α稳态的理论和临床

酸碱平衡的α稳态理论是在７０年代提出的，已被一些中心用以指导低温体外循环中酸碱平衡的调节。本文就α稳态理论及其在心脏外科中应用的现状和争论做一综述。     

逆行灌注心脏不停跳心肌保护的实验研究

目的：探讨逆行灌注心脏不停跳心肌保护的效果。方法：中国大白兔32只随机分为4组，每组8只，A组（对照组），B组（心脏不停跳组，血温34℃），C组（温血心脏麻痹液组，血温34℃），D组（冷血心脏麻痹液组，血温4℃）。采用离体兔心左室做功模型，经冠状静脉窦逆行灌注稀释血液或血停搏液60min。比较观察心功能、冠脉排出液心肌酶谱、心肌组织乳酸、心肌细胞内游离钙浓度、心肌细胞膜ATP酶活性、心肌细胞膜脂质过氧化产物丙二醛含量的变化。结果：B组心功能恢复、心肌细胞膜ATP酶活性显著优于C组和D组，C组优于D组；B组心肌酶漏出、乳酸生成量、心肌细胞内游离钙浓度、心肌细胞膜丙二醛（MDA）含量低于C组和D组，C组低于D组。结论：常温氧合血逆灌心脏不停跳良好的心肌保护效果与其减轻自由基损伤，较好地保持细胞内外Ca^2 平衡，减轻细胞内钙超载，保护细胞膜酶功能有关。     

Anti-inflammatory effect of erythropoietin pretreatment on cardiomyocytes with hypoxia/reoxygenation injury and the possible mechanism

Objective： To investigate the anti-inflammatory effect of erythropoietin （EPO） pretreatment on cardiomyocytes exposed to hypoxialreoxygenation injury （H/R） and explore the possible mechanism.
Methods： The cultured neonatal rats＇ ventricular cardiomyocytes were divided randomly into 4 groups, control group （C group）, EPO pretreatment group （E group）, EPO and pyrrolidine dithiocarbamate （PDTC） pretreatment group （EP group） and PDTC pretreatment group （P group）. After 24 hours＇ pretreatment, the cardiomyocytes were exposed to H/R. After pretreatment and H/R, the expression of tumor necrosis factor- α （TNF- α ） gene in all the groups was detected by RT-PCR and Western blot. The nuclear factor- κ B （NF- κB） activity was detected by electrophoretic mobility shift assay （EMSA） and the inhibitor- κB α （Ⅰ- κB α） protein level was detected by Western blot.
Results： The decrement of Ⅰ- κB a protein and the increasing NF- KB activity were found in cardiomyocytes pretreated with EPO before H/R compared to other groups （t=3.321, 4.183, P〈0.01）. However, after H/R, NF- κB activity and expression of TNF- α gene were significantly reduced, Ⅰ- κB a protein expression was increased in cardiomyocytes of E group compared to other groups （t=-3.425, 3.687, 3.454, P〈0.01）. All theses changes caused by EPO pretreatment were eliminated by the intervention of PDTC （an antagonist to NF- κB） during pretreatment.
Conclusions： EPO pretreatment can inhibit the activation of NF- κB and upregulation of TNF- α gene in cardiomyocytes exposed to H/R through a negative feedback of NF- κB signaling pathway, and thus produces the anti-inflammatory effect. This might be one of the ways EPO produces the anti-inflammatory effect.     

先天性心脏病心脏停跳和不停跳下心内直视手术的临床分析

目的　对比分析心脏停跳和不停跳心内直视手术治疗先天性心脏病心内畸形的疗效。方法　5 5 8例患者分别采用心脏停跳手术 2 31例 ,不停跳手术 32 7例。心脏不停跳心内直视手术仍常规建立体外循环 ,置左心房引流管 ,降温至 (32± 1)℃并维持 ,仅阻断上下腔静脉 ,不阻断主动脉 ,维持灌注压在 8kPa左右 ,心脏跳动下进行畸形矫正 ,方法同停跳下手术。结果　不停跳组早期死亡 7例 (死亡率 2 .14 % ) ,停跳组早期死亡 5例 (死亡率 2 .17% ) ,其余均痊愈出院 ,随访 3～ 2 3月 ,恢复良好。结论　心脏不停跳心内直视手术 ,是一种有效的心肌保护方法 ,并可简化操作 ,缩短体外循环时间     

右前外胸部小切口行心脏不停跳心内直视手术

目的 介绍２７例右前外胸部小切口心脏不停跳体外循环心内直视手术的体会。方法：采用右前外胸部小切口２７例中,男１６例,女１１例,年龄１．８－４２岁,皮肤切口全长,儿童为８－１０ｃｍ,成人１０－１５ｃｍ,第四肋间入胸,在全麻浅低温心脏不停跳体外循环下进行,其中房缺３例,原发孔房缺（Ｐ－ＡＳＤ）１例,室缺（ＶＳＤ）１６例,室缺伴右室流出道狭窄（ＶＳＤ＋ＲＶＯＴ）１例,二尖瓣置换２例,主动脉瓣置换术３例。     

乌司他丁在不停跳心脏直视手术体外循环期间对心肌酶谱的影响

目的 初步探讨乌司他丁在不停跳心内直视手术中对心肌的保护作用。方法 选择60例先天性房间隔缺损或室间隔缺损患者,随机分为对照组（C组）与乌司他丁组（U组）,每组各30例。手术均在浅低温体外循环心脏跳动下完成。U组按乌司他丁1万U／kg使用,于麻醉后体外循环前加入1／2干预充液中,余1／2在开放上下腔静脉后加入氧和器中,C组不接受乌司他丁。检测术前、及术后24h心肌酶谱AST、LDH、CK,HDBH的变化以及术后24h心包引流量。结果 乌司他丁组术后24hAST、LDH、CK、HDBH的活性与对照组相比有明显差异,使用乌司他丁组的活性要低于对照组的心肌酶谱活性,同时乌司他丁组的患者术后心包引流量要明显低于对照组。结论 乌司他丁在不停跳心脏手术体外循环期间可抑制AST、LDH、CK的活性,从而减轻CPB期间心肌缺血／再灌注损伤,起到良好的心肌保护作用。     

原代心房肌细胞培养及快速起搏细胞模型的建立

目的:利用原代培养的心房肌细胞建立快速起搏模型,对心房颤动(房颤)早期的重构现象进行初步研究。方法:原代培养大鼠心房肌细胞,并建立快速电场刺激起搏细胞模型,利用全细胞膜片钳技术记录刺激前后心房肌细胞的动作电位周期,透射电镜观察细胞超微结构的变化。结果:培养至第4天,细胞生长密度可以达到瓶底70%左右,数目可达(2~3)×109/L,经免疫细胞化学鉴定,90%以上培养细胞α-肌动蛋白抗体染色阳性;全细胞膜片钳记录了培养心房肌细胞及经电场刺激(600次/min,1·5V/cm)24h后的心房肌细胞的动作电位周期,动作电位周期分别为(64·2±4·6)ms和(56·6±4·1)ms,刺激前后差异有统计学意义(P<0·05)。透射电镜观察到刺激后心房肌细胞超微结构发生去分化改变。结论:经快速起搏24h后,心房肌细胞发生了电及结构重构;利用原代培养的心房肌细胞建立快速起搏的房颤模型,可以对房颤早期的重构机制进行研究。     

缺氧／复氧诱导培养人肥大心肌细胞凋亡模型的建立

目的　建立缺氧 /复氧诱导体外培养的人肥大心肌细胞模型并观察凋亡情况。方法　用 0 .2 %胰蛋白酶 (trypsin)和0 .1 %胶原酶 (collagenase)进行消化 ,用差速粘附贴壁法、Brdu加入和人为破坏成纤维细胞法纯化心肌细胞 ,用IMDM (Iscove′s改良的Dulbecco′smedium )培养基培养 ,4～ 6d后将体外培养的人肥大心肌细胞置于 92 %氮气及 5 %二氧化碳孵箱中 ,6、1 2、2 4、4 8h缺氧后再恢复正常条件培养 4h ,造成缺氧 /复氧损伤所致细胞凋亡模型 ,分别用倒置显微镜、电镜、TUNEL法技术检测凋亡发生的情况。结果　心肌细胞经历缺氧 /复氧损伤后 ,倒置显微镜、电镜、TUNEL染色均观察到凋亡阳性细胞。TUNEL法定量检测 ,心肌细胞缺氧培养 6、1 2、2 4、4 8h后复氧 4h ,其凋亡率分别为 :(4 .5± 1 .5 ) %、(1 0 .1± 2 .0 ) %、(1 7.3± 2 .3) %和 (1 8.4± 1 .9) %。结论　缺氧 /复氧一定时间可以诱导体外培养的人肥大心肌细胞凋亡 ,心肌细胞凋亡率随着缺氧时间的延长而增高     

eNOS在 EPO调节慢性缺氧心肌细胞线粒体生物合成中的作用机制研究

目的：探讨内皮型一氧化氮合酶（eNOS）在促红细胞生成素（EPO）调节慢性缺氧环境中心肌细胞线粒体生物合成中的作用及其机制。方法采用H9c2心肌细胞,将其于缺氧环境下培养7 d （94％ N2,5％ O2）,建立心肌细胞慢性缺氧模型。将心肌细胞根据不同处理分为缺氧对照组（HC）,20 U／mL重组人 EPO（rhEPO）处理缺氧组（HE）和20 U／mL rhEPO＋ eNOS shRNA干扰处理缺氧组（HR）。以荧光探针检测线粒体数量变化;RT‐PCR检测线粒体DNA相对表达量;Western blot 检测eNOS总蛋白表达及磷酸化水平（p‐eNOS）变化。结果 rhEPO显著增强eNOS磷酸化水平,增加线粒体数量及其DNA相对拷贝数（P＜0．05）;而同时采用shRNA干扰eNOS后,HR组eNOS总蛋白表达及磷酸化水平较HE组降低（P＜0．05）,同时线粒体数量及其DNA相对拷贝数较 HE组减少（P＜0．05）。结论 eNOS的磷酸化激活是EPO增强慢性缺氧心肌细胞线粒体生物合成的重要信号转导机制。