基于RNA-Seq技术对血链球菌spxA_2敲除株的转录组分析

目的应用RNA测序(RNA-Seq)技术分析spxA2调控的靶基因,以期揭示spx蛋白的转录调控机制,为血链球菌致病机制的深入研究奠定基础。方法采用高通量测序技术对血链球菌野生株和spxA2突变株进行转录组分析,将测序所产生的数据绘到SK36参考基因组上,获得各个基因的表达信息,应用基因组比对结果进行基因定量。利用edgeR软件分析△spxA2和WT中的基因差异表达情况。随机抽取若干差异表达基因,通过实时定量PCR对基因的差异表达情况进行验证。应用GOTermFinder软件,找出差异表达基因中显著富集GO条目,并推测差异表达基因行使的主要生物学功能;通过Pathway分析进一步了解差异表达基因所参与的代谢通路及其具体的生物学意义。结果将序列数据与公共数据库COG、GO、KEGG、NR、NT和Swiss-Pro进行BLAST比对,89.1%(1203个)独立基因得到功能注释。其中,859个独立基因注释到COG并被划分到25个功能类别,910个独立基因注释到GO数据库,707个(52.4%)独立基因被归为KEGG中的32条代谢途径。对△spxA2组和WT组进行基因表达差异分析,确定spxA2基因敲除株有17个基因表达上调,5个基因表达下调。GO功能显著性富集和Pathway显著性富集分析,表明筛选到的差异表达基因主要富集在氨基酸代谢生物学过程和酶活性细胞组分,共得到2条显著富集的代谢通路,涉及丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢及牛磺酸和牛磺酸代谢。结论RNA-Seq所得序列数据在测序深度、覆盖率以及与血链球菌SK36标准株基因组的比对结果均较理想,转录组测序结果基本能反映血链球菌的整个转录组情况。spxA2是一个全局性转录调控因子,参与多个基因的转录调控,该蛋白的改变可导致血链球菌丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢以及牛磺酸和牛磺酸代谢通路发生变化,可为深入研究血链球菌致病机制及其与代谢途径之间的联系提供重要依据。     

我的生命里只剩下妖精

做个妖精女人。循规蹈矩的淑女，不动声色的Office Lady，雷厉风行的职场女强人……日复一日地重复着自己，生活被时间冲淡，而岁月就这样溜走。     

HPLC-FD测定大鼠尿液中儿茶酚胺类化合物

目的: 建立HPLC-FD测定大鼠尿液中儿茶酚胺类化合物(CAs)的含量,为虚热证的药理学研究提供参考. 方法: 采用酸性氧化铝吸附法制备大鼠尿样;使用HiQSil C₁₈V色谱柱,流动相0.02 mol·L^-1 KH₂PO₄水溶液,流速0.5 mL·min^-1,激发波长(E_X)280 nm,发射波长(E_M)316 nm,柱温40℃. 结果: 大鼠尿样供试液中的儿茶酚胺类化合物可以与各干扰组分达到基线分离;CAs各组分线性、精密度和重复性良好;该法制备的样品溶液在16 h内测定,RSD<2%;CAs的回收率在65%~71%,试验中测得适应期后大鼠尿液中CAs含量稳定. 结论: 该文采用的供试品溶液制备方法简便,建立的色谱分析方法稳定、可靠,适合于大鼠尿液中CAs的含量测定.     

腹腔镜Toupet胃底折叠术治疗食管裂孔疝合并胃食管反流病的临床疗效

目的探讨腹腔镜Toupet胃底折叠术治疗食管裂孔疝合并胃食管反流病的临床疗效。 方法选取2012年1月至2018年6月,吉林大学第二医院就诊的80例食管裂孔疝合并胃食管反流病患者为研究对象。依据患者具体状况行不同类型的疝修补术,所有患者均行腹腔镜Toupet胃底折叠术。于术后统计患者手术效果及反流情况,观察手术前后食管压变化。 结果与术前相比,术后6个月患者反流时间显著缩短、反流次数与长反流次数显著减少、酸反流时间百分比显著下降,差异均有统计学意义（P<0.05）。与术前相比,术后6个月患者DeMeester及GERDQ评分均显著下降,差异均有统计学意义（P<0.05）。与术前比较,术后6个月患者LES压力、残余压均显著升高,松弛率显著下降,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论腹腔镜Toupet胃底折叠术治疗食管裂孔疝合并胃食管反流病可有效增加食管压力,抑制患者反流症状,疗效良好,值得推广应用。     

老龄化背景下城乡老年人健康关注度的差异分析

目的探讨城乡老年人健康关注度的现状、差异及其影响因素。方法采用2018年中国健康与养老追踪调查(CHARLS)数据, 选择相关指标对城乡老年人健康关注度进行描述, 从社会人口学特征和健康状况两个方面比较城乡老年人健康关注度的差异, 采用多因素logistic回归模型进行城乡老年人健康关注度影响因素的分析。结果共纳入城乡老年人7758名, 包括城市老年人1 913例, 农村老年人5 845例。半数(3 899, 50.3%)老年人的健康关注度处于一般水平, 城乡老年人间有所差异(χ2=186.61, P<0.05)。不同特征的城乡老年人健康关注度不同, 身患两种以上疾病的农村老年人健康关注度更高(χ2=13.71, P=0.001), 不同居住类型的城市老年人健康关注度不同(χ2=28.96, P<0.001)。回归分析显示, 城乡老年人健康关注度受多方面因素的影响, 性别(OR=1.51, P<0.001)、健康状况(OR=2.18, P<0.001)、认知功能损伤情况(OR=2.93, P<0.001)、抑郁情况(OR=0.49, P<0.001)...     

灯盏花乙素抗肿瘤药理作用及机制研究进展

灯盏花乙素是一种天然的黄酮类化合物,具有抗氧化,抗纤维化、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性。本文旨在对灯盏花乙素抗肿瘤作用机制进行综述,以期为今后临床治疗肿瘤提供参考和借鉴,为其进一步开发利用提供科学依据。     

不同材质斑块的狭窄颈动脉模型中新型锌合金支架的支撑性能研究

目的研究在不同斑块类型的理想化狭窄颈动脉模型中新型锌合金支架的受力变形情况,为新型锌合金支架的设计与应用提供科学的参考意见。方法运用Pro/E三维建模软件构建理想化的50%狭窄率血管模型和一种I型连接筋血管支架;利用ABAQUS有限元分析软件,模拟支架受相同位移扩张条件作用下分别在钙化和非钙化斑块的理想化狭窄血管中的扩张过程。通过计算支架狗骨头率和残余狭窄率评估支架的支撑性能。结果在斑块材料属性分别为钙化和非钙化的模型中,支架扩张阶段的最大应力分别为433.4 MPa、432.4 MPa,回弹阶段的最大应力值分别为266.1 MPa、259.4 MPa;支架狗骨头率分别为44.5%、33.3%,血管残余狭窄率为40.8%、30.2%。结论支架在扩张过程中受到的von Mises应力都小于材料的应力强度极限,且血管狭窄率都有明显的下降。对于两种斑块类型的狭窄血管,新型锌合金支架都起到了一定的支撑作用。     

ghrelin调控ERK信号通路对乳腺癌细胞多药耐药的影响及机制

目的:探讨ghrelin调控ERK信号传导通路对乳腺癌细胞多药耐药的影响及机制.方法:人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞培养,设立对照组、多柔比星组、gbrelin组、ghrelin联合多柔比星组、ghrelin联合多柔比星加PD098059抑制剂组,采用流式细胞法检测细胞凋亡,Western-blot方法检测细胞ERK、p-ERK、P-gp蛋白的表达.结果:在ghrelin干预下人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡率最低(P＜0.01),在多柔比星的干预下人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡率最高(P＜0.01),ghrelin联合多柔比星能够抑制多柔比星对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的促凋亡作用(P＜0.01),ghrelin联合多柔比星加ERK信号通路特异性阻滞剂PD98059能够减弱ghrelin联合多柔比星对人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的抑制作用(P＜0.01).多柔比星组与ghrelin组相比ERK表达及p-ERK水平明显下降(P＜0.05)、且ghrelin组与多柔比星组相比P-gp蛋白表达明显上升(P＜0.05),ghrelin联合多柔比星组与多柔比星组相比ERK表达及p-ERK水平明显增加(P＜0.05)、且P-gp蛋白表达明显增加(P＜0.05),ghrelin联合多柔比星加抑制剂组与ghrelin联合多柔比星组相比ERK表达及p-ERK水平明显下降(P＜0.01),P-gp蛋白表达无显著性差异(P=0.07).结论:一定浓度的ghrelin激活乳腺癌细胞ERK信号通路增加P-gp蛋白表达,从而抑制多柔比星诱导乳腺癌细胞凋亡而诱发耐药的产生,阻断ghrelin-ERK信号通路可能逆转乳腺癌细胞多药耐药的发生.     

超声引导下导丝定位联合皮肤体表标记在切除乳腺微小病灶中的应用

探讨超声引导下导丝定位联合皮肤体表标记在经乳晕旁切口切除乳腺不可触及的微小病灶中的价值。对81例单发乳腺微小肿物进行手术治疗,术前所有患者均于乳腺彩超下置入定位导丝并于体表标记肿物位置。所有患者均选用乳晕旁弧形切口,顺定位导丝结合术前做好的体表标记顺利找到并切除肿物。81例手术均获得成功,术中2例导丝出现滑脱,1例导丝被电刀烫断,通过寻找残余的导丝仍成功切除病灶。应用超声引导下导丝定位联合皮肤体表定位方法,使一些临床上不可触及的肿物也能够选择乳晕旁隐蔽切口作为手术路入,具有定位准确、操作方便、术后美观等优点,值得推广。