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~~新疆家蚕抗茵肽(Cecropin-XJ)在Pichia pastoris中的表达@刘忠渊$新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点室实验室!新疆生物资源基因工程重点实验室,新疆乌鲁木齐830046
@张富春$新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点室实验室!新疆生物资源基因工程重点实验室,新疆乌鲁木齐830046
@赵干$新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点室实验室!新疆生物资源基因工程重点实验室,新疆乌鲁木齐830046
@单文娟$新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点室实验室!新疆生物资源基因工程重点实验室,新疆乌鲁木齐830046
@… 相似文献
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新疆家蚕抗菌肽(Cecropin-XJ)在Pichia pastoris中的表达 总被引：3，自引：1，他引：2
研究目的是在Pichia pastoris真核表达系统中分泌表达新疆家蚕抗菌肽(cecropin-XJ)．将pMDl8-T-cecropin-XJ上的抗菌肽基因cecropin-XJ亚克隆至穿梭质粒pGAPZaA上．用AvrII酶切使之线性化后．采用LiCl法转化Pichia pastoris SMDll68,转化子经小瓶发酵,结果表明重组cecropin-XJ可以在α因子的引导下，分泌到培养基中，表达产物的分子量在14．4KDa～20．1KDa与31．0KDa～43．0KDa之间，各有一条特异性的条带，且表达产物有明显的抑菌活性和热稳定性．这一发现为抗菌肽在农业、医疗卫生、畜牧业等方面的应用奠定基础，同时为深入研究抗菌肽作用机制提供了依据． 相似文献
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本研究利用酵母Pichia pastoris真核表达系统表达人乳头瘤病毒16(HPVl6)E7蛋白，试图解决新疆维吾尔妇女高发宫颈癌的诊断、疫苗的研究中抗原蛋白需要的问题。依据新疆维吾尔妇女宫颈癌组织克隆获得的HPVl6—E7基因序列设计引物，并分别在5’引物和3’引物中引入了EcoR I和Xba I酵切位点，经RCR扩增后连接到pMDl8—T载体上，再将HPVl6—E7克隆至穿梭质粒pGAPZαA上，获得的重组穿梭质粒pGAPZαA—E7经线性化后，采用UiCl法将重组穿梭质粒转入酵母细胞内，Zeocin 筛选阳性克隆，经小瓶发酵后，取上清作SDS-PAGE，并做Western印迹检测表达的蛋白质，结果表明HPVl6-E7成功地在酵母真核表达系统获得表达，表达产物的分子量分别是22KDa和88KDa，为深入开展HPVl6-E7蛋白功能和应用的研究奠定了理论基础。 相似文献
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新疆家蚕抗菌肽Cecropin-XJ与细菌DNA相互作用的光谱研究 总被引：3，自引：0，他引：3
抗菌肽的抗菌机理研究主要集中在抗菌肽与细菌细胞膜作用方面,抗菌肽是否与细菌的染色体DNA作用尚不清楚。为了探讨新疆家蚕抗菌肽Cecropin-XJ抗细菌的作用机理,利用紫外光谱及以溴化乙锭(EthidiumBromide,EB)为荧光探针的荧光光谱方法研究抗菌肽Cecropin-XJ与金黄色葡萄球菌DNA在体外的相互作用,计算获得抗菌肽与DNA的结合常数和成键位点数。结果显示,抗菌肽使DNA发生了明显的增色效应,并使DNA的荧光强度增强,抗菌肽能与EB竞争性的结合DNA,表明抗菌肽可能与DNA双螺旋的沟槽结合;在抗菌肽存在下,DNA与EB作用的结合常数和成键位点数都发生变化,表明抗菌肽以嵌入和非嵌入两种方式与DNA相互作用。文章从分子水平上初步阐述了抗菌肽与细菌DNA的作用模式和结构特征,为深入研究抗菌肽的作用机理奠定了基础。 相似文献
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