穴位注射加雾化吸入治疗慢性咽炎113例

高原地区气候干燥，风沙大，慢性咽炎发病率高，治愈难度大。我科从1999年1月-2001年12月采用鱼腥草注射液穴位注射加雾化吸人治疗慢性咽炎113例，疗效满意，现报道如下。     

骨髓基质细胞对中脑神经干细胞分化为神经元的诱导作用

目的:观察成年大鼠骨髓基质细胞诱导新生大鼠中脑神经干细胞分化为神经元的机制。方法:采用骨髓基质细胞和神经干细胞共培养方法,通过显微镜观察神经干细胞的分化状态;使用免疫组织化学技术,分析神经元在神经干细胞后代中所占的比例。结果:(1)骨髓基质细胞可诱导神经干细胞分化为高比例神经元;(2)骨髓基质细胞可促进神经元的存活。结论:骨髓基质细胞可提供神经干细胞分化为神经元和促进神经元存活的信号物质。     

聚乙二醇修饰胰高血糖素样肽1类似物反应条件的响应面法优化#br#

目的 用响应面法对马来酰亚胺活化相对分子质量40 000的聚乙二醇（polyethylene glycol,PEG）（MAL-PEG_40K）修饰胰高血糖素样肽1类似物（glucagon-like peptide-1 analog,GLP-1a）的反应条件进行优化。方法 对GLP-1a浓度、GLP-1a/MAL-PEG40K摩尔比、反应液pH值、反应温度、反应时长进行单因素试验。以前3个条件为自变量, PEG修饰率为响应值,根据中心组合试验设计原理,研究各自变量及其交互作用对PEG修饰率的影响。通过高效液相色谱法分析PEG修饰率,依据回归分析确定各反应条件的最优值。 结果 GLP-1a与MAL-PEG_40K的最佳反应条件为：GLP-1a浓度2.5 mg/ml,GLP-1a/MAL-PEG_40K摩尔比1∶1.25,反应液pH 8,反应温度4 ℃,反应时长60 min。该优化条件下,GLP-1a的PEG修饰率可达91.0%。结论 响应面法获得了GLP-1a与MAL-PEG_40K的最佳反应条件。     

PACAP促PC12细胞突起生长的分子机制

垂体腺苷酸环化酶激活肽 (PACAP)具有广泛的生理功能。近年来的研究发现 ,PACAP具有重要的神经营养作用。 PACAP可通过激活多条细胞内信号转导通路 ,促使 PC12细胞突起生长 ,使其向神经元样细胞分化。本文综述了 PACAP引起 PC12细胞突起生长的信号转导通路 ,有助于深入了解 PACAP神经营养作用的分子机制     

周围神经侧侧缝合后再生能力、质量及其机制

目的 探讨周围神经侧侧缝合后神经能否再生、再生的质量以及再生神经的来源. 方法 将 20只实验兔随机数字表法分为两组,每组 10只.左侧后肢胫神经、腓总神经为实验神经,切断腓总神经 A组腓总神经断端以远 1.5 cm处将胫神经、腓总神经相邻面的神经束、外膜切开,相对缝合束、外膜; B将腓总神经远断端与胫神经相邻面行端侧外膜缝合.术后 12周腓总神经远端注入辣根过氧化物酶逆行示踪,行形态学和组织学检测. 结果 术后 12周两组神经缝合后神经均再生,再生质量无显著差异. 结论 周围神经侧侧缝合后神经能够再生,再生侧支来源于胫神经,再生质量与神经端侧缝合相似.     

胶质细胞源性神经营养因子对脊髓前角运动神经元的保护作用

目的证实胶质源性神经营养因子(glial cellline-derived neurotrophic factor,GDNF)对脊髓前角运动神经元有保护作用.方法切断SD大鼠一侧坐骨神经建立脊髓前角运动神经元损伤模型,借助单盲端硅胶管系统在损伤神经局部给予GDNF,术后不同时间分别取L5脊髓切片,利用酶组织化学染色方法显示胆碱酯酶和酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)活性并进行图像分析.结果坐骨神经切断后第4,9,16及21 d,对照组和GDNF组胆碱酯酶活性分别为21.53±1.54和23.67±1.08(P＜0.05),19.82±1.35和22.87±1.04(P＜0.01),22.55±1.20和25.25±1.13(P＜0.01),25.52±1.43和28.92±1.37(P＜0.01);对照组和GDNF组ACP活性(平均灰度)分别为37.49±1.39和35.40±1.18(P＜0.05),40.94±1.38和38.43±1.31(P＜0.05),22.55±1.20和25.25±1.13(P＜0.05),37.15±1.52和34.68±1.43(P＜0.05)结论GDNF对损伤的脊髓前角运动神经元有保护作用.     

光刺激体外培养的NG2细胞对海马神经元内Ca2+活性和电活动的影响

目的观察选择性光刺激NG2细胞对海马神经元内Ca2+活性和电活动的影响,并初步探讨可能的作用机制。方法体外纯化培养新生SD大鼠NG2细胞,通过脂质体转染的方法,在NG2细胞中特异性表达光敏感通道(channelrhodopsin-2,ChR2)蛋白DNA,并与体外培养7 d的海马神经元共培养48 h,采用蓝光（470 nm、5 s、5 mW/cm2）选择性刺激表达ChR2蛋白的NG2细胞,利用Ca2+成像和电生理的方法记录NG2细胞周围海马神经元中的Ca2+浓度变化和电流改变情况,同时比较加入/未加入γ-氨基丁酸A型受体抑制剂情况下神经元的电流变化特点。结果当蓝光刺激表达ChR2蛋白的NG2细胞后,首先NG2细胞内的Ca2+信号增强,随后其周围海马神经元内的Ca2+升高约20%;Ca2+缓慢下降后再次出现一个Ca2+峰,幅度较第1次小;NG2细胞周围海马神经元的电流频率增加,振幅增大。而当预先在细胞外液中加入50 μmol/L γ-氨基丁酸A受体抑制剂后,海马神经元的电流频率和振幅较未加抑制剂组明显减小(P＜0.05)。结论选择性光刺激表达ChR2蛋白的NG2细胞可使其兴奋,且可能通过释放γ 氨基丁酸来调节神经元活动。     

神经营养因子对烫伤大鼠不同脑区NO含量的影响

目的观察烫伤大鼠脑损伤时一氧化氮(NO)含量的变化及神经生长因子(NGF)、睫状神经营养因子(CNTF)分别对其不同脑区 NO 含量的影响,以初步探讨神经营养因子对烫伤大鼠脑组织的保护作用及其可能机制。方法 SD 大鼠侧脑室埋管,麻醉后制成30%TBSAⅢ度烫伤。分成非烫伤组、烫伤组、烫伤 神经生长因子组、烫伤 睫状神经营养因子组。伤后3天,取不同脑区匀浆,测定脑组织中 NO 的含量。结果烫伤后脑组织 NO 含量明显升高,给予 NGF、CNTF 后能明显降低不同脑区 NO 的含量。结论烫伤后脑内 NO 升高可能是造成脑损伤的因素之一,NGF、CNTF 对烫伤后脑组织的保护作用可能与其降低脑组织 NO 含量有关。     

脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白表达的变化

目的：观察大鼠脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白的表达变化情况。 方法：实验于2004—07／2005—09在解放军第二军医大学神经生物实验室完成。选择SD雄性大鼠44只，采用随机数字表法分成3组：正常对照组8只，假手术组12只，脊髓损伤组24只。改良Allen法致大鼠脊髓中等程度损伤。①进行改良Tarlov评分，分为0～6级，级别越高下肢运动功能越佳。②进行改良Rivlin斜板实验，将大鼠身体轴线与斜板纵轴垂直放置，斜板每次升高5&;#176;，以大鼠能够停留5s的最大角度为其功能值。③免疫荧光染色：术后分别于1，3，7，14d取假手术组（每次2只）和脊髓损伤组（每次5只）大鼠损伤区脊髓进行免疫荧光染色测定酪氨酸硝基化蛋白的表达。④Westernblot印迹：假手术组和脊髓损伤1d组分别取4只大鼠损伤区脊髓进行Western blot印迹进一步验证。 结果：纳入动物44只，均进入结果分析。①Tarlov评分比较：正常对照组为6级，假手术组伤后1，3，7，14d分别为5．2，5．4，5．8，6．0级，与正常对照组相比差异无显著性（P〉0．05）；脊髓损伤组伤后1，3d降至最低点（1．4，2．0级），第7天时明显上升（3．1级），至伤后14d开始缓慢上升（3．5级），但仍未达到正常水平。②Rivlin斜板实验比较：假手术组伤后1，3，7，14d爬坡角度分别为73．5&;#176;，73．8&;#176;，74．4&;#176;，75．8&;#176;，差异无显著性（P〉0．05），每一时相点与正常对照组比较差异无显著性（P〉0．05）；脊髓损伤组损伤后即刻出现明显障碍，爬坡角度减小（伤后1，3，7，14d分别为35．4&;#176;，36．2&;#176;，38A&;#176;，414&;#176;），与假手术组各时相点比较差异显著（P〈0．01），随时间延续均有不同程度恢复，14d功能恢复较损伤后1d有明显提高（P〈0．01）。③免疫荧光染色：显示硝基化酪氨酸蛋白位于脊髓前角运动神经元，胶质细胞以及脊髓中央管的室管膜细胞中。正常脊髓中无酪氨酸硝基化蛋白阳性细胞。脊髓损伤组中酪氨酸硝基化蛋白呈阳性反应的脊髓细胞随着脊髓损伤后时程的延长而逐渐减少。在脊髓损伤后1，3d时最高，脊髓损伤后7d时明显减少，14d后降至更低，但仍有少量表达。脊髓损伤各组与相应时相点的假手术组相比差异显著（P〈0．05）。④Western blot印迹：假手术组脊髓组织中酪氨酸硝基化蛋白的表达极低，而脊髓损伤1d组酪氨酸硝基化蛋白表达量很高，与免疫荧光染色的结果相一致。 结论：脊髓损伤导致运动功能障碍，可能与脊髓支配运动相关的神经细胞蛋白质的酪氨酸残基发生硝基化有关。     

诱导性神经细胞研究进展

细胞的谱系转换是指一种成体细胞跨越细胞谱系,转化为另一种类型的体细胞或者前体细胞,包括直接转分化和间接谱系转换两种方式。通过谱系转换,可以将成纤维细胞、星形胶质细胞、肝细胞等多种成体细胞重编程为具有完整形态和功能的神经元、神经元前体细胞、少突胶质前体细胞或神经干细胞。诱导性神经细胞对于神经系统疾病的细胞移植治疗具有重要的应用价值,另外疾病和患者特异性神经细胞为人类神经疾病的发病机理研究和药物筛选提供了崭新的思路。本文就近几年由成体细胞经过谱系转换得到诱导性神经细胞的重要研究成果做一归纳、整理和比较,并对其前景进行展望。