多囊卵巢综合征患者卵泡液的拉曼光谱分析及其对小鼠卵母细胞体外成熟的影响

目的探究多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)患者与非PCOS患者卵泡液中的差异性代谢物及其对小鼠卵母细胞体外成熟(in vitro maturation, IVM)和体外受精(in vitro fertilization, IVF)胚胎发育的影响。方法本研究的临床资料采取回顾性队列研究的研究方法获取;动物实验采取随机对照试验。收集2019年6月至2020年6月期间在上海集爱遗传与不育诊疗中心第一次接受IVF或卵胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)周期的女性患者的卵泡液。根据是否为PCOS患者, 分为PCOS组(n=71)和非PCOS组(n=70), 回顾性分析两组患者的临床资料, 并利用深度学习的拉曼光谱分析技术检测两组患者卵泡液的代谢谱差异。后续进行实验性研究, 在PCOS患者和非PCOS患者卵泡液中进行小鼠GV期卵母细胞IVM培养, 收集两组成熟的鼠卵母细胞进行IVF, 进一步探讨卵泡液中差异性代谢物对鼠卵成熟及胚胎发育的影响。结果 PCOS组患者卵母细胞成熟率[82.19%(8...     

植入前遗传学筛查用于几种适应症的效率初探

目的探讨植入前遗传学筛查(PGS)用于染色体异常、反复种植失败和反复自然流产患者的效率。方法回顾性研究2015年1月到2016年3月在我中心行PGS治疗,共328个取卵周期和随后进行的263个冻胚移植周期,根据其适应症分为男方染色体异常(A组)、女方染色体异常(B组)、反复种植失败(C组)和反复自然流产(D组),分析4组患者的体外受精-胚胎发育情况、胚胎单核苷酸多态性(SNP)检测分析结果和临床结局。结果 4组患者成熟卵母细胞(MII)率、受精率、卵裂率、D3有效胚胎率均无统计学差异(P0.05);获卵数在A组(12.93±5.73)、B组(13.17±6.65)显著高于C组(10.48±6.07)、D组(10.76±5.47),D组可进行PGS活检的胚胎数与D3有效胚胎数的比率(57.2%)显著高于A组(51.3%)、B组(48.4%)和C组(50.0%)(P均0.05);正常核型胚胎比率C组(71.6%)、D组(58.7%)显著高于A组(39.0%)、B组(33.5%),而无可移植正常核型胚胎的周期率D组(13.5%)显著低于A组(31.3%)、B组(33.3%)、C组(29.1%)(P均0.05);4组患者的妊娠率和流产率均无统计学差异(P0.05)。结论三种适应症的患者实施PGS均能达到满意的临床妊娠率;夫妇染色体异常的患者最终获得正常核型胚胎的几率较低,但是有效避免了高流产率的风险;反复自然流产的患者经PGS筛选后胚胎移植可将流产率控制在较低水平(3.4%)。     

线粒体基因组D-loop区基因多态性与年龄及IVF-ET结局相关性

目的:研究线粒体基因组D-loop区基因的变异位点与年龄及IVF-ET或ICSI结局的相关性。方法:采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和基因片段直接测序方法测定检测167例行IVF-ET或ICSI治疗患者的外周血线粒体基因组D-loop区nt.128～599区域基因变异情况,比较不同年龄组(A组:<35岁,B组:≥35岁)变异位点、年龄及IVF-ET或ICSI结局之间的关系。结果:共有20个变异位点,其中5个为新发现的变异位点。B组的变异位点数(3.8±1.8)显著多于A组的2.6±1.3,其中nt.332C→T在A组发生率显著低于B组(2.2%vs12.2%,P=0.012),且变异位点数量与年龄间存在线性相关,相关系数为0.333。nt.332C→T、nt.249delA和nt.309del/inC三者的变异组年龄显著高于非变异组,nt.309del/inC变异组的累积胚胎平均评分显著低于非变异组(12.9±0.5vs15.5±0.7,P=0.013),nt.249 delA变异组的受精率及累积胚胎平均评分显著低于非变异组(66.86±27.28%vs75.63±21.42%,P=0.046)(12.0±0.7vs14.7±0.5,P=0.013),变异位点数量与受精率及累积胚胎平均评分间存在线性相关。结论:线粒体基因组D-loop区变异位点发生率与年龄相关,且影响IVF-ET/ICSI的受精率及胚胎质量。     

苯那普利治疗老年高血压对胰岛素水平、糖代谢的影响

目的 观察苯那普利在治疗老年原发性高血压的同时，了解其对胰岛素水平和血糖的影响。方法 选择40例无糖尿病的老年原发性高血压患者（男22例，女18例，平均年龄67岁），用苯那普利（10mg/d)治疗1月，进行治疗前后血压、胰岛素水平及血糖值的比较分析。结果 该药对血压、胰岛素水平、餐后血糖有明显降低作用。结论 苯那普利在降压的同时，能提高胰岛素的敏感性。     

GnRH激动剂对子宫内膜异位症患者卵巢颗粒细胞细胞周期及抗凋亡蛋白cFLIP表达的影响

目的 探讨GnRH激动剂（GnRHa）治疗对子宫内膜异位症（EMs）患者卵巢颗粒细胞细胞周期以及抗凋亡蛋白cFLIP表达的影响。方法 共45例接受体外授精-胚胎移植（IVF-ET）治疗的患者,其中EMs患者19例,随机分配至GnRH-a治疗组（A组,n=11)和常规长方案治疗组（B组,n=8例),另26例管性因素不孕的常规长方案治疗患者为对照组（C组）。各组取卵时收集卵泡液颗粒细胞,采用流式细胞仪检测细胞周期,Western blotting测定颗粒细胞cFLIP蛋白含量。结果 三组的受精率、临床妊娠率、种植率及流产率差异均无统计学意义（P>0.05）。三组患者G0/G1期细胞比例的差异无统计学意义（P>0.05）;A组和B组S期细胞比例显著高于C组,G2/M期细胞比例显著低于C组（P<0.05）,凋亡峰显著高于C组（P<0.05）;但A组与B组细胞周期各时相差异均无统计学意义（P>0.05）。C组卵巢颗粒细胞cFLIP蛋白表达水平显著高于A和B组（P<0.05）,A、B两组cFLIP蛋白表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 EMs患者卵巢颗粒细胞凋亡升高,且细胞周期异常;延长的GnRH-a治疗并不改善这种异常以及抗凋亡蛋白cFLIP的低表达状态。     

胚胎形态动力学参数与胚胎整倍性的关系

目的探讨胚胎形态动力学参数与胚胎整倍性之间的关系。方法回顾性分析2016年6月至2019年12月在本中心接受胚胎植入前遗传学检测(PGT)治疗的150名患者的临床资料,共纳入550枚未发生逆分裂、评分在5BC、5CB及以上的可用囊胚。进行滋养层细胞活检后采用单核苷酸多态性(SNP)芯片技术检测胚胎整倍性,并根据囊胚整倍性分为整倍体胚胎组和非整倍体胚胎组。通过时差成像技术(Time-lapse)比较两组14个胚胎早期形态动力学参数[第二极体排出时间(tPB2)、原核出现和消失时间(tPNa和tPNf)、发育至2细胞至8细胞时间(t2、t3、t4、t5、t6、t7、t8)、第二、三个细胞周期间隔时间(cc2和cc3)、第二、三次细胞分裂同步性指标(s2和s3)]及5个晚期形态动力学参数[开始致密化时间(tC)、形成桑椹胚时间(tM)、形成囊胚时间(tSB)、囊胚孵出时间(tHB)]。结果整倍体胚胎的t4[35.81(34.04,37.86) h vs. 36.47(34.14,39.08) h]和s2[0.49(0.25,1.00)h vs. 0.50(0.25,1.25)h]均显著小于非...     

分析三支冠状动脉病变患者心电图的特点

目的 :分析三支冠状动脉病变患者的心电图特点。方法 :对经冠状动脉造影证实有三支冠状动脉病变且有典型心绞痛的 10 2例患者 ,根据心电图结果 ST- T段改变将其分为 :ST- T段改变组 ,4 8例 ;无 ST- T改变组 ,5 4例。结果 :110 2例患者中 ,有 4 8例 （4 7% ）患者有不同导联的心电图 ST- T段缺血性改变 ,有 5 4例 （5 3% ）患者的心电图在心绞痛发作时无 ST- T改变。 2 ST- T段改变组中有 3例并发高血压 ,2例并发糖尿病 ;无 ST- T改变组有 9例并发高血压 ,6例并发糖尿病 ,6例同时并发高血压和糖尿病 ,两组间并发相关疾病的情况有显著性差异 （P<0 .0 5 ）。结论 :三支冠状动脉病变患者当心绞痛发作时 ,心电图无明显 ST- T改变者占一半以上 ,且该类患者更可能并发有高血压、糖尿病等疾病。     

脱氢表雄酮对卵巢储备功能低下患者的胚胎质量及卵泡液中标志物的作用

目的探讨脱氢表雄酮(DHEA)对于卵巢储备功能低下(DOR)患者胚胎质量及卵泡液标志物的影响。方法采用前瞻性随机对照研究将116名DOR患者按照1︰1随机分为DHEA组与对照组。DHEA组58名患者,给予DHEA 25 mg/次,tid,连用12周。对照组58名患者直接进入体外受精(IVF)周期。比较两组的IVF参数(获卵数、M_Ⅱ卵数、卵裂数、有效胚胎数、优质胚胎数和临床妊娠率)并利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测两组卵泡液中的抗苗勒管激素(AMH),胰岛素样生长因子(IGF)-1的含量及蛋白免疫印迹法(Western blotting assay)检测骨形态发生蛋白(BMP)-15及生长分化因子(GDF)-9在卵泡液中的表达。结果 DHEA组的有效胚胎数(2.0±1.3)及优质胚胎数(1.4±1.1)明显多于对照组(1.5±1.2,P=0.018;1.0±1.0,P=0.033),卵泡液样本中的AMH[(2.83±1.14)μg/L]及IGF-1[(94.02±38.28)μg/L]的含量明显高于对照组[(1.37±0.55)μg/L,P=0.000;(74.03±25.46)μg/L,P=0.004]。Western blotting显示,DHEA组的BMP-15蛋白的相对表达量明显增高(P0.000 1),但是GDF-9的相对表达量在两组中无统计学差异(P=0.987)。临床妊娠率在两组中也未见统计学差异(P=0.223)。结论 DOR患者在IVF周期前进行DHEA预处理可以提高优质胚胎率,这可能与卵泡微环境中的相关标志物(AMH,IGF-1和BMP-15)含量的增加有关。     

微小RNA在女性生殖调节中的研究进展

微小RNA(miRNA)是含有19~22个核苷酸序列的短链非编码RNA,调控内源性基因的转录后表达。随着miRNA在生殖领域不断被发现,miRNA作为女性生殖系统的重要调控因子越来越受到关注。miRNA通过调节靶基因的转录后水平,调控卵巢颗粒细胞的增殖、分化和凋亡并参与控制类固醇激素的分泌。卵巢功能异常,如多囊卵巢综合征(PCOS)和卵巢早衰(POF)均会发生miRNA调控异常。除此之外,miRNA还通过调节目标基因的表达决定胚胎的整倍体性及胚胎发育的命运。miRNA对于维持子宫内膜容受性非常重要,miRNA的异常表达会导致子宫内膜种植窗的偏移,从而导致胚胎种植失败。对miRNA在生殖调节中作用的了解,有助于发现新的预测体外受精成功率的生物指标和靶向治疗的位点,进一步提高辅助生殖的有效性和安全性。     

GnRH激动剂对子宫内膜异位症患者卵巢颗粒细胞细胞周期及抗凋亡蛋白cFLIP表达的影响

目的探讨GnRH激动剂（GnRHa）治疗对子宫内膜异位症（EMs）患者卵巢颗粒细胞细胞周期以及抗凋亡蛋白cFLIP表达的影响。方法共45例接受体外授精-胚胎移植（IVF-ET）治疗的患者,其中EMs患者19例,随机分配至GnRH-a治疗组（A组,n=11）和常规长方案治疗组（B组,n=8例）,另26例管性因素不孕的常规长方案治疗患者为对照组（C组）。各组取卵时收集卵泡液颗粒细胞,采用流式细胞仪检测细胞周期,Western blotting测定颗粒细胞cFLIP蛋白含量。结果三组的受精率、临床妊娠率、种植率及流产率差异均无统计学意义（P〉0.05）。三组患者G0/G1期细胞比例的差异无统计学意义（P〉0.05）;A组和B组S期细胞比例显著高于C组,G2/M期细胞比例显著低于C组（P〈0.05）,凋亡峰显著高于C组（P〈0.05）;但A组与B组细胞周期各时相差异均无统计学意义（P〉0.05）。C组卵巢颗粒细胞cFLIP蛋白表达水平显著高于A和B组（P〈0.05）,A、B两组cFLIP蛋白表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 EMs患者卵巢颗粒细胞凋亡升高,且细胞周期异常;延长的GnRH-a治疗并不改善这种异常以及抗凋亡蛋白cFLIP的低表达状态。