β-arrestin-2通过上调PI3K/Akt信号抑制自噬以减轻小鼠肝脏缺血-再灌注损伤

目的  验证β-arrestin-2是否通过上调PI3K/Akt信号抑制自噬对小鼠肝脏缺血-再灌注损伤（IRI）发挥保护作用。方法  将C57BL/6背景的β-arrestin-2基因敲除（KO）及野生型（WT）小鼠各12只,随机分为KO小鼠假手术组（KO+sham组）,KO小鼠IRI组（KO+IRI组）,WT小鼠假手术组（WT+sham组）和WT小鼠IRI组（WT+IRI组）,每组各6只。分别建立70%肝脏IRI模型或进行假手术处理,于肝脏再灌注或手术后6 h进行相关研究。采用免疫组织化学（免疫组化）染色检测凋亡信号蛋白裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（cleaved Caspase-3）、增殖信号蛋白Ki-67及PI3K/Akt通路信号蛋白p-Akt的表达。结果  免疫组化染色结果显示,与相应的sham组比较,KO+IRI组和WT+IRI组小鼠肝组织中的cleaved Caspase-3、Ki-67和p-Akt阳性细胞计数均增加（均为P < 0.01）;与WT+IRI组比较,KO+IRI组小鼠肝组织中cleaved Caspase-3阳性细胞计数增加,Ki-67和p-Akt阳性细胞计数均减少（均为P < 0.05）。结论  β-arrestin-2可减轻小鼠IRI后肝细胞凋亡、促进其损伤修复,其通过上调PI3K/Akt信号抑制自噬来减轻小鼠肝脏IRI。     

肝移植术中脾肾分流的个体化处理

目的  评估肝移植术中个体化处理脾肾分流的安全性和有效性。方法  回顾性分析2例行原位肝移植并术中处理脾肾分离的受者临床资料,根据脾肾分流和供肝复流后灌注情况,2例受者术中分别行左肾静脉结扎术和脾肾分流血管结扎术。观察受者的术后一般情况,包括手术相关并发症、门静脉血流峰值速度、肝功能和肾功能指标。通过腹部超声监测受者术后情况。结果  2例受者术中及术后均未出现手术相关并发症。病例1和病例2脾肾分流前后门静脉血流峰值速度的变化分别为22.9~35.1 cm/s、24.3~58.8 cm/s。2例受者术后丙氨酸转氨酶（ALT）未出现延迟恢复。病例1受者术后出现一过性血清肌酐（Scr）升高,于术后13 d恢复正常。术后随访过程中,超声检查显示门静脉血流方向和速度正常,肝脏灌注良好。结论  肝移植术中对合并严重脾肾分流的受者选择性结扎其左肾静脉或脾肾分流血管是安全和有效的。     

Zwint高表达对肝癌细胞增殖和肝癌肝移植预后的影响

目的  探讨Zw10结合因子（Zwint）在原发性肝癌（肝癌）中的表达情况及其对肝癌肝移植预后的影响。方法  收集50例肝癌肝移植受体的肝癌组织、癌旁组织及临床资料。采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）、蛋白免疫印迹（Western Blot）法和免疫组织化学（免疫组化）法,分别比较20例肝癌肝移植受体的20对肝癌组织及癌旁组织中Zwint信使核糖核酸（mRNA）表达情况和Zwint蛋白的表达水平;选取两个成功干扰Zwint表达的肝癌细胞系HepG-2（si-Zwint-1组和si-Zwint-2组）,以空白对照作为si-NC组,采用细胞计数试剂盒（CCK）-8实验、平板克隆实验和细胞周期实验,比较各组细胞的增殖能力和细胞周期;采用Western Blot法和免疫组化法,分析肝癌组织和肝癌细胞中Zwint与细胞周期蛋白D1（cyclin D1）表达的一致性;以Zwint蛋白表达水平的中位数为分割点,将入组病例分高表达组（22例）和低表达组（28例）,分析Zwint蛋白表达水平与肝癌肝移植受体临床特征、总体存活率及无复发存活率的关系。结果  实时荧光定量PCR结果提示肝癌组织中Zwint mRNA表达水平高于癌旁组织（P=0.03）。Western Blot及免疫组化结果均提示肝癌组织中Zwint蛋白的表达水平高于癌旁组织（均为P < 0.05）。干扰肝癌细胞系HepG-2的Zwint基因后,CCK-8及平板克隆实验显示细胞增殖能力明显减弱（均为P < 0.01）,细胞周期阻滞于G₁期（均为P < 0.05）。Zwint蛋白表达水平与肿瘤直径和肿瘤、淋巴、转移（TNM）分期密切相关（均为P < 0.05）。Zwint高表达组肝癌肝移植受体的总体存活率低于低表达组（P=0.02）。结论  Zwint高表达于肝癌组织,其通过调节细胞周期促进肝癌细胞增殖,且Zwint表达水平与肝癌肝移植后预后呈负相关。