庆大霉素分泌过程的初步研究

应用恒温系统及缓冲液体系,考察了温度及pH值分泌过程的影响,然后在此基础上又讨论了添加葡萄糖、金属离子Fe^2 、K^ 和Mn^2 以及超声波和微波处理的效果,实验发现,pH＝7．4,温度34℃,以及添加5g／LKCl或50mg／LMnSO4都能刺激庆大霉素的分泌。     

南昌链霉菌生物合成梅岭霉素种子制备优化

以参数相关理论为指导,优化南昌链霉菌生物合成梅岭霉素种子制备工艺。结果表明,培养20～35h后,pH7.30～7.50,总糖<0.35%,pmv>10%,溶磷<100μg/ml,菌丝分化启动有利于提高梅岭霉素的发酵效价。     

反相高效液相色谱法测定发酵液中梅岭霉素

目的:建立了发酵液中梅岭霉素的定量测定方法。方法:反相高效液相色谱法,Hypersil-C_(18)柱(4 mm×125mm,5μm),流动相为乙腈-水(78:22),流速1.2mL·min~(-1),检测波长238 nm,室温测定。结果:在1O.2～163.2μg·mL~(-1)范围内梅岭霉素浓度与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 7,回归方程为Y=25.44X+2.72。样品的日间 RSD≤1.8％,高中低浓度样品的日内RSD≤2.5％(n=8)。平均回收率为96.9％(n=8,RSD<3.0％)。结论:本方法快速、准确、简便、稳定,为定量分析提供了可靠的依据。     

复合诱变筛选avermectins高产菌株

由Streptomyces avermitilis初始菌株经过自然分离可以得到三种不同类型的菌株，即灰色粉末型、白色和光秃型。其中灰色粉末型产素水平最高，摇瓶发酵效价达到6835．1μg／ml，B1组分达到56．3％。经过紫外线和亚硝基胍对初始菌株的孢子的诱变及对其原生质体的诱变再生。并且经过异亮氨酸和链霉素的定向筛选，得到的高产菌株摇瓶发酵效价达到8542．9μg／ml，B。组分达到64．9％；同时通过对高产菌株进行传代培养检验其传代稳定性，结果表明，传代3代后，菌株开始退化，并且其发酵效价有比较显著的下降。     

利用均匀实验优化利福霉素SV发酵培养基氮源配比

应用均匀设计的方法对利福霉素SV发酵培养基中的氮源配比进行优化。研究了氮源中各成分对发酵效价的影响。确定各成分的最佳配比并用实验验证，使摇瓶发酵效价提高了10％以上。并对利福霉素SV产生菌在新、老培养基中的代谢特性进行了比较。     

梅岭霉素的分离纯化

利用南昌霉素在较低pH介质中加热时易降解而梅岭霉素较稳定的性质,结合溶剂萃取法除去杂质,纯化梅岭霉素.经全波长扫描、HPLC和质谱分析等,推测梅岭霉素同系物的分子结构.     

基因重组毕赤酵母表达瑞替普酶过程中的酶活性分析

目的 研究毕赤酵母诱导表达瑞替普酶过程中的关键酶活性.方法 以摇瓶培养为研究对象,在用甲醇诱导后,连续取样,破碎菌体制成无细胞悬液,检测乙醇氧化酶、甲醛脱氢酶、PDC、G-6-PD、ID、α-KGD和SD的活性.结果 乙醇氧化酶比活在0～6 h逐渐增加,在第6h达到最大44.5 U/mg蛋白.随后迅速下降.在第24～48 h有所回升,然后又逐渐降低.FAD比活在第0～48h逐渐增加.在第48h达到最大值6.72U/mg蛋白,随后逐渐降低.直至放瓶.G-6-PD比活在第2h～6h逐渐增加,在第6～24h逐渐降低,在第24～48h逐渐升高,48h后又逐渐降低直至放瓶.PDC比活在第0～6h逐渐降低,随后略有升高的趋势.ID、α-KGD、SD的活性变化有相似趋势.在前6 h酶活均迅速下降,在第6～24 h缓慢下降,随后ID活性继续缓慢下降,而α-KGD和SD活性在第2～48 h逐渐升高,在第48 h均达到最高值,然后又逐渐降低,直至放瓶.结论 根据酶活变化规律,可将整个诱导期分为4个阶段:第1阶段为诱导0～6 h,是甲醇适应期;第Ⅱ阶段为诱导6～24h,是快速生长期;第Ⅲ阶段为诱导24～48h,是产物积累期;第Ⅳ阶段为诱导48～72h,是代谢缓慢期.在甲醇适应期,甲醇完全氧化代谢流占主导地位.在快速生长期和产物积累期,代谢流逐渐向糖酵解途径和TCA循环途径迁移.     

重组毕赤酵母表达期菌体浓度的软测量模型

建立了用于在线估计高密度重组毕赤酵母培养过程中处于表达阶段的菌体密度软测量模型。分别对比了基于遗传算法（GA）的动力学软测量模型以及基于人工神经网络（ANN）的软测量模型，并对神经网络软测量模型的拓扑结构以及训练参数进行了初步探讨。当采用基于遗传算法（GA）的动力学模型，模型拟舍值的最大误差为7．63％；在采用神经网络软测量技术时，选取合适的模型结构和输入参数，最大误差为3．12％，而且软测量模型可以很好地反映菌体浓度实时变化趋势。该研究结果表明，在酵母细胞的高密度培养过程中采用基于神经网络的软测量模型具有较高的准确度，可以较好地实时反映发酵过程中菌体浓度的变化。     

亮氨酸对必特螺旋霉素发酵组分的影响

本文针对必特螺旋霉素发酵主要组分异戊酰基螺旋霉素以及异戊酰基螺旋霉素Ⅲ的提高，在摇瓶培养基试验中，通过一次性添加与分批添加终浓度为15．4mmol／L的亮氨酸，发现分批添加亮氨酸可以维持效价基本不变，而总异戊酰基螺旋霉素与异戊酰基螺旋霉素Ⅲ分别由对照的31．1％和12．0％提高至46．9％和19．5％。通过分析发酵过程的有机酸以及氨基酸的变化规律，讨论了亮氨酸提高必特螺旋霉素主要组分的作用机理，同时在15L发酵罐中对分批添加亮氨酸添加效果进行了验证试验，结果表明，发酵液必特螺旋霉素组分中总异戊酰基螺旋霉素和异戊酰基螺旋霉素Ⅲ在96h分别提高至59．91％和21．45％。     

应用神经网络和遗传算法优化利福霉素B发酵培养基

对培养基进行优化时，会获得大量的实验数据，但这些实验数据往往不能被进一步利用。如果使用一些不同的方法对历史数据进一步挖掘就可能得出额外的规律。本文使用神经网络对历史数据进行处理，得到了利福霉素B培养基成份和发酵效价之间的关系；再以这个关系作为遗传算法的适应度函数，在一个相对大的空间内快速搜索最优解。优化的培养基使摇瓶发酵效价提高了17．9％，说明所建立的模型能够实现培养基优化的目的并具有数据挖掘的功能。