结核分枝杆菌HSP 65亚单位疫苗和基因疫苗的构建及免疫学特性

目的:构建HSP 65蛋白的亚单位疫苗和基因疫苗,并与BCG相比较,评价这两种疫苗在小鼠体内的免疫学特性.方法:从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出hsp 65基因,连接进入pMD18-T载体中,测序后,利用不同酶切位点将完整的hsp 65基因分别克隆到pProEX HTb原核表达载体和pcDNA3.1(-)真核表达载体,前者在大肠杆菌中诱导表达,经SDS-PAGE和Western Blot分析后,用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化;后者通过阳离子聚合物瞬转P815细胞,用间接免疫荧光检测细胞内HSP 65蛋白的表达.用上述原核表达蛋白和真核质粒(分别为亚单位疫苗和基因疫苗)免疫BALB/c小鼠,ELISA测定特异性抗体的滴度,MTT测定脾淋巴细胞特异性增殖指数.结果:获得的结核分枝杆菌hsp 65基因序列与GenBank公布的完全一致;Western Blot结果显示,在M<,r>约65000处有与鼠抗HSP 65 mAb和临床结核患者血清的特异性结合带;免疫荧光结果显示转染重组质粒的P815细胞的表达蛋白与HSP 65 mAb有特异性结合.两种疫苗免疫小鼠体内产生特异性抗体,经蛋白刺激后可引起脾淋巴细胞特异性增殖.结论:所构建的两种疫苗能引起免疫动物的特异性体液和细胞免疫反应,应进一步研究其抵抗结核分支杆菌感染的保护力机制,以用于结核病的防治研究.     

藤黄微球菌Rpf结构域及其突变体蛋白的生物学活性测定

目的:对藤黄微球菌Rpf结构域及其突变体E54K,E54A蛋白的生物学活性进行评价。方法:将纯化的Rpf结构域及其突变蛋白加入到休眠的耻垢分枝杆菌中测定各自的生物活性。结果:证实Rpf结构域蛋白对耻垢分枝杆菌有一定的促生长作用,而突变体E54A,特别是E54K没有此作用。结论:明确了Rpf结构域及其两种突变体蛋白,对耻垢休眠菌复苏的作用,为上述蛋白在结核病预防和快速诊断中的应用奠定基础。     

变性高效液相色谱法对恶性肿瘤患者血浆DNA p53突变的检测

目的:探讨扩增恶性肿瘤患者血浆DNA的可行性,建立一种快速检测血浆DNA突变的新方法。方法:选取恶性肿瘤患者40例,提取血浆DNA,采用聚合酶链反应(PCR)扩增p53基因外显子7,用变性高效液相色谱法(DHPLC)对产物进行突变分析,并与测序结果比较。结果:40例恶性肿瘤患者血浆提取的DNA均能扩增出目的片断,DHPLC检测到有8例突变,与DNA直接测序结果一致。结论:对恶性肿瘤患者血浆DNA扩增是可行的,DHPLC可作为一种快速简便的突变检测方法。     

脐部转移性腺癌1例

患者,女,65岁,因发现脐部包块7个月就诊。查体：肚脐轻度突出,脐内可见一约1．5cm×1．5cm大小的青紫色类圆形包块,周围少量暗红色渗液,表面光滑,包块固定,触痛阳性。腹部CT：腹膜增厚并见多个结节;左肾囊肿;肝、胆、胰、脾未见异常;少量腹水。妇科B型超声：子宫、双侧附件区未见异常。     

结核杆菌蛋白芯片检测对肺结核的诊断价值

目的 评价结核杆菌蛋白芯片检测技术对肺结核诊断的价值.方法 采用结核杆菌蛋白芯片检测200例肺结核病患者和100例健康人群血清标本,应用概率论对检测真实性和可靠性做出评价.结果 结核蛋白芯片检测灵敏度为75.5％,特异度为98％,误诊率为2％,漏诊率为24％,准确率为83％,阳性预期值为98.7％,阴性预期值为66.6％,尤登指数为0.735.结论 结核杆菌蛋白芯片检测方法简便、快捷、经济,实用性好,不受人为因素干扰,是结核病辅助诊断的好方法,值得推广.     

右锁骨内侧原始神经外胚层瘤1例

原始神经外胚层瘤（Primitive neuraleetodenhal tumor．PNET）是一种极为少见的高度恶性肿瘤,极易转移和复发,5年生存率几乎为零。此病好发于10～20岁,5岁以下及30岁以上极少见,男女比例为11：3。曾有关于发生于骨骼、软组织、椎管内病例的报道。我院收治右锁骨内侧原始神经外胚层瘤1例,现报告如下：     

培美曲塞联合顺铂治疗中晚期非小细胞肺癌20例

<正>我院于2008年5月至2011年3月采用培美曲塞(PEM)联合顺铂(PPD)治疗中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)20例,取得较好近期疗效,并且副作用较小,现报道如下。临床资料1一般资料20例NSCLC患者,其中男14例,女6例,年龄40~72岁,平均年龄56岁。所有患者均为病理组织学或     

特发性肺间质纤维化的诊断

特发性肺纤维化（IPF）是指原因不明的以普通型间质性肺炎为特征性病理表现的慢性、进行性、间质性肺疾病。主要发病年龄在50～70岁,男女比例为2：1。依据IPF新分类标准,现在认为IPF亚群5年生存率为15％～20％.诊断后的生存期大约为3年。随着对IPF组织病理学类型的认识,以及高分辨CT（HRCT）的开展,人们对IPF的诊断有了很大进步,但目前仍存在着许多不足之处。现将诊断进展综述如下。     

舒利迭50/500联合塞曲司特治疗中、重度支气管哮喘25例

<正>支气管哮喘是由炎症介质引发炎性细胞浸润气道而引起的慢性炎性疾病。血栓素A2(TXA2)是引起气道高度反应性以及炎症的重要介质之一。近年来TXA2受体拮抗剂广泛应用于