呼吸道合胞病毒PCR序列分析方法的建立和应用

目的：探讨呼吸道合胞病毒ｃＤＮＡ（ＲＳＶ ｃＤＮＡ）序列分析的方法。方法：将ＰＣＲ扩增与核酸序列分析技术相结合,以γ＾３２Ｐ－ＡＴＰ标记Ｔ７Ｐｒｏｍｏｔｅｒ为测序引物,Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶直接测序。结果：测序梯清晰,可读性好。．ＲＳＶ ＮＳ和Ｎ基因区虽较稳定,但仍有颠换突变。结论：ＲＳＶ的变异性决定了它对人类的反复感染,ＰＣＲ测序方法较简便,在临床标本的检测和变异的观察中有重要意义。     

新兵呼吸道感染肺炎支原体快速检测的结果分析

目的应用快速检测方法对出现呼吸道症状的新兵行肺炎支原体（MP）抗原和抗体的检测,并探讨其临床意义。方法收集北京部队5个营区新兵中出现咳嗽、咳痰、流涕、咽痛等呼吸道症状的398例患者的咽部分泌物,应用快速培养法检测MP抗原,应用间接免疫荧光法（IFA）对腋温≥37．3℃或抗原阳性的新兵MP的IgM抗体进行检测,分析检测结果。结果MP抗原阳性率4．27％;快速培养法检测MP抗原与IFA法检测同一患者相应的IgM抗体结果的差异有统计学意义（P〈0．05）;不同籍贯、不同营区的新兵MP恢复期IgM抗体检测结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MP是成人呼吸道感染的重要病原体,快速培养法、IFA法能够提供早期诊断和治疗的依据,可以作为诊断MP感染的优选检测方法。     

缺氧性肺动脉高压大鼠肺组织尾加压素Ⅱ的分布及意义

目的 揭示血管新型收缩肽--尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ, UⅡ)在缺氧性肺动脉高压发生、发展中可能发挥的病理生理作用,探讨低氧对肺组织各种细胞成分UⅡ基因表达、合成和释放的影响.方法 建立缺氧性肺动脉高压大鼠模型,采用免疫组织化学方法(IHC),观察UⅡ在不同低氧时间点大鼠肺组织各种细胞中的分布及变化.结果 UⅡ在肺组织多种细胞中广泛分布.低氧后,UⅡ在肺组织各种细胞中表达增强.低氧10 d和20 d最明显.结论 低氧可以促使肺组织中多种细胞合成、分泌UⅡ.低氧也促进肺组织UⅡ的释放.UⅡ参与缺氧性肺动脉高压的发生与发展.     

气管内雾化麻醉致双眼上睑下垂1例

1 病历摘要 男，74岁。因咳嗽、发热、痰中带血3d于2006-12-02入院。入院后CT示右肺门见一软组织肿块，右中叶心缘旁可见不规则致密影，右中叶中间段支气管狭窄。入院时患者一般状况良好。隔日行支气管镜检查，先以2％利多卡因10m1超声雾化吸入，嘱患者大口吸气，用鼻孔呼气，20min后行电子气管镜检查。     

115例急性呼吸道感染患者FluA抗原快速检测与血清抗体对比研究

目的评价胶体金免疫层析（goldirnmunoehromatographicassay,GICA）快速检测甲型流感（influenzaA,FluA）病毒抗原的可行性,并调查部分呼吸科住院患者FluA感染及抗体水平。方法收集2009年09月16日至2011年02月01日期问在北京军区总医院呼吸科住院的115例患者鼻咽部分泌物标本,应用GICA法检测FluA病毒抗原,同时留取患者双份血清。以检测双份血清抗体的Hl法为“金标准”,对GICA法做出评价。结果①GICA法与HI法检测结果行一致性检验,Kappa值为0．628,配对）（2检验,差异无统计学意义（P〉0．05）;GICA法的敏感度为68．2％,特异度为93．5％,符合率为84．3％,误诊率为6．5％,漏诊率为31．8％,约登指数是0．617;②115例住院患者FluAHI法确诊病例共22例,FluA（新型H1N1）检出率为4．3％（5／115）,FluA（季节性H1N1）检出率为2．6％（3／115）,FIuA（季节性H3N2）检出率为6．1％（7／115）,FluA混合感染检出率为6．1％（7／115）。FluA（新型H1N1）检出时间主要集中在09年10月和11月,随后以混合感染形式与FluA（季节性H3N2和H1N1）散发存在。结论①与HI法相比,应用GICA法检测FluA抗原,敏感度略低,特异度较好,二者一致性较好,作为临床筛查FluA感染有一定价值;②初步印证WHO预计的2009年H1N1流感病毒会在未来数年内以季节性病毒的方式继续传播趋势。     

人呼吸道合胞病毒M2-1基因转染对人肺腺癌细胞生长特性的影响

目的:探讨人呼吸道合胞病毒(hRSV)M2-1基因转染对人肺腺癌细胞体外生长特性的影响.方法:应用脂质体转染法,将携带M2-1基因的重组载体pXJ-41/M2-1转入人肺腺癌PAa和A549细胞,并获稳定表达;以不含M2-1基因的空白载体为对照,采用流式细胞术、MTT法、胰酶消化试验、软琼脂集落形成实验和Boyden小室等方法观察转染细胞的生长特性、贴壁能力及侵袭能力变化.结果:与转染前和转染空白质粒组比较,转染M2-1基因的PAa和A549细胞的G2/M期细胞比例均显著增加(P<0.05,P<0.01);细胞增殖明显加快(P<0.01),倍增时间缩短;集落形成率显著增加(P<0.01);PAa细胞胰酶消化离壁时间缩短(P<0.01),而A549细胞在3组间无统计学差异;Boyden小室实验中,A549细胞透膜数显著增加(P<0.01),而PAa细胞因透膜数很少,均无法计数.结论:M2-1基因转染能提高体外培养的PAa和A549细胞的增殖能力和侵袭能力,感染hRSV病毒的肺癌患者应引起重视.     

成人呼吸道合胞病毒感染的病原学及临床治疗研究

本研究开创了成人呼吸道感染病毒病原学研究新领域,提高了临床病原学诊断率,为临床提供了新的治疗方法,避免滥用抗生素。主要应用三种光镜免疫组化法和两种电镜检测成人呼吸道感染患者和正常人鼻咽部脱落细胞中的呼吸道合胞病毒(RSV);检测 RSV阳性患者双份血清特异性 IgG,随机双盲行干扰素吸入治疗。在国内首次报道 RSV 是成人呼吸道感染的重要病原之一,与婴幼儿发病季节一致的观点;检测标本不经培养,直接行电镜和免疫电镜观察到迄今尚未报道的自然感染宿主细胞 RSV 复制、增殖的形态学特     

气管镜检查术前应用安定的优越性探讨

纤维支气管镜检查的临床应用目前大多采用局部麻醉方法以减少窥镜置入的不适感。尽管如此,病人常承受较大的痛苦和心理压力。纤支镜检查为一种侵入性检查手段,尚不能被大多数病人接受。由于局部麻醉效果的局限性及病人在清醒状态下接受检查,当纤支镜进入声门及声门以下气管时,患者易出现咳嗽、气憋,感觉极不舒服,尤其是咽部慢性炎症的患者,黏膜表面麻醉不满意,     

人呼吸道合胞病毒转录调节基因转染肺腺癌细胞系的研究

目的获得稳定表达人呼吸道合胞病毒(hRSV)M2-1基因的人肺腺癌细胞系.方法通过基因重组法构建hRSV M2-1基因真核表达载体,用脂质体将其转染人肺腺癌PAa和A549细胞,经G418筛选获得阳性表达细胞株,并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot进行验证.结果得到了约650bp的基因插入片段,DNA测序表明该基因高度保守.筛选出了稳定高量表达M2-1基因的PAa和A549细胞,并被证实有M2-1蛋白表达.结论获得了稳定表达hRSV M2-1蛋白的PAa和A549细胞株.     

两种快速检测成人流感病毒(甲、乙)方法的评价

目的：通过对比两种检测流感病毒的方法,寻找一种快速、简便、更适于快速检测的方法,使临床治疗更及时有效。方法：应用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标法（APAAP法）和胶体金免疫层析法（GICA法）,检测北京军区总医院呼吸科2007-07/2008-12住院患者中的感染病例共960例。结果：两种方法的一致性检验,甲型流感Kappa=0.765,乙型流感Kappa=0.754,两者均大于0.75,说明两种方法检测甲、乙型流感均有很好的一致性。结论：与APAAP法相比,GICA法快速、简便,更适合于流感快速检测。