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膜蛋白质在变性剂作用下能够较充分地溶解。根据这一特点,我们试图在变性剂溶液中采用串联离子交换色谱法分离小鼠肝脏膜蛋白质。将小鼠肝脏膜蛋白质溶解于含有4 mol/L尿素,20 mmol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液(pH 9.0)中,用Q-Sepharose FF和Sephacryl S-200HR树脂组成的色谱柱结合大部分溶解的膜蛋白质,然后采用氯化钠线性梯度洗脱蛋白质,分步收集后采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进一步分离洗脱组分的蛋白质。利用胶内胰蛋白酶消化技术将SDS-PAGE胶内分离的蛋白质降解为相应的肽段,然后以反相高效液相色谱分离和离子阱质谱仪鉴定肽段。根据文献报道和蛋白质的功能分类,在所鉴定的392个蛋白质中有306个可能为膜蛋白质或膜结合蛋白质。蛋白质的疏水性计算表明,GRAVY(grand average of hydropathicity)得分大于或等于0.00的蛋白质有83个。综上所述,我们有理由认为本实验方法基本符合小鼠肝脏膜蛋白质组学研究的要求。 相似文献
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提出了纳米金在线富集-毛细管电泳法测定尿样中8-羟基-2′脱氧鸟嘌呤核苷(8-OHdG)的方法。试验选择了以下的分析条件:①运行电压-20kV;②背景电解质为pH 8.2的20mmol.L-1硼砂(含粒径10nm纳米金溶液200μL和0.1mmol.L-1 CTMAB);③检测波长254nm。试验证明背景电解质中的纳米金粒子与CTMAB形成胶束,提高了对8-OHdG的扫集能力,8-OHdG与dG在10min内可实现基线分离。8-OHdG浓度在0.50~50.0μmol.L-1范围内呈线性,检出限(3S/N)为39nmol.L-1。方法用于尿样中8-OHdG含量的测定,所得加标回收率在90.0%~104.6%之间。 相似文献
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High-power ultrafast fiber lasers operating at the 2 μm wavelength are extremely desirable for material processing, laser surgery, and nonlinear optics. Here we fabricated large-core(LC) double-cladding Tm-doped silica fiber via the sol-gel method. The sol-gel-fabricated Tm-doped silica(SGTS) fiber had a large core diameter of 30 μm with a high refractive index homogeneity(Δn=2 × 10~(-4)). With the newly developed LC SGTS fiber as the gain fiber, high-power mode-locking was realized. By using a semiconductor saturable absorber mirror(SESAM) as a mode locker, the LC SGTS fiber oscillator generated mode-locked pulses with an average output power as high as 1.0 W and a pulse duration of 23.9 ps at the wavelength of 1955.0 nm. Our research results show that the self-developed LC Tm-doped silica fiber via the sol-gel method is a promising gain fiber for generating high-power ultrafast lasers in the 2 μm spectral region. 相似文献
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SPE-LC-MS联用同时测定环境水样中痕量三聚氰胺和灭蝇胺 总被引:1,自引:0,他引:1
建立了一种同时测定环境水样中痕量三聚氰胺和灭蝇胺的固相萃取-高效液相色谱-质谱联用(SPE-LC-MS)分析方法。水样经PCX柱固相萃取,以CN柱为分析柱,V(甲醇)∶V(水)=30∶70为流动相,采用电喷雾正离子模式全扫描,三聚氰胺、灭蝇胺的定量离子分别为m/z127,m/z167,获得的最低检出限分别为0.05,0.08μg/L,对不同来源的实际水样加标回收率为85.2%~104.2%,相对标准偏差为1.5%~5.1%。应用该方法测定了湖水、河水、江水等不同基质实际水样。 相似文献
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