针对K-ras Asn12的短发夹RNA表达载体对胰腺癌细胞生长的抑制作用

我们利用RNAi技术达到了特异抑制胰腺癌突变K-rasAsn12的目的,现报道如下. 一、材料和方法 1.材料:AsPC-1和BxPC-3细胞株购自中科院上海细胞库.pSilenCircle试剂盒购自Allele公司.     

低位直肠癌保肛术后吻合口瘘的防治

目的 探讨低位直肠癌保肛术后吻合口瘘的原因及防治措施.方法 回顾性分析我院自2003年1月至2007年1月收治的203例行经腹直肠前切除术的低位直肠癌患者资料.结果 13例患者术后发生吻合口瘘,其中12例经冲洗引流、营养支持、全身应用抗生素等保守治疗方法治愈,1例行横结肠造口术治愈.结论 围手术期积极的准备预防至关重要.吻合口瘘应早期发现、及时治疗,保守治疗为首选.     

IGF—Ⅰ，IGF—IR在胃癌中的表达及其与临床病理的关系

目的研究胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF—Ⅰ）、胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGF—IR）在胃癌中的表达及其与临床病理的关系：方法对40例胃癌患者的癌组织、距原发灶5cm以上胃组织和10例正常胃组织标本进行IGF—Ⅰ,IGF—IR免疫组织化学染色将结果与患者的临床病理指标进行综合分析。结果①胃癌组织中IGF—Ⅰ的表达率显著高于切缘组织和对照组（P〈0．05）。切缘组织和对照组中表达率差异无显著性（P〉0．05）。PTNM分期中Ⅰ,Ⅱ期及Ⅲ,Ⅳ期两组比较差异有显著性（P〈0．05）;无淋巴结转移组及有淋巴结转移组相比差异有显著性（P〈0．05）;未侵及全层组及侵及全层组相比差异有显著性（P〈0．05）。②胃癌组织IGF—IR的表达率显著高于切缘组织和对照组（P〈0．05）。切缘组织和对照组中IGF—IR的表达率差异无显著性（P〉0．05）。PTNM分期中Ⅰ,Ⅱ期及Ⅲ,Ⅳ期两组相比差异有显著性（P〈0．05）。无淋巴结转移组及有淋巴结转移组相比差异有显著性（P〈0．05）。结论IGF—Ⅰ,IGF—IR的高表达与胃癌的发生有关,且均参与了胃癌的侵袭和转移。     

急诊多支冠状动脉搭桥术1例

冠状动脉造影及经皮冠脉腔内成形术是当前诊断及治疗冠心病安全有效的方法,但国外报道仍然有 2 %～7 % 的患者由于冠状动脉突然闭塞引起急性心肌缺血、心肌梗死及其它并发症,需行急诊冠状动脉搭桥术(CABG).由于急诊 CABG 对外科技术、组织协调等工作要求极高,国内只有为数不多的医院能够开展.笔者 2002 年 4 月为 1 例不稳定型心绞痛患者成功的施行急诊 4 支 CABG,疗效满意,现报道如下.     

十二指肠损伤的诊断和治疗(附10例报告)

十二指肠位置较深,受损伤机会少,因其诊断和处理相当困难,是腹部内脏损伤病死率较高的一种。Coley和何亮家两组报告病死率分别为23.5％和28.6％。因而对本症应加重视。本文就我院1983～1986年收治的10例总结报告如下。 1 临床资料性别与年龄:男性6例,女性4例;最小年龄8岁,最大年龄52岁。     

转染自体胃癌细胞总RNA的树突状细胞诱导个体化免疫治疗的体外实验

目的探讨转染自体胃癌细胞总RNA的树突状细胞(DC)体外介导抗胃癌的免疫效应。方法制备短期培养的原代胃癌细胞。用rhGM-CSF、rhIL-4和TNF-α体外诱导胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中DC的发育和成熟,并转染自体肿瘤细胞总RNA,激活自体T细胞产生CTL,用CCK-8试剂盒检测CTL的杀伤活性。应用流式细胞术及混合淋巴细胞培养技术检测DC的免疫功能状态。用ELISA法测定IL-12和INF-γ的水平。结果转染自体肿瘤细胞总RNA的成熟DC,不仅可高表达MHC-I、II类分子及CD80、CD83和CD86协同刺激分子,并可获得高效刺激自体或异体T细胞增殖的能力。转染RNA的成熟DC,分泌IL-12的水平及其刺激产生的CTL培养上清液中INF-γ的水平显著高于单纯成熟DC及未成熟DC;且CTL对自体胃癌细胞的杀伤率显著高于异体组。结论转染自体胃癌细胞总RNA的成熟DC能够体外诱导产生对自体肿瘤细胞具有高度抗原特异性杀伤活性的CTL。     

疏肝益肾方剂对子宫内膜癌Ishikawa细胞株的作用研究

目的:研究疏肝益肾方剂对体外Ishikawa细胞的作用及意义.方法:采用中药血清药理学方法制备大鼠含疏肝益.肾方剂血清(含药血清组),并体外作用Ishikawa细胞,同时设正常细胞组(阴性对照组)、大鼠阴性血清对照组(阴性血清组)、顺铂组(阳性对照组)和疏肝益.肾方剂联合顺铂组(联合用药组),MTT检测各组对Ishikawa细胞株的抑制率、RT-PCR检测各组雌激素受体α(estrogen receptor α,ERα)、雌激素受体β(estrogen:recepto βERβ)的转录水平.结果:MTT结果显示含药血清组、联合用药组与阴性对照相比均对Ishikawa细胞株有抑制作用(P＜0.05),而与阳性对照组相比无统计学差异.RT-PCR结果显示含药血清组与阴性对照相比可轻微升高Ishikawa细胞株中ER卢的转录水平,对ERα的转录水平无明显影响;联合用药组则降低ERα的转录水平(P＜0.05)、降低ERβ作用不明显;而阳性对照组降低ERα,ERβ作用均显著(P＜0.05).结论:中药疏肝益肾方剂对体外Ishikawa细胞株有抑制作用,并轻微提升ERβ的表达,但几乎不影响ERα的表达.     

MUC1和CK7在乳腺癌外周血微转移检测中的应用

目的：以MUC1和CK7为基因标志物检测乳腺癌患者外周血中播散的肿瘤细胞，探讨肿瘤基因标志物在乳腺癌微转移诊断中的意义。方法：采用RT—PCR法检测乳腺癌患者外周血中有核细胞的MUC1和CK7mRNA表达。结果：1）检测15例正常人外周血MUC1、CK7mRNA表达，结果无假阳性；将乳腺癌细胞系MCF-7分别以1：10^5、1：10^6与正常外周血有核细胞混合，检测MUC1、CK7表达，结果无假阴性。2）检测35例乳腺癌患者外周血，以MUC1为标志物，外周血中肿瘤细胞检出率为30_3％（11／35）；以CK7为标志物，外周血中肿瘤细胞检出率为35．0％（12／35）。3）35例患者中有4例MUC1、CK7均表达阳性，7例仅MUC1表达阳性，8例仅CK7表达阳性，两种肿瘤标志物表达患者有交叉但不重叠。结论：以MUC1、CK7为基因标志物，采用RT—PCR方法检测乳腺癌患者外周血中的肿瘤细胞可能在乳腺癌微转移诊断及乳腺癌预后中具有意义，多种肿瘤基因标志物联合检测结果优于单一标志物检测。     

深静脉血栓形成急性期疗效的Meta分析

目的评价手术与溶栓治疗深静脉血栓形成的急性期疗效是否存在差异。方法检索Medline、PubMed、CMCC、Ovid以及中国知网（CNKI）,检索年限均自建库到2007年3月,并追查所有纳入研究的参考文献。利用Revman 3.2统计软件对纳入相关文献的研究结果进行Meta分析。结果符合标准的文献10篇,Meta分析结果显示手术组急性期缓解率明显高于抗凝溶栓组[OR=3.62,95%CI（1.63,8.05）],肺栓塞的发生率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论手术治疗较溶栓治疗能更好地改善深静脉血栓形成的急性期临床表现,肺栓塞的发生率二者差异无统计学意义。     

结肠癌患者CME术后化疗联合DC-CIK细胞免疫治疗的临床疗效和安全性

目的:探讨结肠癌患者完整结肠系膜切除(complete mesocolic excision,CME)术后化疗联合DC-CIK细胞免疫治疗的临床疗效和安全性.方法:收集2012年6月至2013年12月河北省沧州中西医结合医院肿瘤外科的82例Ⅲ期结肠癌患者,随机分为两组,均接受CME手术.单纯化疗组(n=42)采用CapeOX方案,给予6周期化疗;DC-CIK细胞免疫治疗联合化疗组(联合治疗组,n =40)除采用CapeOX方案化疗外,同时给予负载自身肿瘤抗原的DC肿瘤疫苗和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)进行细胞免疫治疗.观察两组患者治疗前后CEA的变化、细胞免疫指标(外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD56+及CD4+ CD25+ FOXP3+ Treg细胞的百分比)、治疗期间的药物毒副作用以及比较两组2年肿瘤复发率.结果:两组患者术后2周CEA数值较术前均有明显下降(P＜0.05).两组患者治疗前、后及术后1年的CEA数值差异无统计学意义(P＞0.05).单纯化疗组术后2年的CEA数值与治疗后及与联合治疗组相比均明显升高(均P＜0.05).单纯化疗组化疗后CD8+和Treg细胞的百分比明显下降(P＜0.05),余指标变化无统计学意义.联合治疗组治疗后CD3+、CD4+、CD8+、CD19+、CD3+CD56+细胞的百分比显著提高(P＜0.05),Treg细胞的百分比明显下降(P＜0.05).联合治疗组患者的骨髓抑制、恶心呕吐、腹泻、外周神经毒性及手足综合征等药物毒副作用的发生率均明显降低(均P ＜0.05).单纯化疗组的2年肿瘤复发率为23.81％,联合治疗组为7.5％,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:DC-CIK细胞免疫治疗联合化疗可以提高结肠癌患者术后的机体免疫功能,改善生活质量,减少化疗药物的毒副作用,并明显降低肿瘤2年的复发率.