子宫肿瘤表皮生长因子及其受体与C-erbB-2的表达

①目的 观察子宫肿瘤组织表皮生长因子（ＥＧＦ）及其受体（ＥＧＦＲ）和Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白的表达及其意义。②方法 采用免疫组化方法检测了７３例子宫颈组织（１０例正常宫颈、１８例ＣＩＮ组织、４５例子宫颈癌组织）及７２例子宫内膜组织（增殖期内膜７例、分泌期内膜１０例、子宫肌腺病１０例、子宫内膜癌４５例）ＥＧＦ,ＥＧＦＲ及Ｃ－ｅｒｂＢ－２表达。③结果 子宫颈组织和子宫内膜组织中ＥＧＦ表达均为阴性。子     

病原生物学实验教学中PBL教学法的运用及评价

将PBL教学法运用到病原生物学实验教学中,了解PBL实验教学对学生的影响和学生对PBL教学的看法,对PBL实验教学做一客观评价。     

人乳头瘤病毒DNA的原位杂交检测

①目的探讨原位杂交检测人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）对尖锐湿疣的病因诊断意义及原位杂交的方法学。②方法用地高辛标记原位杂交技术，对４５例临床疑为尖锐湿疣的组织进行了ＨＰＶ６Ｂ／１１ＤＮＡ检测。为减轻非特异性背景染色并获得最大杂交敏感性，对消化酶、变性及杂交温度和时间、洗涤液、显色剂等原位杂交方法进行了研究。③结果３２例病理诊断为尖锐湿疣者均呈阳性，４例病理疑诊为尖锐湿疣者呈阴性，９例病理诊断为假性湿疣者均为阴性。④结论ＨＰＶ原位杂交对尖锐湿疣的诊断更具可靠性     

微生物学实验教学方法的探讨

研究探索综合设计性实验教学在病原生物学实验教学中的应用效果。选择临床医学专业7年制和检验医学专业学生,推行综合设计性实验,即在教师的指导下,学生进行资料收集和实验设计,并独立完成整个实验课题的过程。综合设计性实验有效地培养了学生创新能力和团队精神,提高学生的综合素质,对本科生的科研素质培养有很重要的意义。综合设计性实验教学可以作为培养本科学生综合素质的有效途径。     

栉孔扇贝糖胺聚糖对bFGF诱导的血管平滑肌细胞增殖及原癌基因c-myc mRNA表达的影响

目的 观察栉孔扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用及原癌基因(c-myc)mRNA表达的影响,并探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制.方法 建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的VSMC增殖模型,用MTT法观察bFGF、SS-GAG对VSMC增殖活性的影响;用原位杂交方法观察SS-GAG对bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc RNA表达的影响.结果 bFGF模型组细胞活性最高,与正常对照组比较,差异有统计学意义,不同浓度的SS-GAG组细胞增殖活性均低于模型组细胞,差别有统计学意义;bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc mRNA基因表达强度明显高于对照组;与模型组比较,SS-GAG作用后,增殖的VSMC内c-myc mRNA表达强度和阳性细胞数量均减少,差别有统计学意义.结论 bFGF对VSMC有明显的促增殖作用,SS-GAG能显著抑制VSMC增殖,且对bFGF诱导增殖的VSMC的c-myc mRNA的阳性表达有抑制作用.     

栉孔扇贝糖胺聚糖对bFGF诱导的血管平滑肌细胞增殖及原癌基因<>ic-myc mRNA表达的影响

 目的观察栉孔扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)对体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用及原癌基因(c-myc) mRNA表达的影响,并探讨SS-GAG抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法建立碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的VSMC增殖模型,用MTT法观察bFGF、SS-GAG对VSMC增殖活性的影响;用原位杂交方法观察SS-GAG对bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc mRNA表达的影响。结果bFGF模型组细胞活性最高,与正常对照组比较,差异有统计学意义,不同浓度的SS-GAG组细胞增殖活性均低于模型组细胞,差别有统计学意义;bFGF诱导增殖的VSMC内c-myc mRNA基因表达强度明显高于对照组;与模型组比较,SS-GAG作用后,增殖的VSMC内c-myc mRNA表达强度和阳性细胞数量均减少,差别有统计学意义。结论bFGF对VSMC有明显的促增殖作用,SS-GAG能显著抑制VSMC增殖,且对bFGF诱导增殖的VSMC的c-myc mRNA的阳性表达有抑制作用。     

体外培养的肝癌细胞株与正常肝细胞株蛋白质的差异表达

目的:运用SELDI蛋白质芯片技术分析体外培养的肝癌细胞株(HepG2)与正常肝细胞株(L02)蛋白质表达差异．方法:在体外培养HepG2和L02细胞株,收获细胞,将细胞用细胞裂解液裂解后,采用SELDI蛋白质芯片技术用IMAC3 及WCX2芯片检测HepG2、L02的蛋白质谱．结果:体外培养的肝癌细胞株与正常肝细胞株的蛋白质存在差异表达,IMAC3芯片共捕获61个蛋白,发现差异峰7个,与 L02细胞相比,其中3个差异蛋白在肝癌细胞中高表达,4个差异蛋白在肝癌细胞中低表达．WCX2芯片共捕获91个蛋白, 发现差异峰14个,其中3个差异蛋白在肝癌细胞中高表达,11 个差异蛋白在肝癌细胞中低表达．结论:SELDI蛋白芯片技术检测肝癌细胞株与正常肝细胞株蛋白质的差异表达方法简便,敏感性高,重复性好．     

重组大肠埃希菌-厌氧梭菌穿梭质粒pIMP1-eIL-12稳定转化生孢梭菌

目的近些年来,以厌氧芽孢梭菌作为实体瘤基因治疗载体的研究逐渐受到关注。文中用重组人白细胞介素-12(rhIL-12)基因重组大肠埃希菌(E.coli)-厌氧梭菌穿梭质粒pIMP1,并稳定转化生孢梭菌,为增强杀伤肿瘤细胞的研究提供基础。方法用SOE-PCR法将rhIL-12基因连到厌氧梭菌的内源性β1,4-葡聚糖酶(endo-1,4-glucanase,eglA)启动子和信号肽之后,构建融合基因eglAp-rhIL-12,将其插入pIMP1,构建重组质粒pIMP1-eIL-12;重组质粒首先在E.coli DH5α内进行鉴定,然后用电穿孔法转化生孢梭菌;利用红霉素抗性筛选阳性克隆,并提取质粒鉴定阳性克隆。结果酶切和测序结果表明插入到pIMP1内的融合基因eglAp-rhIL-12序列及读框正确;抗生素压力筛选和20多代随机质粒提取酶切鉴定结果表明重组质粒pIMP1-eIL-12已稳定转化生孢梭菌。结论成功获得重组质粒pIMP1-eIL-12及其生孢梭菌稳定转化株,为以后的抗肿瘤研究奠定了基础。     

沙蚕消化道D2菌株胞外蛋白酶对EMT6细胞增殖的影响

目的研究沙蚕消化道产蛋白酶菌D2株胞外蛋白酶对鼠乳腺癌细胞EMT6增殖的影响。方法选用鼠乳腺癌细胞EMT6作为靶细胞,用0．0043-43μmol／L浓度的沙蚕消化道产蛋白酶菌D2株胞外蛋白酶（D2蛋白酶）,通过体外细胞培养法进行细胞增殖抑制检测,测其吸光度（OD）值,计算细胞增殖抑制率,与阳性对照组（紫杉醇组）比较。结果实验组OD值低于空白对照组,且存在时间和剂量依赖关系。结论沙蚕消化道产蛋白酶菌D2株胞外蛋白酶对鼠乳腺癌细胞EMT6的增殖存在抑制作用,显示出一定的抗肿瘤活性。     

核酸杂交及聚合酶链反应检测人微小病毒B19感染

检测人微小病毒Ｂ19(ＨＰＶＢ19)采用聚合酶链反应(ＰＣＲ)、核酸杂交等基因诊断技术仍是目前最常用的方法 ,本研究对两种方法进行了比较。一、材料与方法1 标本来源 :于青岛大学医学院附属医院及第二附属医院采集 2 6例不明原因自然流产患者的血、宫颈分泌物及流产胎块组织 ;同期采集 2 0名健康人工流产者的上述标本。2 试剂 :ＰＣＲ引物参考ＨＰＶ19全基因序列设计[1] ,中国科学院微生物所合成 ,(Ｋ1:ＡＴＡＡＡＴＣＣＡＴＡＴＡＣＴＣＡＴＴ 2 936 2 95 4,Ｋ2 :ＣＴＡＡＡＧＴＡＴＣＣＴＧＡＣＣＴＴＧ 36 17 36 35 6 99ｂｐ ;Ｋ3:ＴＴ…