠分成4组,每组10只:对照组(喂普通饲料)、马齿苋大、中、小剂量组(喂普通饲料并分别加入5.00,2.50和1.25g马齿苋粉)连喂4周。于实验第29天大鼠采血测血清丙二醛和超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)。果蝇生存实验,将果蝇分成4组,对照组只用普通玉米培养基,实验组按大、中、小剂量将马齿苋粉分别按20%,10%,5%加入培养基中,计算果蝇半数死亡时间、平均寿命、最高寿命。结果:马齿苋组大鼠血清丙二醛降低,大、中、小剂量3组分别为:(3.84±0.43),(4.06±0.32)和(4.58±0.45)μmol/L,与对照组比较有显著差异(t=10.22,13.59,13.43,P<0.01)。血清SOD活性高于对照组,大、中、小剂量3组分别为:(3.46±0.24),(3.25±0.20),(3.00±0.15)kat/L,与对照组比较,差异有显著性意义(t=6.03,4.50,1.96;P<0.05～0.01)。马齿苋粉延长了果蝇的半数死亡时间、平均寿命和最高寿命。结论:马齿苋粉有抗氧化作用,能够延缓机体衰老,是有开发价值的保健品。     

仙人掌粉对大鼠高脂血症的预防作用

目的：研究仙人掌粉对大鼠高脂血症的影响。方法：将Wistar大鼠分为4组：即正常饲料组(喂基础饲料)、正常饲料加仙人掌组(喂基础饲料加仙人掌粉)、高脂饲料组(喂高脂饲料)和高脂饲料加仙人掌组(喂高脂饲料加仙人掌粉)，每组10只，喂养3周。于实验前后各采血1次测血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol HDL-C)，并且计算低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、动脉硬化指数(总胆固醇／HDL-C)。结果：正常饲料组血脂(mmol／L)及动脉硬化指数基本无改变(总胆固醇：1.644&;#177;0.30，总胆固醇／HDL-C：1.274&;#177;0.25)；正常饲料加仙人掌总胆固醇降低(1.454&;#177;0.30)；高脂饲料组血脂及动脉硬化指数明显升高(总胆固醇：11.934&;#177;2.71，总胆固醇／HDL-C：9.864&;#177;0.42)；高脂饲料加仙人掌组血脂及动脉硬化指数比正常饲料组高，比高脂饲料组低(总胆固醇：4.134&;#177;1.42。总胆固醇／HDL-C：3.134&;#177;0.35)；高脂饲料加仙人掌组与高脂饲料组比较差异有显著意义。结论：仙人掌粉能够阻止血脂升高，对高脂血症有预防作用。     

大蒜素对糖尿病大鼠血糖的影响

研究大蒜素对糖尿病大鼠血糖的影响。方法：将用四氧嘧啶造模成功的糖尿病大鼠随机分为4组，即阳性对照组(喂基础饲料)，高、中、低剂量组，服用不同剂量的大蒜素[60mg／(kg&;#183;d)，40mg／(kg&;#183;d)，30mg／(kg&;#183;d)]和基础饲料，3周后测大鼠血糖。结果：用药前后比较，高剂量组血糖由24．86mmol／L降到7．26mm01／L(t=3．77，P&;lt;0．01)；中剂量组由23．15mmol／L降到15．80mmol／L(t=4．78，P&;lt;0．01)；低剂量组由21．20mmol／L降到17．60mmol／L(t=2．65，P&;lt;0．05)，与阳性组比较差异有显著性意义(t值分别为11．78，7．38，5．03，P&;lt;0．01)。结论：大蒜素能够降低糖尿病大鼠的血糖，降糖效果与给药剂量成正相关。     

马齿苋对高脂血症大鼠血脂水平的影响

目的：研究马齿苋降血脂成分对高脂血症大鼠血脂的影响。方法：将大鼠分为4组：正常饲料组，正常饲料加马齿苋组，高脂饲料组，高脂饲料加马齿苋组，每组10只，喂养3周。于实验前后采血测大鼠血清总胆固醇)、高密度脂蛋白胆固醇(high densaity lipoprotein-C，HDL-C)并且根据公式计算低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-C，LDL-C)、动脉硬化指数。结果：实验前后正常饲料组大鼠血清总胆固醇(1．62&;#177;0．28)mmol／L、三酰甘油(0．39&;#177;0．24)mmol／L，HDL-C(1．30&;#177;0．18)mmol／L无变化；正常饲料加马齿苋组三酰甘油(1．40&;#177;0．26)mmol／L、总胆固醇(0．28&;#177;0．16)mmol／L降低，HDL-C(1．49&;#177;0．27)mmol／L升高；高脂饲料组总胆固醇(9．89&;#177;1．58)mmol／L、三酰甘油(3．12&;#177;0．35)mmol／L升高，HDL-C(1．05&;#177;0．29)mmol/L降低；高脂饲料加马齿苋组三酰甘油(4．10&;#177;1．45)mmol／L、三酰甘油(1．78&;#177;0．39)mmol／L比高脂饲料组低(P&;lt;0．01)，HDL-C(1．59&;#177;0．36)mmol／L比高脂饲料组高(P&;lt;0．01)。结论：马齿苋对大鼠高脂血症有明显的预防作用。     

富硒蒜对Wistar雄性大鼠精子的影响

目的通过低硒动物模型研究低硒及富硒蒜对雄性大鼠精子的影响。方法将30只大鼠分成3组：对照组（喂常规饲料）、低硒组（喂低硒饲料）、补硒组（喂低硒饲料加富硒蒜粉），喂养12周。实验结束时股动脉采血测血清硒（Se）含量、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、及丙二醛（MDA）含量；处死动物后睾丸称重计算睾丸指数，测精子数量和精子活率。结果血清硒含量：三组大鼠分别为0.42±0.13、0.06±0.08、0.30±0.07（mg/L）；精子数量：31.7±3.8、12.4±4.1、28.7±2.9（109）；精子活率：78.35±3.23、44.63±4.40、74.45±5.62（%）；低硒组明显低于其他两组（p〈0.01）。结论低硒能够造成大鼠精子数量减少、精子质量下降；富硒蒜具有拮抗氧化作用，能够改善低硒大鼠精子的数量及质量。     

VEGF反义寡核苷酸抑制小鼠Lewis肺癌生长的研究

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸对C57BL/6小鼠Lewis肺癌肿瘤生长的抑制作用。方法制备C57BL/6小鼠皮下肺癌模型30只,随机分为3组,每组10只VEGF反义寡核苷酸(ASPODN)治疗组、VEGF正义寡核苷酸(SPODN)治疗组及对照组。接种Lewis肺癌细胞后24h内,分别皮下注射ASPODN及SPODN进行治疗,对照组只注射生理盐水,每周2次,连续4周;观察各组小鼠肿瘤的生长情况、游标卡尺测量肿瘤体积大小。所有C57BL/6小鼠于接种后第25天先用二维超声观察肿瘤的实时图象,利用脉冲多普勒获取血流频谱,获得收缩期峰值速度(PS),阻力指数(RI)。断颈处死小鼠,光镜及电镜下观察肿瘤组织形态学改变及超微结构变化,免疫组化法检测微血管密度(MVD)。结果与对照组瘤重比较(7.83±0.78)g、VEGF-ASPODN组(4.49±0.43)g能明显抑制小鼠肿瘤生长(P<0.01)、VEGF-SPODN组(7.73±0.69)g则无明显作用(P>0.05)。VEGF-ASPODN组、VEGF-SPODN组抑瘤率分别为42.7%、5.9%。组织形态学及超微结构观察,VEGF-ASPODN对肿瘤生长具有抑制作用。VEGF-ASPODN组与对照组相比较PS及RI有明显差异(P<0.01);VEGF-SPODN组与对照组相比无明显差异(P>0.05)。结论肿瘤原位注射VEGF反义寡核苷酸能抑制小鼠肺癌生长。