壳聚糖与Ⅰ型胶原复合制作新型人工神经支架材料及其性能研究

目的 探讨以壳聚糖复合Ⅰ型胶原蛋白结合冷冻干燥技术制备新型人工神经支架材料.方法 将壳聚糖与Ⅰ型胶原蛋白分别溶于0.05 mol/L的醋酸溶液中,利用冷冻干燥技术制备新型人工神经支架材料,并以紫外线照射的方法使其交联.经扫描电镜观察内部结构的排列规律及走行,比较其与周围神经的异同,测量其孔径大小、计算孔隙率等指标.观察在0.01 mol/L磷酸盐缓冲液中30 d体外降解率.并对材料进行力学及细胞毒性实验.结果 构建的材料为均匀圆柱状,内部为孔径均匀且平行排列的微观结构,其微孔直径为60-130μm,孔隙率为83.30%,体外降解率为16.95%,具有较好的力学性能与周阡司组织无毒性反应.结论 使用壳聚糖复合Ⅰ型胶原蛋白结合冷冻干燥技术,制备出具有良好三维空间构型的新型人工神经支架材料,其牛物相容性良好,具有应用潜力.     

810nm弱激光对M1型骨髓源性巨噬细胞的作用及其机制

目的 :体外建立M1型骨髓源性巨噬细胞(bone marrow derived macrophage,BMDM)-弱激光照射模型,探讨弱激光照射对M1型BMDM炎症因子分泌的影响及其可能机制。方法:体外分离BALB/c小鼠BMDM,应用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)条件性培养基培养,流式细胞术检测巨噬细胞标志物F4/80的表达,确定所获得细胞为纯度较高的BMDM。应用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激24h诱导原代BMDM向M1型BMDM方向极化。将细胞随机分为弱激光治疗(low level laser therapy,LLLT)组和对照组,LLLT组采用810nm波长激光照射,光斑面积4.5cm2,照射功率密度2m W/cm2,照射持续440s,最终获得照射能量为4J,对照组置于暗箱,不进行照射。应用CCK8实验测定细胞活性,RT-PCR检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interlukin-1β,IL-1β)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthases,i NOS)的m RNA表达情况,ELISA检测TNF-α及IL-1β蛋白分泌,Western blot测定i NOS和M1型巨噬细胞极化的重要转录因子核因子-κB p65(nuclear factor-kappa B,NF-κB p65)的表达。组间比较采用独立样本t检验,P0.05为差异有统计学意义。结果:LPS刺激后,使用弱激光照射的M1型BMDM细胞活性显著提高,升高至对照组的2.313±0.630倍(P0.05)。LLLT组IL-1βm RNA表达为0.586±0.145,对照组为1.000±0.022,两组比较有统计学差异(P0.05);LLLT组TNF-α的m RNA表达为0.862±0.152,对照组为1.000±0.082,两组比较无统计学差异(P=0.082);LLLT组i NOS的m RNA表达为0.720±0.039,对照组为1.000±0.024,两组比较有统计学差异(P0.05)。对照组TNF-α为270.478±26.831pg/ml,LLLT组为209.365±5.600pg/ml,两组比较有统计学差异(P0.05);对照组的IL-1β为98.941±12.430pg/ml,LLLT组为77.076±2.023pg/ml,两组比较有统计学差异(P0.05)。对照组的i NOS蛋白表达为1.005±0.075,LLLT组为0.210±0.010,两组比较有统计学差异(P0.05);对照组NF-κB p65蛋白表达为1.006±0.260,LLLT组为0.428±0.169,两组比较有统计学差异(P0.05)。结论:810nm LLLT M1型BMDM可抑制其炎性因子IL-1β及i NOS的m RNA表达,下调炎性因子IL-1β及TNF-α的分泌,降低M1型BMDM表面标志物i NOS的表达,同时显著下调M1型巨噬细胞经典极化转录因子NF-κB p65的表达。810nm LLLT可调控M1型巨噬细胞的极化状态,抑制其炎性因子分泌,该调控作用和其下调M1型巨噬细胞经典极化转录因子NF-κB p65有明显相关性。     

顶椎区多棒矫形联合远端脊柱后柱截骨治疗重度特发性脊柱侧凸的疗效分析

目的 探讨顶椎区多棒矫形联合远端脊柱后柱截骨术（posterior column osteotomy,PCO）治疗重度特发性脊柱侧凸的临床疗效及安全性。方法 回顾性分析我院2014年2月至2020年2月行后路手术、随访时间超过2年的重度特发性脊柱侧凸（Cobb角≥90°）病人共48例,所有病人均行远端PCO截骨,依据矫形情况分为顶椎区多棒矫形组（21例）和传统双棒矫形组（27例）,在术前、术后和末次随访时进行影像学和脊柱侧凸研究学会-22简明量表调查问卷（Scoliosis Research Society questionnaires-22,SRS-22）评估,比较两组的影像学参数、手术时间、出血量和并发症等,分析其疗效和安全性。结果 双棒矫形组随访（37.2±8.8）个月,多棒矫形组随访（31.6±7.6）个月。传统双棒矫形组手术时间为（430.8±79.1） min,长于多棒矫形组的（331.2±97.3） min,差异有统计学意义（P=0.037）。两组病人术后冠状面和矢状面参数均较术前显著改善,差异有统计学意义（P＜0.05）。末次随访时,多棒矫形组的矢状面矫形丢失显著高于双棒矫形组（3.7°±0.9° vs. 2.3°±1.0°）,椎弓根螺钉拔出发生率显著低于双棒矫形组（4.8% vs. 29.6%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 与传统双棒比较,顶椎区多棒矫形技术联合远端PCO截骨具有相似的矫形效果,手术流程更简便,术中螺钉拔出率低,对于重度特发性脊柱侧凸,是一种安全有效的手术方法,但矢状面矫形丢失需要长期随访关注。     

神经根沉降征在腰椎管狭窄症诊治中的作用

神经根沉降征是近年来发现的一种腰椎MRI影像表现。自Barz提出了神经根沉降征在腰椎管狭窄病人与非狭窄病人中阳性率存在差异以来,学者们对于其在腰椎管狭窄症诊断中的敏感度、特异度,以及对病人临床预后判断中的作用进行了大量研究。研究发现,神经根沉降征对于症状明显的重度腰椎管狭窄症的诊断意义大于症状不明显的轻中度腰椎管狭窄症,而且对于不同治疗方案效果的预测也有重要价值,现将神经根沉降征的相关研究进展作一综述。     

后路L4/5单节段融合术后椎间高度指数恢复情况对影像学邻近节段退变的影响

【摘要】 目的：探讨后路L4/5单节段融合术后椎间高度指数恢复情况对影像学邻近节段退变（radiographic adjacent segment degeneration,rASD）的影响。方法：收集我院自2008 年3月~2014年3月行L4/5节段经椎间孔腰椎体间融合（transforaminal lumbar interbody fusion,TLIF）手术病例354例,依据纳入和排除标准,共58例入组,将其按年龄分为青年组（20～40岁,16例,A组）和中年组（41~60岁,42例,B组）。记录术前及末次随访时的视觉模拟评分（visual analogue scale,VAS）、Oswestry功能障碍指数（Oswestry disability index,ODI）、腰椎日本骨科学会（Japanese Orthopaedic Association,JOA）评分评估临床疗效。测量术前、术后及末次随访时的L4/5椎间高度指数（intervertebral height index,IHI）、脊柱-骨盆参数[腰椎前凸角（lumbar lordosis,LL）、骨盆入射角（pelvic incidence,PI）、骶骨倾斜角（sacral slope,SS）和骨盆倾斜角（pelvic tilt,PT）],分析rASD的发生率及其危险因素,并行Logistic回归分析。根据术中是否将IHI恢复至正常值范围,进一步将病例分为IHI恢复组（青年组与中年组分别为A1、B1组）和未恢复组（青年组与中年组分别为A2、B2组）,比较各组rASD的发生情况。结果：术后平均随访59.36个月,两组患者术后临床疗效指标（VAS、ODI及JOA）均显著改善（P＜0.01）。末次随访时发生rASD者23例（39.7%）。A1组无rASD发生（0/6）,A2组共发生rASD发生1例（1/10,10%）;B1组发生5例（5/16,31.25%）,B2组发生17例（17/26,65.4%）,两组间发生率具有统计学差异（P=0.031）。rASD发生的危险因素为年龄、随访时间、术后L4/5的IHI及术后LL,Logistic回归分析发现术后L4/5的IHI是显著的危险因素（OR=17.1,P＜0.001）。结论：后路L4/5单节段融合术后,对于41~60岁的患者,术中将IHI恢复至正常值参考范围,可以减少rASD的发生。     

加速康复外科在腰椎融合手术中的应用研究

目的 研究加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)在脊柱外科腰椎融合手术中的应用效果.方法 对2015年1~8月于我科行腰椎融合手术且融合节段≤3个的236例病人进行前瞻性研究,根据病人意愿分为对照组(117例)及加速康复组(ERAS组,119例),分别对两组病人围手术期采取常规干预和ERAS干预.对比分析两组病人手术前后不同时间点的疼痛视觉模拟量表(visual ana-logue scale,VAS)评分、Oswestry功能障碍指数(Oswestry disfunction index,ODI)评分,以及阿片类药物使用情况、术后并发症、术后住院时间、术后1个月内再次住院率、病人治疗满意度等情况.结果 ERAS组在术后3 d内、出院时及术后1个月VAS评分均优于对照组(P<0.05),术后恶心呕吐的发生率显著小于对照组(P<0.05),阿片类药物在术后第1天和第2天使用量小于对照组(P<0.05),术后平均住院时间(4.9 d)与对照组(6.2 d)比较,差异有统计学意义(P<0.05).两组病例在术后1个月内再次住院率比较,差异无统计学意义(P=0.339).病人平均随访时间为(13.4±0.9)个月.两组末次随访的VAS评分(P=0.368)和ODI评分(P=0.251)比较,差异均无统计学意义.结论 实施ERAS可以在不影响腰椎融合手术病人再次住院率的情况下,缩短了病人术后住院时间、改善了病人术后疼痛、降低了术后并发症发生率及减少了阿片类药物的使用,值得在脊柱外科临床推广.     

脊髓爆震伤后神经细胞的形态学变化及凋亡细胞的时空分布特点

目的:研究脊髓爆震伤后神经细胞的形态学变化及凋亡细胞的时空分布特点.方法:90只家兔随机分为正常组(A组,n=6)、Allen's撞击组(B组,n=42)和爆震损伤组(C组,n=42).用改良Allen's法造成B组不完全性急性脊髓损伤模型;而用0.7g单质金属炸药黑索金(cyclotrimethylene trinitramine)在垂直距离动物T9～T10节段4cm处引爆造成C组脊髓爆震伤模型,5h后B、C组动物均用诱发电位仪刺激下肢的MEP以筛选造模成功的动物.B、C两组分别于损伤后8h、1d、3d、7d、14d和30d取材(损伤段脊髓2cm).每组每个时间点取材7只,而A组动物不作任何处理,统一于30d取材.通过HE染色、透射电镜检测、DNA电泳分析和凋亡细胞原位末端标记法(TUNEL),观察各组脊髓中神经细胞的形态学变化及凋亡细胞的时空分布.结果:HE染色显示,A组为正常组织学表现;B组损伤后8h即出现大片的出血坏死灶,白质呈严重的脱髓鞘样改变,1、3d时前角运动神经元大量减少,7d时白质中空洞形成,而且空洞逐渐融合.到14、30d时,可见部分巨大空洞:而C组爆震后8h仅出现散在的小型出血点,但病变进展迅速,1d时前角运动神经元即明显减少并伴有大量微型空洞形成,3、7d时整个白质结构松散,可见液化坏死灶及广泛的脱髓鞘样改变,而且透射电镜证实这种髓鞘损伤还具有方向性特征,到14、30d时,脊髓可见巨大空洞及散在的小空洞,但面积明显小于B组.B组的前角运动神经元数目在8h时的降低幅度比C组要大(P＜0.05),而到损伤7d后.两组却无明显差异.DNA电泳显示B、C两组损伤后3d均出现明显的DNA梯形条带和Smearing现象,而且这种现象逐渐向邻近节段扩散.TUNEL检测显示,B、C两组于损伤后的灰质和白质中均能检测到阳性细胞,而且分布于灰质内的阳性细胞数均于1d时达到高峰(P＜0.001),但是在白质内的阳性细胞数量,B组于3d时达到高峰(P＜0.001),C组却于7d时才达到高峰(P＜0.001).结论:与脊髓Allen's撞击模型相比,脊髓爆震伤后同样存在神经细胞的凋亡现象,而且有其时间和空间分布特点.     

L4/5单节段融合对不同腰椎Roussouly分型腰椎骨盆矢状位参数和临床疗效的影响

目的 :探讨腰椎单节段(L4/5)融合对不同腰椎Roussouly分型腰椎骨盆矢状位参数和临床疗效的影响。方法:回顾我院2008年3月~2012年3月行L4/5节段融合的患者317例,共纳入具有健康相邻节段、随访≥3年、资料齐全者51例。男25例,女26例,平均年龄43.45岁。依据腰椎前凸顶点位置将腰椎矢状位曲线分为四型(Roussouly分型):Ⅰ型,顶点位于L5椎体或者L4/5椎间隙;Ⅱ型,顶点位于L4底部或者中部;Ⅲ型,顶点位于L4上部或者L3/4椎间隙;Ⅳ型,顶点位于L3椎体及其以上。术前、术后和末次随访时行视觉模拟评分(VAS)、Oswestry功能障碍指数(ODI)、JOA评分,测量腰椎前凸角(LL)、上半圆(UP arc)、L4/5椎间前凸角(IVA4-5)、骨盆入射角(PI)、骨盆倾斜角(PT)、骶骨倾斜角(SS)、C7垂线骶骨距离/股骨头骶骨距离比值(C7PL/SFD ratio),术前相邻节段评估应用MRI Modified Pfirrmann Scale(Modic)量表分析,随访应用UCLA量表结合脊柱退变稳定性标准评估影像学相邻节段退变(r ASD)情况。结果:本组腰椎Roussouly分型的分布如下:Ⅰ型10例(19.61%),Ⅱ型15例(29.42%),Ⅲ型20例(39.22%),Ⅳ型6例(11.76%)。平均随访42.58个月(36~67个月)。Ⅰ型:术后和末次随访时的LL、UP arc、和SS较术前显著提高,PT减小,具有统计学差异(P0.01)。Ⅱ和Ⅲ型:LL末次随访时较术前显著提高(P0.05),而SS、PT、PI无显著性变化,Ⅱ型末次随访时UP arc较术前和术后显著提高。Ⅳ型:LL、UP arc、SS、PT和PI手术前和术后对比无显著性差异。各型术后及随访时的IVA4-5较术前提高,而C7PL/SFD比值减小,各型术后及末次随访时的VAS、ODI和JOA评分与术前相比显著改善。本组病例中r ASD发病率为17.64%,r ASD相关危险因素分析发现:年龄、随访时间、IVA4-5、PI是显著危险因素。结论:单节段融合可显著增加节段前凸角,但在不同腰椎Roussouly分型中对脊柱-骨盆参数的影响有所不同。节段椎间角度是ASD的显著危险因素,年龄越大,随访时间越长,PI值较高时较容易发生r ASD。