人KiSS-1和p27^Kip1基因在骨肉瘤MG63细胞株中的共表达

目的克隆肿瘤转移抑制基因KiSS-1和细胞周期依赖性激酶抑制剂基因p27^Kip1的表达序列,应用内部核糖体插入位点（IRES）序列构建共表达载体pIRES-KiSS-1-p27^Kip1,测序鉴定,并获得稳定表达目的蛋白的细胞株。方法利用RT-PCR从人正常胎盘组织中获得KiSS-1和p27^Kip1基因开放阅读框的cDNA序列,将两目的基因的eDNA序列重组至pIRES载体,构建共表达载体pIRES-KiSS-1-p27^Kip1,应用脂质体转染骨肉瘤MG63细胞,并通过RT-PCR和Westernblot检测目的蛋白的表达情况。结果经PCR、酶切鉴定和基因序列测定,证实重组人pIRES载体上的两个片段均为目的基因开放阅读框的核苷酸序列,KiSS-1和p27^Kip1蛋白在转染后的细胞中有表达。结论成功构建共表达载体pIRES-KiSS-1-p27^Kip1,获得稳定表达KiSS-1和p27^Kip1蛋白的细胞株,为进一步观察目的基因对骨肉瘤细胞体内外效应奠定基础。     

超声裂解在人工关节置换术后假体周围感染诊断中的作用

 目的 探讨超声裂解在人工关节置换术后假体周围感染诊断中的作用。方法 2012年1至12月对关节置换术后感染或无菌性松动的35例患者行翻修术,全髋关节27例、全膝关节8例。术前行关节腔穿刺,术中采集5个不同部位的假体周围组织标本,取出可疑感染的关节假体并应用超声裂解法处理,将处理液、术前关节液、术中假体周围组织分别进行血平板和BacT/Alert FN瓶培养。结果 各种标本的血平板培养细菌阳性率均低于BacT/Alert培养法,两种培养方法间的差异有统计学意义。超声裂解后BacT/Alert培养法细菌培养阳性率由处理前的37.1%（13/35）上升至57.1%（20/35）,血平板培养法由14.3%（5/35）上升至37.1%（13/35）,超声裂解前后细菌阳性率的差异有统计学意义。超声裂解后处理液细菌阳性率高于术前关节液、术中假体周围组织及超声裂解前处理液。确诊为假体周围感染的23例中细菌培养结果为金黄色葡萄球菌7例,表皮葡萄球菌11例,肺炎克雷伯杆菌、粪肠球菌、阴沟肠杆菌各1例;假体松动的12例中,表皮葡萄球菌、大肠杆菌、阴沟肠杆菌各1例。结论 对可疑关节感染的假体行超声裂解处理可以提高关节感染病原学检出率,应用BacT/Alert培养法较血平板培养细菌检出率高,引起假体周围感染的细菌以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌为主。     

含抗生素关节型骨水泥间隔器治疗人工关节感染的问题分析

目的探讨采用含抗生素关节型骨水泥间隔器二期翻修治疗人工关节假体周围感染(periprosthetic joint infection,PJI)存在的问题及解决方法。方法回顾分析2001年1月-2013年1月采用含抗生素关节型骨水泥间隔器行二期翻修的27例PJI患者临床资料。男12例,女15例。年龄25~81岁,平均62.7岁。均为单侧关节置换,髋关节19例,膝关节8例。初次置换至确诊感染时间为3~252个月,平均25个月。使用间隔器联合全身抗生素治疗,至感染控制后行二期翻修手术,评价患者临床疗效及间隔器有效性和相关并发症。结果 1例患者一期术后2 d因大面积心肌梗死死亡。19例患者一期术后感染控制,顺利行二期翻修手术;其中3例发生髋关节间隔器断裂后卧床,卧床期间1例发生深静脉血栓形成并保守治愈。7例患者一期术后感染复发,再次手术取出间隔器后旷置并更换敏感抗生素,其中3例感染未能控制,放弃治疗,余4例感染控制后行翻修手术。23例行二期翻修手术的患者术后均获随访,随访时间1~5年,平均2.3年。翻修术后1年髋关节患者Harris评分及膝关节患者膝关节学会评分系统(KSS)均显著优于术前,比较差异有统计学意义(P0.05)。8例致病菌含革兰阴性菌或真菌患者,7例一期术后感染复发;12例致病菌仅为革兰阳性菌患者均无感染复发。3例最终治疗失败放弃治疗者,1例为革兰阳性菌和革兰阴性菌混合感染,2例为真菌感染。结论在PJI二期翻修术中使用含抗生素关节型骨水泥间隔器可获良好临床疗效。但需注意髋关节间隔器可能发生断裂并增加翻修手术风险;若致病菌为革兰阴性菌或真菌,间隔器可能增加感染复发风险。     

假体周围感染翻修术前预防性应用抗生素对术中标本培养阳性率的影响研究北大核心CSCD

目的探讨假体周围感染(PJI)翻修术前预防性使用一剂敏感抗生素是否影响术中标本的培养阳性率。方法此前瞻性研究招募2017年7月1日至2019年2月1日福建医科大学附属第一医院骨科因PJI需行翻修手术的患者。所有患者术前停用抗生素2周后通过抽取关节液,经培养已明确病源菌及药敏结果,且术中取出部分/全部假体。按照入院顺序编号,使用随机数字表法将患者分为两组(A组和B组):A组在翻修手术切皮前30~60 min使用一剂敏感抗生素后再取标本,B组在所有标本取材后使用一剂敏感抗生素。术中取关节液、组织、组织研磨液(TGF)及超声假体裂解液(UPL)进行需氧及厌氧培养。根据术中至少有1项标本微生物培养阳性标准,分析及比较两组术前及术中培养结果。结果本研究共纳入32例术前关节液培养阳性的PJI患者,其中A组16例,B组16例。最常见的感染细菌为葡萄球菌(59.3%,19/32)。两组患者年龄、性别、手术方式、Tsukayama分型、假体移除及术前红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、关节滑液白细胞计数(SF-WBC)、关节滑液中性粒细胞(PMN)百分比差异均无统计学意义(P>0.05)。A组术中关节液、组织、TGF及UPL培养阳性率分别为81.3%(13/16)、62.5%(10/16)、93.8%(15/16)和93.8%(15/16),B组术中关节液、组织、TGF及UPL培养阳性率分别为87.5%(14/16)、68.8%(11/16)、93.8%(15/16)和100.0%(16/16),以上项目两组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。TGF与UPL培养阳性率在两组中比较差异均无统计学意义(P>0.05),但均明显高于各自组内组织培养阳性率,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论①PJI翻修术前预防性使用抗生素不会影响术中标本培养阳性率,在PJI感染翻修手术前无需推迟使用预防性抗生素;②TGF培养阳性率与UPL培养阳性率无显著差异,但明显高于传统组织培养阳性率,对于无法进行超声裂解的机构可通过组织研磨的方法提高培养阳性率。     

影响骨肉瘤预后因素的研究进展

骨肉瘤好发于青少年,恶性度高,进展迅速,常早期发生血行或淋巴转移,预后差。随着新辅助化疗等的应用,患者5年生存率有所提高,已从上个世纪70年代的10％-15％提高到目前的50％～70％,但骨肉瘤患者的预后仍较差,约30％的患者在确诊1年内出现肺转移。近年许多学者着重研究与骨肉瘤预后相关的分子途径,如：P糖蛋白的表达与骨肉瘤化疗耐药相关,生存素的表达与预后差相关等。     

超声引导技术在假体周围穿刺中的应用价值研究

目的探讨超声引导下穿刺在假体周围抽取关节液的应用价值。方法将需行髋关节假体周围穿刺的病例随机分为A组和B组,A组为传统的C臂透视引导下穿刺,B组为超声引导下穿刺;同时将需行人工膝关节假体周围穿刺的病例随机分为C组和D组,C组为盲穿法,D组为超声引导下穿刺。每个病例记录是否取得关节液,获取关节液量,穿刺次数,关节液是否混有血液。结果在人工髋关节周围穿刺,A组8例患者中有3例穿刺获取关节液,成功率为37.5%,B组10例患者中9例穿刺获取关节液,成功率为90.0%;A组平均穿刺(4.8±1.2)次,B组平均穿刺(6.1±1.2)次,两组对比有显著性差异(P0.01);B组抽的关节液量(6.1±1.2)mL也较A组(2.4±0.4)mL多,两组对比有显著性差异(P0.05)。膝关节组C组13例患者中有8例穿刺获取关节液,成功率为61.5%,D组11例患者中全部穿刺获取关节液,成功率为100.0%,两组对比具有显著性差异(P0.01);C组平均穿刺(2.5±0.9)次,D组平均穿刺(6.1±1.2)次,两组对比有显著性差异(P0.01);C组抽的关节液量(4.6±0.9)mL,也较D组(8.7.4±5.0)mL多,两组对比具有显著性差异(P0.01)。结论超声引导下穿刺可作为人工关节周围穿刺获取关节液的首选方法。     

前路病灶清除植骨Ⅰ期前路内固定治疗脊柱结核

目的 评估不同节段脊柱结核前路内固定的疗效和安全性.方法 46例患者平均年龄45.58岁,测量术前、术后及最终的后凸畸形的角度及病椎的融合率.在有神经系统症状的患者中,随访其神经功能恢复情况.所有患者最少随访2年,平均随访39个月.结果 前路内固定能有效地纠正后凸畸形,平均矫正角度(18.58°±4.37°),有利于脊柱融合,平均丢失角度(1.72°±1.56°).有神经症状的44例患者中27例(61.3%)全部恢复,17例(38.7%)部分恢复.所有病例没有假关节形成,无内固定失败.所有患者都临床愈合,无未愈及复发病例.结论 前路病灶清除植骨内固定由于手术方法相对简单,融合节段短,能够为脊柱融合提供可靠的稳定性,融合率高,是一种治疗脊柱结核的安全有效方法.     

低位腹主动脉球囊阻断在控制骶骨巨大肿瘤术中出血的应用

目的 探讨骶骨巨大肿瘤切除术中腹主动脉球囊阻断对出血控制的效果.方法 在骶骨肿瘤患者切除中采用腹主动脉球囊阻断术10例,回顾骶骨肿瘤11例应用传统的术前血管栓塞技术的临床资料,并进行比较.统计学处理采用方差分析t检验和x2检验.结果 腹主动脉球囊阻断组手术时间为（326±93.8）min,术中出血量为（3750.7±644.1）mL,有1例骶神经损伤.对照组手术时间为（370±69.3）min,术中出血量为（7388±706.99）ml,局部皮肤缺血性疼痛3例,骶神经损伤有1例,出现性功能障碍1例.两组比较手术时间t=1.2127,P＞0.05,无显著性差异;术中出血量t=4.9446,P＜0.001;并发症也有显著性差异.结论 在骶骨肿瘤手术时,采用腹主动脉球囊阻断可以减少术中出血量及并发症.可有效控制骶骨巨大肿瘤切除术中的出血.     

固定平台与旋转平台假体全膝关节置换术后早期疗效的回顾性观察

目的回顾性观察PFC固定平台假体和RP旋转平台假体2种人工膝关节置换系统治疗成人膝关节骨性关节炎术后早期疗效。方法 54例(58膝)膝关节骨性关节炎行全膝关节置换术(TKA),其中固定平台组28例(30膝);旋转平台组26例(28膝)。结果所有患者均获3~54个月随访,术后切口愈合良好,均能直立行走。末次随访时固定平台组、旋转平台组膝关节评分(HSS)与膝关节活动度(ROM)分别为(87.20±8.12)、(86.34±6.39)分和(106.73±6.24)°、(107.12±4.58)°,与术前比较差异有统计学意义(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PFC与RP假体系统全膝关节置换术是治疗成人晚期膝关节骨性关节炎的有效方法,早期假体生存率较满意,术后两者对膝关节功能改善差异无统计学意义。长期的假体生存率需要进一步研究观察。