流感嗜血杆菌基因分型研究

目的应用生物学分型、血清学分型和脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)分析从健康人群分离的流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae,Hi)的分子流行病学规律以及与Hi生物学分型、血清学分型、青酶素酶之间的关系。方法对深圳市1月龄以上380名健康人群采集咽拭子,共分离培养175株流感嗜血杆菌,参照Pitt-man方法对菌株进行血清学分型,应用PCR方法进行流感嗜血杆菌属及荚膜鉴定,参照Kilian方法对其中的141株菌株进行生物学分型,从不同年龄组选出共59株流感嗜血杆菌株,应用PFGE技术进行分子分型研究。结果 141株流感嗜血杆菌分为8个生物型,Ⅰ~Ⅷ型分别为8.51%、36.88%、34.04%、4.96%、7.80%、0.71%、6.38%、0.71%。分离的菌株以无荚膜的不可分型Hi为主(97.14%),5株为有荚膜型,其中2株为b型,3株为e型,Hi产青霉素酶的阳性率为14.18%,59株Hi菌株分为52个PFGE基因型。结论深圳市健康人群Hi携带菌株多为无荚膜的不可分型流感嗜血杆菌,生物学分型以Ⅱ、Ⅲ型为主。PGFE基因分型呈明显的多态性。     

广州管圆线虫成虫cDNA文库构建

目的　构建广州管圆线虫成虫cDNA文库。方法　提取广州管圆线虫成虫总RNA ,用Clontech公司SMARTTMcDNA文库构建试剂盒反转录合成第一链cDNA ,然后通过长距离PCR方法合成双链cDNA并扩增 ;PCR产物与λTripIE× 2载体连接并包装 ,建成未扩增文库 ;检测未扩增文库滴度和重组效率后 ,进行文库扩增及测定扩增文库的滴度。结果　经测定 ,未扩增文库滴度为 9 7× 1 0 6 pfu/ml,重组效率达 99 2 %以上 ,文库扩增后滴度达 9 1 3× 1 0 9pfu/ml。结论　已成功构建了广州管圆线虫成虫cDNA文库     

深圳市南山区细菌性食物中毒病原菌检测结果分析

目的分析深圳市南山区近年来细菌性食物中毒病原菌菌谱、特征,为预防控制细菌性食物中毒提供科学依据。方法对深圳市某区2003—2006年细菌性食物中毒实验室检测样品及结果进行统计分析。结果4a共230起细菌性食物中毒中,依次以副溶血性弧菌(23.0%)、金黄色葡萄球菌(16.5%)、变形杆菌(7.8%)、蜡样芽胞杆菌(3.0%)、沙门菌(1.3%)为主要致病菌;发生率最高在第3季度(40.4%)。结论该地区细菌性食物中毒以副溶血性弧菌为主要病原菌,加强食品卫生安全监管,提高实验室的快速检测能力非常必要。     

市售海产品副溶血性弧菌污染状况调查

目的了解本地区海产品副溶血性弧菌的污染情况，为预防由海产品引起的细菌性食物中毒及溯源工作提供参考，对结果作统计分析。方法随机抽取市售海产品200份按国家标准GB／T-4789—2003及《卫生防疫细菌检验》闭操作规程进行副溶血性孤菌分离培养及鉴定。结果在200份样品中检出105株副溶血性弧菌，检出率为52．5％。其中鱼类检出率67％，虾类捡出率60％，贝类检出率16％。检出副溶血性弧菌的血清学分型（群），以O3群居多，占19．0％（20／105），其次为O4、O11、O1群，未定群有32株占30．5％，K抗原未栓出细菌性食物中毒常见的O3：K6型流行株。结论本地区海产品副溶血性孤菌存在着严重污染，以O3群居多。     

深圳市某校一起诺瓦克病毒性胃肠炎疫情调查分析

目的:调查以发热呕吐、腹泻为主要症状的胃肠炎的病因,查找传染源,以采取相应的控制措施。方法:采用流行病学调查方法对病例进行调查,对病人以及食堂员工肛拭、粪便以及环境样品采用实时荧光PCR进行定性检测。结果:经诺瓦克病毒基因检测,学生样本3例阳性;教师食堂员工样本阴性;环境样本1例阳性。6月15、19日对73名学生食堂员工进行诺瓦克病毒基因检测,分别有7例(9.6%)和5例(6.9%)阳性。25日,再次对73名食堂员工进行检测,全为阴性。通过测序分析比对,从食堂员工以及学生中检测出的诺瓦克病毒为同一型诺瓦克病毒。结论:该校学生胃肠炎是由诺瓦克病毒感染引起,学生食堂员工带毒是引起此次诺瓦克病毒发生流行的传染源。     

传染性非典型肺炎疑似病例实验室快速诊断的初探

目的 对传染性非典型肺炎(SARS)疑似病例进行实验室快速诊断。方法 采集SARS疑似病例血清，先对标本进行病毒颗粒浓缩，再用特异性引物进行Nested RT—PCR，检测SARS冠状病毒RNA；另外，采用免疫荧光法进一步同时检测血清中9种呼吸道病原体(嗜肺军团茵血清型1、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道舍胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒)IgM抗体。结果 对21倒SARS疑似病例血清进行Nested RT—PCR，结果均未扩增出目标条带。进一步对21例患者血清进行同步检测血清中9种病原体IgM抗体，共有14例患者甲型流感病毒IgM抗体阳性，阳性率为67％。结论 对SARS疑似病例进行SARS冠状病毒RNA和其他9种呼吸道病原体IgM抗体检测是实用可行的。     

深圳市中央空调冷却塔水军团菌AFLP分型研究

目的 了解深圳市中央空调冷却塔水中军团菌的多态性，分析优势种群和菌型分布，为建立军团菌分子型别库提供资料。方法 运用The European Working Group for Legionella Infections（E．W．G．L．I）组织制定的扩增片断长度多态性分型（Amplified Fragment Length Polymorphism，AFLP）方法，对深圳市中央空调冷却塔水中军团菌进行分子分型。结果 按照血清分型方法，将冷却塔水中军团菌分为Lp1、Lp2-14以及非嗜肺型，运用AFLP技术对50株军团菌菌株分型，结果将22株Lpl血清型分为7种AFLP型，分别记为AFLP1—7，以AFLP2型与AFLP5型为主要型别；20株Lp2-14血清型分为7种AFLP型，分别记为AFLPⅠ—AFLPⅦ，以AFLPⅠ、Ⅱ为主要型别；9株非嗜肺军团菌血清型分为5种AFLP图谱。结论 AFLP分型技术能初步分析深圳市军团菌优势种群，为对军团菌监测及致病性军团菌型别的分析提供基本资料。     

金黄色葡萄球菌不同来源分离株的耐药结果分析

目的 检测金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)对常用抗生素的敏感性,了解其病人分离株(下称病人株)与环境分离株(下称环境株)的耐药特点. 方法 采用VITEK 2 compact全自动微生物鉴定系统对从医院病人标本及环境标本中分离的85株SA菌进行耐药性试验及分析研究. 结果 85株SA菌对15种抗生素的总耐药率为38.4％,其中对青霉素、苯唑西林均耐药,对奎奴普汀/达福普丁、呋喃妥因均敏感;病人株与环境株对15种抗生素总耐药率差异较小,但对庆大霉素等7种抗生素的耐药率,则是病人株明显高于环境株;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)检出率为14.1％(12/85),全为病人株中检出,环境株中未发现. 结论 SA菌特别是MRSA菌存在多重耐药性,病人株中MRSA检出率明显高于环境株.同时环境株存在较高耐药水平,对某些药物耐药性甚至高于病人株,具体原因有待进一步的研究.     

103例宫内感染巨细胞包涵体病临床治疗观察

巨细胞包涵体病(Cytomegalic inclusion disease,CID)是由巨细胞病毒(Cytomegalic Virus,CMV)感染后引起的全身多个器官损害并出现临床症状的常见病。特点是在受损的器官组织内出现猫头鹰眼样包涵体的巨细胞。HCMV感染极广泛,是先天性感染的重要病原之一。近8年来,我科门诊及住院新生儿宫内感染CID患儿103例,临床治疗效果总结如下。     

深圳市南山区市售海产品致病性弧菌污染调查

目的了解深圳市南山区市售海产品致病性弧菌的污染情况,更好地溯源和预防由海产品引起的细菌性食物中毒。方法按《霍乱防治手册》第五版及《卫生防疫微生物检验》进行分离培养和鉴定。结果在180份样品中检出94株致病性弧菌,检出率为52.20%。其中海产品样90份,有63份致病性弧菌阳性,阳性率为70.00%,海产品涂抹样90份,有31份阳性,阳性率为34.40%。检出的致病性弧菌以副溶血性弧菌为主,有48株占总检出率的51.10%。其次是河弧菌13株占总检出率的13.80%。对90份海产品加热15分钟之后再检测,结果均未分离到致病性弧菌。结论经过调查发现市售海产品严重存在着致病性弧菌的污染,特别是副溶血性弧菌污染较高,加热前、后致病性弧菌检出率有显差异,提示加强市售海产品的常规监测,同时注意海产品烹调和饮食卫生,防止由海产品引起的食源性疾病发生。