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目的:评估ATP-TCA肿瘤药敏检测法指导制定大肠癌化疗方案的可行性。方法:应用ATP-TCA肿瘤药敏检测法,检测28例大肠癌手术标本和19例大肠癌外周血标本对8种常用抗肿瘤药物的敏感性。结果:大肠癌对抗癌药物的敏感程度存在着异质性,联合用药的敏感率高于单药。外周血标本和手术标本检测结果具有一致性,检测结果与临床疗效基本相符。结论:ATP-TCA肿瘤药敏检测法可用于临床制定大肠癌个体化的化疗方案。 相似文献
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目的:探讨RNAi沉默酪氨酸激酶受体RON(recepteur d'origine nantais)基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和对抗肿瘤药物敏感性的影响.方法:构建RON基因的RNAi慢病毒载体Lv-RON-siRNA.Real-time PCR和Western blotting检测RON基因的沉默效率及RON蛋白表达水平;Transwell侵袭实验和ATP-TCA(ATP-tumor chemosensitivity assay)检测RON基因对HT-29细胞侵袭和对药物敏感性的影响.结果:慢病毒载体Lv-RON-siRNA感染HT-29细胞对RON基因的沉默效果达到70%.Lv-RON-siRNA感染后,HT-29细胞侵袭力较对照组明显降低(0.97±0.072 vs 1.29±0.076,P<0.05).Lv-RON-siRNA感染后,HT-29细胞对5-氟尿嘧啶(5-fluorouraci,5-FU)的IC90值和IC50值分别为(14.28 ±1.34)、(8.93±1.20) μg/ml,顺铂(cisplatin,DDP)的IC90值和IC50值分别为(1.91±0.22)、(0.64±0.07) μg/ml,均明显低于对照组(P<0.01).结论:沉默RON基因表达能抑制HT-29细胞的侵袭力,提高细胞对5-FU和DDP的敏感性. 相似文献
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目的研究慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)对大肠癌细胞RON基因的干扰效率,构建RON基因稳定沉默的大肠癌细胞株。方法应用实时聚合酶链反应(PCR)检测大肠癌细胞DLD-1、HCT116、LOVO、RKO、SW480、HT29的RONmRNA表达情况,筛选出表达丰度能满足RNAi的大肠癌靶细胞HT29。根据人RON基因序列,构建4种慢病毒载体质粒pGCSIL/RON-短发夹RNA(shRNA),转染包装细胞293T,获得4种重组慢病毒pGCSIL/RON-shRNA,分别感染HT29细胞。应用实时PCR检测各组HT29细胞RONmRNA表达情况,筛选出RON干扰效率最高的一种shRNA慢病毒载体质粒,构建RON基因稳定沉默的大肠癌细胞株HT29/RON-shRNA。结果 DLD-1、HCT116、RKO、SW480、HT29细胞RON表达丰度能满足RNAi的需要,选择HT29细胞作为RNAi的靶细胞。阴性对照病毒感染的细胞样品相对正常未感染病毒的细胞目的基因的相对表达水平为(94±5)%,RONshRNA-1靶点病毒感染的细胞为(86±5)%,RONshRNA-2靶点病毒感染的细胞为(67±6)%,RONshRNA-3靶点病毒感染的细胞为(63±6)%,RONshRNA-4靶点病毒感染的细胞为(30±8)%,RONshRNA-4靶点病毒感染的细胞的表达水平显著低于其他细胞(P值均<0.01),其对目的基因的沉默效果达到(70±8)%。结论慢病毒介导RNAi能显著抑制大肠癌细胞HT29的RON基因的表达,慢病毒载体介导的RNAi是一种高效的"基因沉默"的手段。 相似文献
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目的观察贝伐珠单抗联合雷替曲塞或卡培他滨治疗老年晚期结直肠癌的疗效及安全性。方法将58例老年晚期结直肠癌患者按随机数字表法分为观察组(贝伐珠单抗联合雷替曲塞组)30例,对照组(贝伐珠单抗联合卡培他滨组)28例。比较两组患者临床疗效及不良反应发生率。结果观察组疾病控制率(DCR)、肿瘤进展时间(TTP)为80.0%、(8.4±1.5)个月,对照组为78.6%、(8.2±1.6)个月;两组比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。观察组恶心呕吐、手足综合征发生率均明显低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);但两组患者血小板下降、中性粒细胞下降、贫血、转氨酶升高、高血压、蛋白尿、腹泻、口腔黏膜炎、手足综合征等不良反应发生率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论贝伐珠单抗联合雷替曲塞治疗老年晚期结直肠癌的疗效确切,与联合卡培他滨方案效果相当,且患者能耐受不良反应。 相似文献
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目的评价术前经肠镜浆膜下自体血标记定位法在腹腔镜结直肠手术中的应用效果。方法对60例需行腹腔镜结直肠癌根治术的患者进行前瞻性研究。术前1 d行肠镜检查,在肿瘤下缘0.5 cm处行浆膜下四点法自体血标记肿瘤定位,术中观察寻找标记位置,术后剖视标本确认定位是否准确,对操作时间、操作成功率以及有无并发症进行评估,术后病理评估切除标本的切缘情况。结果成功在58例患者中确定了自体血标记部位,顺利完成了腹腔镜结直肠癌根治术,成功率96.7%,所有患者均无出血、穿孔和发热等并发症;2例未找到标记点,行术中肠镜定位后成功手术。手术过程均顺利。术后剖视标本,60例患者均显示定位准确,其中2例患者肿瘤位于脾曲,标记在背侧显示,腹侧无标记,导致术中无法辨认,标本病理回报显示切缘均阴性。结论经肠镜浆膜下自体血标记为腹腔镜结直肠手术前定位提供了一种安全简便、经济有效的方法,可以成为新的替代方法。 相似文献
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目的构建含大肠杆菌的嘌呤核苷酸磷酸化酶(ePNP)DNA的重组逆转录病毒载体,观察ePNP基因在人肝癌细胞株HepG2的表达。方法用PCR法获得ePNP亚克隆,构建重组逆转录病毒载体pDsRed-ePNP,鉴定测序。脂质体法将逆转录病毒载体pDsRed-ePNP转染AmphoPackTM-293包装细胞,获得高滴度病毒并感染HepG2细胞。流式细胞术和荧光显微镜检测红色荧光蛋白(RFP)的表达。RT-PCR法检测ePNPmRNA的表达。ATP-生物荧光体外检测实验(ATP-TCA法)检测不同浓度Fludarabine对HepG2、HepG2/pDsRed和HepG2/ePNP细胞的杀伤作用。结果克隆的ePNP基因与文献报道一致,成功构建重组逆转录病毒载体pDsRed-ePNP。病毒包装后滴度为5E+4TU/mL。表达RFP的HepG2/ePNP阳性细胞率为97.1%。HepG2/ePNP细胞稳定表达ePNP。低浓度Fludarabine对HepG2/ePNP细胞毒效应明显。结论成功构建重组逆转录病毒载体pDsRed-ePNP,并且获得稳定表达ePNP基因的HepG2/ePNP人肝癌细胞株。 相似文献
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目的 提高对胆管癌的诊断与外科治疗水平。方法 对1991—2001年经手术治疗且病理证实的30例胆管癌进行回顾性分析。结果 术前早期诊断率低,总手术切除率66.7%,其中根治性切除率16.7%,姑息性切除率50%。随访22例:根治性切除组平均生存期18.6个月,姑息性切除组平均生存期13.5个月;姑息性切除组中合并镍钛胆道支架、胆肠吻合术者平均生存期明显长于单纯外引流组。结论 早期诊断、根治性切除是提高治疗效果的关键,姑息性切除和镍钛记忆合金胆道支架具有改善生活质量、延长生存期的疗效。 相似文献