肝肾阴虚证大鼠下丘脑—垂体—甲状腺轴的变化及中药对其调节作用

目的：探讨肝肾阴虚证大鼠下丘脑－垂体－甲状腺轴的变化及中药对其调节作用。方法;以激怒法制造大鼠肝肾阴虚模型,研究下丘脑－垂体－甲状腺轴（HPT）各项指标的变化。结果;肝肾阴虚模型大鼠下丘脑TRH增高,血清TSH、FT3、FT4水平均降低（P＜0．05）,而血清rT3浓度升高（P＜0．05）;运用滋补肝肾方能够减轻这种激怒应激反应,滋补肝肾方药组各指标与模型组比差异显著（P＜0．05）,与正常组比较无显著差异,而柴胡疏肝散无明显作用。结论：下丘脑－垂体－甲状腺轴的部分抑制是肝肾阴虚证形成的关键。     

逍遥散调节肝郁脾虚大鼠中枢AMPA受体及相关蛋白的机制研究

目的:观察逍遥散和6-氰基-7-硝喹啉-2,3-双酮(CNQX)对慢性束缚应激所致肝郁脾虚证大鼠中枢AMPA受体及其相关蛋白表达的影响,探讨逍遥散的作用机制。方法:将100只雄性SD大鼠随机分为正常组(A组)、假手术组(B组)、模型组(C组)、逍遥散组(D组)、CNQX组(E组)和逍遥散+CNQX组(F组)。C、D、E、F组大鼠通过连续21d慢性束缚应激建立肝郁脾虚证候模型,D、F组大鼠每天束缚前灌服逍遥散5.32g/kg,E、F组大鼠隔天右侧杏仁核区微量注射α-氨基羟甲基恶唑丙酸(AMPA)受体拮抗剂CNQX 0.5μL。各组动物第22d处死,免疫组化方法检测海马CA1区、CA3区、基底外侧杏仁核(BLA)谷氨酸受体2/3(GluR2/3)、N-乙基顺丁烯二酰亚胺敏感性的融合蛋白(NSF)、PKC作用蛋白1(PICK1)水平。结果:模型大鼠GluR2/3在海马CA1、CA3区明显减少,BLA区明显增加;NSF在海马CA1、CA3区有减少趋势;PICK1在海马CA3区明显增加。CNQX和逍遥散对模型大鼠GluR2/3 PICK1在海马的变化均有调节作用。逍遥散联合CNQX作用于慢性束缚应激大鼠与单独使用逍遥散或CNQX后呈现一致性。结论:调节AMPA受体及其相关蛋白在海马各区和杏仁核的兴奋性至少是逍遥散调节突触可塑性、进一步治疗应激和抑郁的作用途径之一。     

基于数据挖掘的针灸治疗产后抑郁症的选穴规律研究

目的:通过数据挖掘针灸治疗产后抑郁的RCT文献,得到其穴位使用规律和配伍方法,从而为临床提供有效穴位的参考意见。方法:通过中国知网数据库、万方数据库、重庆维普数据库一共检索到557篇关于针灸治疗产后抑郁症的临床研究文献,通过纳入、排除标准筛选最后得到44篇文献。借助SPSS20.0以及SPSS Modeler18.1进行统计学分析。结果:针灸医治产后抑郁症最常使用的穴位分别是百会、太冲、三阴交、足三里、内关;督脉、足厥阴肝经、足太阳膀胱经这三条经脉与治疗产后抑郁症密切相关,大部分医生临床针灸治疗部位为头部、四肢、背部,由SPSS Modeler软件得到的关联分析结果为太冲-内关-足三里、太冲-内关、内关-太冲-足三里,最后对高频穴位进行聚类分类获得4个聚类群,分别是太冲、内关、三阴交、足三里;合谷、四神聪;百会、神门;脾俞、关元。结论:通过数据挖掘针灸治疗产后抑郁症的穴位使用规律,可以为今后临床治疗产后抑郁症提供一些穴位使用方法的参考。     

古代经典名方中药复方药品说明书撰写有关问题简述

为传承发展中医药事业,加强古代经典名方中药复方（以下简称经典名方）制剂的质量管理, 2018年4月16日国家中医药管理局发布了《古代经典名方目录（第一批）》,6月1日国家药品监督管理局出台了《古代经典名方中药复方制剂简化注册审批管理规定》。本课题组基于经典名方的长期研究,认为可以利用经典名方制剂免去临床试验这次契机,对于药品说明书当中【功能主治】/【适应证】,以及【不良反应】、【禁忌】、【注意事项】两大方面内容进行适当调整和完善,借以探讨更符合临床实际的说明书撰写规范,为解决经典名方临床应用问题提供借鉴和参考。     

温阳、解郁及温阳解郁方对母婴分离结合慢性神经疼痛应激小鼠疼痛敏感性及抑郁样行为的调节作用

目的 观察母婴分离小鼠给予慢性神经疼痛应激后的行为、痛阈改变,以及血清和中枢抑郁、疼痛相关指标的变化,以温阳方、解郁方、及温阳解郁方进行干预探讨温阳解郁法抗抑郁、改善疼痛敏感的可能机制。方法 以小鼠出生日为PD0,小鼠在出生后随机分为对空白组和母婴分离组,母婴分离组在PD5~14进行8 h·d^-1的母婴分离,离乳后将其分为母婴分离组、温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组,每组15只,同时以15只未经母婴分离的同期雄性仔鼠作为空白组。空白组、母婴分离组小鼠于PD21~90以普通发育饲料喂养,余组分别以温阳方二仙汤、解郁方逍遥散、温阳解郁方及氟西汀药混饲料喂养（用药剂量分别为5.84、12.00、16.68 g·kg^-1及2.60 mg·kg^-1）。于PD91行坐骨神经结扎手术,建立母婴分离+慢性神经病理性疼痛模型。采用旷场实验观察各组小鼠抑郁样行为,测量机械痛阈和温度痛阈检测各组小鼠疼痛敏感性,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清皮质酮（CORT）、P物质及β-内啡肽（β-EP）含量,免疫组化检测杏仁核糖皮质激素受体（GR）和下丘脑β-EP蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测杏仁核糖皮质激素受体基因（Nr3c1）、FK506结合蛋白5基因（FKBP5）、代谢型谷氨酸受体5基因（GRM5）及脑源性神经营养因子（BDNF）mRNA的表达量。结果 与空白组比较,母婴分离组小鼠5 min旷场中心停留时间和运动总距离均显著减少（P<0.01）,机械痛阈显著降低（P<0.01）。血清CORT和β-EP均显著上升（P<0.01）,FKBP5 mRNA表达显著下降（P<0.01）。下丘脑β-EP表达上升,差异具有明显统计学意义（P<0.05）。与母婴分离组比较,各给药组5 min旷场中心停留时间均明显增加（P<0.05,P<0.01）,温阳组、温阳解郁组和氟西汀组小鼠在5 min旷场运动总距离明显增加（P<0.05,P<0.01）,各给药组痛阈均不同程度上调。解郁组小鼠血清CORT显著下降（P<0.01）,β-EP明显下降,但差异无统计学意义;BDNF mRNA显著上升（P<0.01）。温阳组小鼠Nr3c1及GRM5 mRNA均明显下降（P<0.05,P<0.01）。温阳解郁组小鼠血清CORT明显下降（P<0.05）,Nr3c1、GRM5及BDNF mRNA均下降（P<0.05,P<0.01）,差异具有明显统计学意义,各给药组下丘脑β-EP表达水平均有不同程度提升,但差异无统计学意义。温阳组、解郁组和温阳解郁组小鼠杏仁核GR表达水平均明显上升,差异具有明显统计学意义（P<0.05）。结论 温阳解郁方可通过增强杏仁核GR表达、抑制杏仁核区神经可塑性及兴奋性达到抑制中枢疼痛敏化和调节下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴功能,缓解抑郁行为和改善躯体疼痛过敏的作用。     

证候动物模型研制的现状、瓶颈与发展路径探讨

证候动物模型是中医研究的重要实验手段,模型研制的理论、构建流程、评价方法等方面已初步具备了发展的基础条件,但现有模型仍存在中医特色不强、造模方法不成熟、缺少公认评价方法等问题。对证候本质的把握、种属间表征的差异、宏观表征与微观指标的关联等关键科学问题成为制约证候动物模型成功研制的瓶颈。应加强临床基础研究,阐释证候现代内涵;基于药(方)效和现代临床数据,建立证候动物模型评价规范;通过造模因素效应的动态、系统的研究,探索复合因素造模;建立中医证候动物模型表型库,明确模型病理过程。从基础证候模型研制入手进行协同攻关,才能取得突破性进展。     

母婴分离/束缚应激模型小鼠海马小胶质细胞变化及温阳解郁方的调节作用

目的 观察母婴分离/束缚应激诱发焦虑抑郁小鼠海马小胶质细胞激活和白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达情况,探讨温阳解郁方抗焦虑抑郁的机制。方法 84只雄性C57BL仔鼠于出生后第0天（PD0）随机分为空白组、束缚应激组和造模组,造模组采取母婴分离结合束缚应激制备焦虑抑郁模型,将造模组按随机数字表法分为模型组、温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组。在离乳第21天（PD21）至成年第90天（PD90）,空白组、束缚应激组和模型组饲喂正常饲料,其余饲喂药混饲料（温阳组、解郁组、温阳解郁组和氟西汀组用药剂量分别为5.85,12.03,16.71 g·kg^-1及2.60 mg·kg^-1）。采用旷场实验,O迷宫和社会交互实验评估模型组小鼠焦虑抑郁状态;免疫组化法（IHC）观察海马小胶质细胞及离子钙接头蛋白-1（Iba-1）表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测IL-1β,IL-6,TNF-α,Iba-1,糖皮质激素受体（GR）mRNA表达水平。结果 与空白组比较,模型组小鼠5 min运动总路程和中央区活动时间显著减少（P<0.01）,开臂活动时间与活动总路程明显减少（P<0.05,P<0.01）,训练探察时间和辨别探查时间显著增加（P<0.01）,Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-1β,IL-6,TNF-α mRNA表达水平显著升高（P<0.01）,GR mRNA表达水平显著降低（P<0.01）,IHC结果显示小胶质细胞的过度激活。与模型组比较,温阳解郁方及氟西汀组小鼠5 min运动总路程和中央区活动时间显著上升（P<0.01）,开臂活动时间显著上升（P<0.01）,训练探察时间和辨别探查时间明显降低（P<0.05,P<0.01）;Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-1β,IL-6,TNF-α mRNA表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）,GR mRNA表达水平显著上升（P<0.01）,IHC结果表明小胶质细胞的形态恢复;温阳组和解郁组小鼠开臂活动时间显著上升（P<0.01）,辨别探查时间明显降低（P<0.05）,Iba-1蛋白及mRNA表达,IL-6 mRNA表达水平明显降低（P<0.05,P<0.01）;温阳组小鼠GR mRNA表达水平明显上升（P<0.05）,TNF-α mRNA表达水平明显降低（P<0.05）;解郁组小鼠5 min运动总路程显著上升（P<0.01）,训练探察时间明显降低（P<0.05）,IL-1β mRNA表达水平明显降低（P<0.05）,IHC结果表明两组小胶质细胞有所恢复。结论 温阳解郁方的综合疗效和药理作用优于温阳方和解郁方,其作用机制可能通过抑制母婴分离/束缚应激小鼠海马小胶质细胞的激活,降低IL-1β,IL-6,TNF-α等细胞因子的表达,增加海马GR表达,从而改善小鼠的焦虑抑郁样行为。     

基于关联规则挖掘的中药治疗心血管疾病组分配伍规律研究

通过数据挖掘,揭示组分与组分、组分与证型的关系,从组分层面解析中药治疗心血管疾病的配伍规律,为中医临床基于病证结合采用组分中药治疗疾病提供依据。通过对近20年期刊文献数据中关键点的采集及结构化加工,采用关联规则挖掘算法,对治疗心血管疾病的中药(中药材/饮片)、中成药及相关组分的研究结果进行挖掘分析。结果筛选出与临床治疗心血管疾病关联度较高的组分配伍,发现了新的配伍形式,印证或推测出构成单味中药和中药复方的药效物质基础和/或可能的组分配伍,揭示组分配伍与疾病、中医证型之间的关联关系。基于关联规则挖掘,可为组分配伍与优化提供新的思路和方法,为组分中药研发提供技术支撑。     

基于关联规则挖掘治疗心血管疾病常用中药组分药理作用研究

目的：挖掘使用中药治疗心血管疾病中组分-药理作用规则及组分潜在药理作用,为组分潜在药理作用研究提供了前瞻性推断,同时为使用组分中药治疗心血管疾病优化配伍和应用提供了理论依据。方法：基于“治疗心血管疾病的方剂-中药-组分信息检索统计系统”收集中医药治疗心血管疾病的相关文献,筛选近25年文献数据中关键点的采集及结构化加工,利用Excel 2010中数据挖掘模块的关联规则算法,设置每个规则最低支持为2项,最小概率为10%的参数,对数据进行分析,挖掘治疗心血管疾病的组分-药理作用规则及组分潜在的药理作用。结果：通过关联规则挖掘,得出与临床治疗心血管疾病关联度较高的组分-药理作用规则,如白藜芦醇->抗氧化作用、丹参素->抗血小板凝集作用及丹参酮IIA->降血脂作用等,推测白藜芦醇潜在抗氧化、抗动脉粥样硬化及抗心肌缺血的药理作用,丹参酮IIA潜在降血脂及扩张冠状动脉的药理作用;同一组分在已确定药理作用基础上可能潜在其他药理作用,同一药理作用可能涉及多个组分。结论：组分-药理作用及组分-潜在药理作用规则的挖掘,为组分潜在药理作用研究提供了前瞻性推断,同时为临床采用组分中药治疗心血管...