基于网络药理学和实验验证探讨荆防颗粒对自身免疫性肝炎小鼠的治疗作用及作用机制

目的 基于网络药理学及动物实验探讨荆防颗粒对自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis,AIH）小鼠的治疗作用及作用机制。方法 通过TCMSP数据库筛选荆防颗粒的活性成分及其对应的靶点,通过检索Omim、Drugbank和Gene Cards数据库收集AIH相关的靶点,进而得到荆防颗粒治疗AIH的关键靶点;将获得的关键靶点导入STRING数据库进行分析,并构建蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络,通过Cytoscape软件可视化;通过Metascape数据库对关键靶点进行基因本体（gene ontology,GO）功能及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。通过建立刀豆蛋白A诱导的AIH小鼠模型探讨荆防颗粒治疗AIH的作用机制。结果 共筛选得到荆防颗粒中159个潜在活性成分和269个相关的靶点,与343个AIH相关靶点取交集,获得25个交集靶点。PPI网络分析显示,白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏...     

基于网络药理学整合体内实验探究脉络舒通丸抗血栓性浅静脉炎的作用机制

目的 基于网络药理学整合体内实验方法探究脉络舒通丸抗血栓性浅静脉炎（superficial thrombophlebitis,STP）的作用机制。方法 借助网络药理学方法,从药物及疾病相关数据库筛选脉络舒通丸的成分作用靶点及STP疾病相关靶点,根据拓扑特征值筛选关键靶点后,进行基因本体（gene ontology,GO）功能及京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路富集分析。将日本大耳白兔随机分为对照组、模型组、地奥司明（0.168 g/kg）组和脉络舒通丸低、中、高剂量（0.56、1.68、5.04 g/kg）组。除对照组外,其余各组均采用耳缘iv 20%甘露醇建立STP兔模型。造模同时各给药组连续ig给药14 d。采用苏木素-伊红（HE）染色法检测各组兔耳组织病理变化;ELISA检测各组血清中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和IL-6水平;Western blotting检测耳组织蛋白激酶B(pr...     

小儿消积止咳口服液抗肠炎靶点与作用机制研究

目的 探索小儿消积止咳口服液改善肠道炎症作用的直接靶点,从炎症靶点生物学功能的角度,阐释小儿消积止咳口服液保护肠道并发挥消积功效的作用机制。方法 基于靶点“钩钓”策略从脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠肠道组织中捕获并通过高分辨质谱鉴定小儿消积止咳口服液提取物的直接作用靶点蛋白,基于京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析靶点蛋白相关信号通路。通过qRT-PCR、免疫组化等方法进行靶点蛋白的功能验证。结果 累计从肠道组织鉴定到1333个结合蛋白,并通过KEGG分析发现靶点蛋白群主要与肠道动力学、肠道免疫、黏膜屏障等功能有关。进而利用免疫组化、qRT-PCR等方法确证了小儿消积止咳口服液具有上述保护肠道功能的潜在作用。结论 小儿消积止咳口服液具有改善小鼠肠道组织炎症损伤的作用,其作用机制可能与增强肠道动力、改善肠道免疫微环境以及维持肠道黏膜完整性有关。     

单硝酸异山梨酯、缬沙坦、螺内酯复方对大鼠的长期毒性研究

目的 观察SD大鼠连续6个月口服单硝酸异山梨酯、缬沙坦、螺内酯复方所产生的毒性反应,比较3种药物联合应用后,毒性是否增加或产生新的毒性。方法 健康SD大鼠200只,雌雄各半,分为5组：空白对照组、复方73、244、733 mg·kg-1及缬沙坦600mg·kg-1对照组,每组40只。给药体积为10mL·kg-1,每日ig给药1次,每周给药6d,连续给药6个月,停药观察4周。实验期间,每日进行一般状态观察,每周测定1次体质量及摄食量,于给药3、6个月及停药4周后,各组动物分别进行血压、血液学、血液生化学指标检测,动物剖检并进行病理组织学检查。结果 复方73、244、733 mg·kg-1及缬沙坦600 mg·kg-1对照组血压出现明显降低,为复方药物药理作用结果。244、733 mg·kg-1及缬沙坦600 mg·kg-1对照组RBC、HCT、HGB及Ret均出现明显降低,肾功能指标CREA、UREA及电解质K＋明显升高,组织病理学检查肾脏出现明显病理学改变,当停药恢复期结束后,上述各指标恢复正常。结论 本试验条件下,单硝酸异山梨酯、缬沙坦、螺内酯复方口服6个月无不良反应剂量（NOAEL）为73 mg·kg-1,当大鼠6个月给药剂量达到244 mg·kg-1时,血液学、血钾及肾功出现明显毒性反应,停药后可恢复正常。复方中3种药物联合应用,同缬沙坦单独使用相比未见毒性增加或产生新的毒性。     

肾综合征出血热患者凝血纤溶功能和可溶性血栓调节蛋白的变化

目的：探讨肾综合征出血热（HFRS）患者凝血、纤溶功能和可溶性血调节蛋白的变化。方法抽取我院2012年2月—2013年2月就诊的25例患者作为研究对象,按病情分为轻症组（13例）和重症组（12例）,并抽取30例健康检查者为对照组,观察并比较3组的相关指标。结果 HFRS患者体内凝血水平明显降低,而纤溶功能和可溶性血栓调节蛋白的含量明显升高。结论肾综合征出血热患者血小板（PLT）水平明显减低, D-二聚体（DD）和可溶性血栓调节蛋白（STM）明显升高,表明体内存在着广泛性的毛细血管损伤、凝血系统激活和血小板活化。因此,在病程早期给予患者抗凝、抗病毒治疗是极其有必要的。     

SPSS在生物分析测定过程中计算加权标准曲线的应用

举例论述了利用SPSS11.5for windows软件进行加权回归,获得加权标准曲线进行定量分析的方法。     

不同血液净化方式对肾功能衰竭患者生活质量的影响

目的：对不同血液净化方式对肾功能衰竭患者生活质量的影响进行探讨。方法随机选取肾功能衰竭患者120例,其中60例患者使用腹膜透析治疗（A组）,60例患者使用连续性静脉血液透析治疗（B组）,对比2组患者的生活质量。结果治疗前,A、B2组患者的生活质量评分分别是（33±9）分、（30±11）分,差异不具有统计学意义;治疗后A、B 2组患者的生活质量评分分别是（67±11）分、（84±13）分,改善显著（P＜0.05）,B组患者的生活质量评分显著高于A组,差异具有统计学意义（P＜0.05）。B组患者的血气分析改善显著（P＜0.05）。结论肾功能衰竭患者在血液净化的过程中,应尽量选择创伤小、疗效好、并发症发生率低的血液净化方式,以明显改善患者的生活质量与血氧状态,维持患者体内酸碱度的平衡与稳定。     

基于肠黏膜屏障及TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路探讨燮和饮改善PCOS-IR小鼠炎症反应的影响

目的 探讨燮和饮对改善肥胖型多囊卵巢综合征胰岛素抵抗（PCOS-IR）,减缓炎症反应的可能作用机制。方法 将60只SPF级雌性C57BL/6J小鼠随机抽取10只,并设为正常组,其余小鼠均采用粪菌混悬液（2 g·kg^-1）联合来曲唑溶液（0.002 g·kg^-1）灌胃4周建立PCOS-IR模型。将模型复制成功的动物随机分为模型组,二甲双胍组（0.25 g·kg^-1）及燮和饮低、中、高剂量组（10,20,40 g·kg^-1）,给予相应剂量的药物灌胃,每天1次,连续治疗4周。除空白组外,其余各组小鼠在治疗期间持续灌胃粪菌混悬液和来曲唑溶液以维持模型。动物每周称1次体质量;治疗结束后测量空腹血糖（FBG）;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清睾酮（T）,促卵泡生成素（FSH）,促黄体生成素（LH）,空腹胰岛素（FINS）水平,计算LH/FSH及胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）值;摘取子宫和双侧卵巢称质量后固定,苏木素-伊红（HE）染色观察卵巢组织病理形态学变化;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠结肠组织中Toll样受体4/核转录因子-κB/NOD样受体蛋白3（TLR4/NF-κB/NLRP3）信号通路及下游炎症相关因子半胱氨酸天冬氨酸水解酶-1（Caspase-1）,白细胞介素-1β（IL-1β）,紧密连接蛋白-1（ZO-1）,闭合蛋白（occludin）表达水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠体质量显著升高（P<0.01）;血清FBG,FINS和HOMA-IR明显升高（P<0.05）;血清T,LH/FSH显著升高（P<0.01）;子宫脏器比显著降低（P<0.01）,卵巢脏器比显著升高（P<0.01）,镜下可见卵巢中囊性扩张卵泡及闭锁小卵泡数量明显增多,黄体数量显著减少,卵泡颗粒细胞层减少,卵泡膜显著增厚;结肠组织中ZO-1,occludin的相对表达量显著下调（P<0.01）,炎症相关蛋白TLR4,NF-κB,NLRP3,Caspase-1,IL-1β表达量明显上调（P<0.05）。与模型组比较,燮和饮低、中、高剂量组小鼠体质量显著降低（P<0.01）;燮和饮中、高剂量组血清FBG,FINS,HOMA-IR明显降低（P<0.05）;高剂量组血清T,LH/FSH显著降低（P<0.01）;卵巢脏器比明显降低（P<0.05）,子宫脏器比显著升高（P<0.05）,卵巢中囊状卵泡明显减少,内见黄体,卵巢颗粒细胞正常排列,卵泡膜略增厚;高剂量组结肠组织TLR4,NF-κB,NLRP3,Caspase-1,IL-1β蛋白表达显著下调（P<0.01）,ZO-1,occludin蛋白表达量显著上调（P<0.01）。结论 燮和饮调控肠道TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路,减少下游炎症因子释放,通过重建肠黏膜屏障功能及抑制肠道炎症反应,改善肥胖和IR,从而逆转PCOS-IR。     

OK-432肿瘤细胞疫苗对DBA/2小鼠舌癌生长抑制作用

目的利用DBA/2小鼠移植舌癌荷瘤模型,探究OK-432肿瘤细胞疫苗对舌癌的抑制作用。方法以戊二醛为交联剂,使KLN-205细胞与OK-432产生交联,制备OK-432肿瘤细胞疫苗;将DBA/2小鼠随机分为4组,每组20只,分别右侧腹部皮下注射0.9%氯化钠注射液、OK-432、灭活的KLN-205细胞、OK-432疫苗,接种KLN-205肿瘤细胞后观察对比舌癌瘤体大小,并用统计学分析其结果。结果肿瘤大小除KLN-205组与对照组间差异没有统计学意义(P=0.094)外,其余各组间差异均有统计学意义,其中OK-432疫苗组肿瘤体积均小于其他3组。结论 OK-432肿瘤细胞疫苗能抑制小鼠舌癌的生长,具有一定的抗肿瘤效应。     

荆防颗粒对雌性小鼠性激素的影响

目的：探讨荆防颗粒对雌性小鼠雌激素和雄激素水平的影响。方法：将4周龄雌性昆明小鼠随机分为对照组,荆防颗粒高、中、低剂量组,分别给予去离子水和荆防颗粒溶液连续灌胃4 d,检测小鼠血清雌二醇和睾酮水平,检测小鼠血清不同时间点雌二醇水平变化;将8周龄雌性C57小鼠随机分为对照组,模型组,荆防颗粒高、中、低剂量组,将小鼠背部脱去毛发,荆防颗粒组和模型组给予二氢睾酮皮下注射,对照组给予注射用大豆油皮下注射,对照组和模型组用去离子水灌胃,荆防颗粒组用荆防颗粒溶液连续灌胃18 d,观察小鼠背部毛发生长情况,检测血清睾酮、雌二醇水平,观察皮肤和卵巢病理变化。结果：荆防颗粒可以升高正常小鼠血清雌二醇水平,降低睾酮含量（P<0.05）;与模型组比较,荆防颗粒能降低外源性雌二醇的峰谷波动幅度,减缓雌二醇的代谢;与模型组比较,荆防颗粒可以升高雄激素性斑秃模型雌性小鼠血清中的雌二醇水平,降低睾酮水平（P<0.05）,并具有一定的促进毛发生长和卵巢保护作用,与对照组睾酮浓度比较无明显降低作用。结论：荆防颗粒可以促进正常雌性小鼠的雌激素分泌,对外源性性激素引起的性激素水平异常具有调节作用,并且对雄激素性斑秃模型小鼠具有一定的促毛发生长和卵巢保护作用。