肥胖与PPARγ及脂肪因子的研究进展

肥胖，即脂肪细胞数量的过度增加和体积的过度增大，并以体脂的形式储存过多摄入的能量，它是糖尿病、冠心病、高血压、高脂血症等许多严重疾病的共同危险因素。肥胖的发生除与不良生活习惯有关外，遗传因素和胰岛素抵抗是导致肥胖的最主要原因。过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARγ）是脂肪细胞基因表达和胰岛素细胞间信号传递的主要调节者，参与脂肪细胞分化和脂代谢调节，与肥胖密切相关。因此，涉及脂肪细胞的过度增殖和分化而造成生成过多脂肪细胞的分子机制，以及脂肪组织分泌的多种细胞因子在机体能量、糖、脂代谢和免疫反应等方面所发挥的调节作用，一直是肥胖和糖尿病研究领域十分关注的问题。     

改良型序列特异性引物PCR用于脂联素基因单核苷酸多态性的检测

目的运用序列特异性引物PCR技术（SSP-PCR）研究基因单核苷酸多态性。方法根据GenBank中人脂联素基因（APM1）序列及SNP信息,利用Primer5.0设计引物,通过PCR技术检测APM1的SNPs。结果建立并优化了序列特异性引物PCR（SSP-PCR）技术,并可快速、直观、准确地进行基因分型。结论改良的SSP-PCR技术是一种特异性更高、操作简便的SNP检测方法。     

利用染色质隔离子构建人基质金属蛋白酶-12转基因表达载体

目的：在构建巨噬细胞特异表达且带有染色质隔离子的人基质金属蛋白酶-12（hMMP-12）转基因表达载体的基础上构建hMMP-12转基因兔动物模型。方法：首先通过RT-PCR方法扩增hMMP-12基因．产物亚克隆到pGEM—T载体，测序后获得pGEM—T-hMMP-12，然后利用pJC13构建带有染色质隔离子和清道夫受体A增强子、启动子和人生长激素尾的亚克隆pJC13-SR，再利用pGEM-T-hMMP-12和pJC13-SR重组质粒，构建巨噬细胞特异性的转基因表达载体pJCl3-SR．hMMP-12，最后pJCl3-SR—hMMP-12表达载体线性化，显微注射家兔受精卵制备转基因兔，并进行PCR扩增及Southern Blot转基因效果分析鉴定。结果：（1）通过DNA测序和限制性核酸内切酶酶切鉴定证实，hMMP-12成功克隆到所需表达载体中；（2）转基因后获得仔兔36只，以PCR检测结果计算，转基因总效率为1．4％-3．4％，整合率为20％-50％；以Southern Blot检测结果计算，转基因总效率为0．5％．2．2％，整合率为13％～17％。结论：转基图表达载体的成功构建，为hMMP-12转基因兔动物模型的构建和研究MMP-12在动脉粥样硬化的形成和发展中的作用机制奠定了基础。     

浅谈开设生物化学开放性及设计性实验教学的体会

生物化学既是21世纪的前沿学科,又是重要的医学基础学科。设计性和开放性实验为实现学以致用,培养知识、素质、能力三位一体的新型医学人才提供了一个施展的平台,它有助于培养学生的创新意识和科研技能。实践证明,开展设计性和开放性实验有助于提高学生的综合素质,能够很好地培养学生的综合能力和科学的探索精神,更好地培养医学生的实践技能,并适应社会发展的需要。     

敲低Stau1后小鼠前脂肪细胞系3T3-L1中FOXP1的表达增加

目的 在小鼠前脂肪细胞系3T3-L1分化过程中敲低双链RNA结合蛋白Staufen1(Stau1)后筛选差异表达的基因,分析其生物学功能,并用qPCR验证测序结果。方法 用RNA-seq分析Stau1敲低后基因的转录调控。构建STAU1 shRNA并转染3T3-L1细胞,鸡尾酒方法诱导其分化为成熟脂肪细胞,收取0、4 d的细胞设立对照组和STAU1敲低组(各3组生物重复样本)收取12组样品的细胞基因芯片信息,以变化倍数log2(Fold change)>1且校正后的P<0.05作为条件筛选Stau1敲低的细胞与对照组样本间的差异表达基因,进行基因本体论(GO)及代谢通路分析(KEGG通路数据库),qPCR验证差异表达的基因。荧光素酶报告基因实验验证SATU1与叉头盒蛋白P1 FOXP1 mRNA 3′UTR上Staufen1结合位点(SBS)存在结合。结果 较对照组STAU1敲低细胞组中共筛选出差异表达基因588个,其中上调406个、下调182个。差异表达基因主要参与的生物学过程中脂代谢、炎性反应因子,主要富集的信号通路有糖代谢和能量代谢相关通路。敲低Stau1后FOXP1...     

雨课堂在生物化学课程民汉合班形成性评价中的应用初探

目的：探索雨课堂在民汉合班生物化学课程形成性评价中的应用效果。方法：选取新疆医科大学临床医学专业2017级和2018级民汉合班学生共642人作为研究对象,其中生物化学课程结束时,仅采用终结性评价的313名学生作为对照组;采用雨课堂形成性评价和终结性评价相结合的329名学生作为试验组。从形成性评价各部分成绩、及格率以及问卷调查三方面评价效果,应用SPSS 19.0对数据进行描述性分析和t检验。结果：试验组和对照组的期末综合成绩有统计学意义(t=-7.516,P=0.000);将少数民族学生成绩单独统计后,试验组与对照组有统计学差异(t=-4.982,P=0.000)。与对照组相比,试验组学生的及格率提高,并且试验组少数民族学生的及格率也高于对照组。调查问卷结果显示,85.95%的学生认可终结性评价与形成性评价相结合的评价方式,约80%的学生在自主学习及分析、解决问题能力方面得到提高。结论：线上线下相结合的雨课堂形成性评价,有助于临床医学专业提高民汉合班生物化学课程的教学质量。     

Ad36诱导分化的脂肪细胞中LncRNA00602的作用初探

目的:探讨腺病毒36型(Ad36)诱导分化的脂肪细胞中,长链非编码RNA(LncRNA)00602促进棕色化的可能作用。方法:根据Ad36感染与否,将肥胖患者分为Ad36阴性组和Ad36感染组。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2组患者网膜脂肪组织中LncRNA00602 mRNA表达水平变化,并分析其与同组...     

维吾尔族肥胖伴胰岛素抵抗患者内脂素的表达变化及意义

目的探讨维吾尔族肥胖(OB)伴胰岛素抵抗(IR)患者血清内脂素的变化及意义。方法根据胰岛素抵抗诊断标准(胰岛素抵抗指数≥2.8),将患者分为肥胖伴胰岛素抵抗组(OB伴IR组)31例,肥胖无胰岛素抵抗组(OB无IR组)26例,另选14例健康体检者为正常对照组。半定量RT-PCR方法检查研究对象网膜和皮下脂肪组织内脂素mRNA的表达水平。对所有受试者采用稳态模式评估法(HOMA)评价胰岛素抵抗(IR),采用ELISA法测定血清内脂素水平,同时进行临床生化参数的检测。结果(1)OB伴IR组血清内脂素水平高于OB无IR组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)血清内脂素与体质量、甘油三酯(TG)呈正相关,与高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)呈负相关。(3)3组网膜与皮下脂肪组织内脂素mRNA表达水平差异无统计学意义。结论血清内脂素水平的升高可能与维吾尔族肥胖患者的胰岛素抵抗有关。     

新疆维吾尔族肥胖患者网膜脂肪组织脂联素mRNA表达降低

脂肪组织是功能活跃的内分泌器官,其所分泌的脂联素(adiponeetin,APN)在血脂、糖、脂代谢、抗动脉粥样硬化中发挥有益的作用[1].本研究选取肥胖与2型糖尿病发病率较高的维吾尔族人群为研究对象,利用半定量RT-PCR技术检测不同部位脂肪组织脂联素mRNA表达水平,并探讨其影响因素.     

代谢综合征大鼠模型的实验研究

目的 通过2 种不同饲料联合链脲佐菌素(STZ)诱导建立代谢综合征(MS)大鼠模型,为该疾病的研究探索理想的建模方法.方法 90 只大鼠随机分为3 组:MS模型正常盐组(NS)、MS模型高盐组(HS)和对照组(NC).NS组大鼠饲喂高脂高糖饲料,HS组大鼠饲喂高脂高糖高盐饲料,NC组大鼠饲喂基础饲料.10周末,NS组和HS组选择腹围达标的大鼠,给予一次性腹腔注射 STZ 25 mg/kg.分别在不同时间点测定各组大鼠体重、腹围、血压、空腹血糖及血脂等指标.结果 NS组和HS组大鼠体重、腹围、空腹血糖与NC组相比均升高,差异有统计学意义(P＜0.05～0.01).12周末时, HS组大鼠血糖及腹围较NS组增高,差异有统计学意义(P＜0.05);12周末时,HS组大鼠高密度脂蛋白胆固醇较NS组降低,差异有统计学意义(P＜0.05).NS组成模率为40.0%,HS组成模率为66.7%,2 组成模率差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用高脂高糖饮食或高脂高糖高盐饮食诱导加腹腔注射小剂量STZ的方法可在短时间内成功复制稳定的MS大鼠模型,且HS组成模率较NS组高.