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载体介导的RNA干扰技术抑制肝癌耐药细胞MDR1表达的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :构建含多药耐药基因MDR1的短发夹状RNA(shorthairpinRNA ,shRNA)表达质粒 ,观察对肝癌耐药细胞Bel 740 2 /R的MDR1mRNA的抑制作用。方法 :利用分子克隆技术 ,将含MDR1的双链DNA ,与经双酶切后的载体PGE 1连接 ,构建pshRNA MDR1重组质粒 ,在脂质体的介导下转染肝癌耐药细胞株Bel 740 2 /R ;RT PCR分析MDR1mRNA的表达 ,MTT法检测细胞对药物的敏感性 ,流式细胞仪检测细胞内罗丹明 12 3 (Rh12 3 )的潴留和P gp的表达。结果 :PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功 ,并能明显地抑制MDR1mRNA的表达 ;对盐酸表柔比星和顺铂的半数抑制浓度IC50明显降低 ,P <0 0 5 ;P gp的表达阳性率降低了 5 7 3 % ;细胞内Rh12 3的浓度显著增高 ,P <0 0 5。结论 :构建的pshRNA MDR1表达质粒能有效地降低肝癌耐药细胞MDR1mRNA和P gp的表达。 相似文献
2.
目的观察肾移植受者脂蛋白(a)[Lp(a)]在手术前后的变化以及与急性排斥反应(AR)的发生和肾功能恢复的关系。方法对43例接受同种异体肾移植术患者Lp(a)进行连续监测。结果患者移植前Lp(a)和三酰甘油(TG)显著高于对照组(P<0.01、P<0.05);载脂蛋白A1(ApoA1)显著低于对照组(P<0.01)。术后随时间延长,患者的Lp(a)呈持续性下降趋势,2周降至与对照差异无显著性。但不同组间差异明显。排斥组术前、术后Lp(a)均高于稳定组(P<0.05、P<0.01);而中毒组与稳定组差异无显著性(P>0.05)。在术前Lp(a)≥300mg/L的高Lp(a)患者中有55.6%术后发生AR,明显高于正常Lp(a)水平的患者,差异具有非常显著性(χ2=8.246,P<0.01)。结论肾移植患者术后Lp(a)明显降低,Lp(a)水平与AR之间存在着一定的关联,动态监测肾移植受者手术前后Lp(a)的变化对AR的发生具有提示作用。 相似文献
3.
胃肠道间质瘤(gastrointestinal tumors,GIST)是消化道最常见的间叶源性肿瘤.我院2005年1月至2011年1月共诊治23例GIST患者,现报告如下.
临床资料
1.一般资料:23例均经病理确诊为GIST的患者,男12例,女11例,发病年龄34~76岁,中位年龄55岁.肿瘤的发生部位:胃15例,小肠6例,结直肠2例.首发症状:消化道出血13例(62%),腹部包块4例(17%),腹痛、腹胀3例(13%),另有3例(13%)是在体检或是在行其他手术中发现.辅助检查:23例均行CT检查,均能发现病灶,内镜检查确诊2例.术后病理检查肿瘤直径3~15cm,,均为梭形细胞.23例经免疫组织化学检查:CD117阳性率为87%(20/23),CD34阳性率70%(16/23),两者均阳性率43%(10/23).清扫31枚淋巴结均未发现淋巴结转移. 相似文献
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老年急性重症胆管炎的诊治探讨 总被引:3,自引:0,他引:3
目的: 为了加深对老年急性重症胆管炎(ACST)的认识, 提高青年医师的诊治能力。方法: 通过92 例老年ACST的诊治实践和文献复习, 归纳出了简明实用的“诊断要素”和“治疗原则”。结果: 手术组治疗全部成功, 非手术组死亡率18.48% 。结论: 快捷准确的诊断能力, 合理及时的手术方案是提高疗效的关键, 从而显示出“诊断五要素”和“治疗八句话”的实用价值及推广意义。 相似文献
6.
目的研究直肠癌向直肠系膜远端微转移与临床病理间的关系,为直肠癌手术方式提供依据。方法收集直肠癌术后标本42例,沿肿瘤下缘纵向切取宽约2cm的远端直肠系膜组织,用脂溶法处理后,计数其中淋巴结,随后按每1cm距离切成组织块,行HE染色,取HE检查阴性的切片,再用细胞角蛋白(cytokeratin,CK)20为标记的免疫组织化学方法检查,观察肿瘤远端直肠系膜中微转移的情况。结果直肠远端系膜中共检出8例有淋巴结微转移(其中2例合并有癌结节播散),1例仅有癌结节播散,远端系膜总转移率为21.43%(9/42);转移最远距离为4cm。直肠癌系膜远端微转移在肿瘤大体类型、分化程度、浸润深度等因素间差异有统计学意义(P0.05);而在年龄、性别、肿瘤部位和大小等因素间差异无统计学意义(P0.05)。结论直肠系膜远端的微转移主要表现为淋巴结的微转移和癌结节的形成;微转移发生与肿瘤大体类型、分化程度、浸润深度等因素显著相关。 相似文献
7.
MDR1基因稳定表达的人肝癌多药耐药细胞株的建立 总被引:4,自引:0,他引:4
目的 建立多药耐药基因(MDR1)稳定表达的人肝癌Bel-7402耐药细胞株,为应用RNA干扰技术逆转肿瘤多药耐药基因的表达提供实验模型。方法 应用阿霉素(ADM)长期培养筛选建立Bel-7402耐药细胞株,应用MTT法、流式细胞仪(FCM)及逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)对该细胞株相关特性(耐药范围、致死剂量、p-糖蛋白功能及其表达阳性率、MDR1基因检测)进行比较研究。结果 经MTT法检测,耐药细胞株耐药性明显增高,FCM检查发现从敏感细胞到耐药细胞,其阿霉素潴留功能由77.7%降至25.1%,P-糖蛋白(P—gp)阳性率由1.4%升高至54.0%,RT-PCR检查显示该细胞中MDR1 mRNA呈高表达。结论 成功建立了稳定表达MDR1基因的人肝癌Bel-7402耐药细胞株,该细胞中P—gp呈高表达,稳定性好。 相似文献
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人肝癌多药耐药细胞株survivin蛋白的表达及意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨人肝癌多药耐药细胞株survivin蛋白表达与肝癌细胞多药耐药的关系.方法用阿霉素(DOX)浓度梯度递增导法,建立人肝癌多药耐药细胞株(Bel-7402/DOX).用流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡率,同时用蛋白印迹(Western blot)检测其survivin蛋白表达.结果随着培养液中 DOX 浓度的增加Bel-7402/DOX 的凋亡率逐渐增加,survivin蛋白的表达逐渐增强.结论Survivin蛋白的表达变化可能与人肝癌细胞获得性耐药有关. 相似文献
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目的 探讨干细胞相关基因Oct4与Wnt/β-catenin 及TGF-β信号通路在肝癌细胞系中的相互作用。方法 应用RT PCR法检测Oct4、Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路相关基因β-catenin、Wnt10b、TCF3及 ELF、Smad3和 Smad4在肝癌组织及细胞系中的表达;使用siRNA 沉默人肝癌HepG2细胞Oct4和TCF3的表达,实时荧光定量RT PCR法检测Wnt10b、β-catenin、 TCF3及 ELF、Smad3和 Smad4等基因的表达变化。结果 Oct4和β catenin、Wnt10b、TCF3及 ELF、Smad3和 Smad4在肝癌组织及细胞系中同时表达; siRNA-Oct4 沉默人肝癌HepG2细胞Oct4后,Oct4表达明显下调,β-catenin、Wnt10b随之下调达40%~50%左右,而TCF3表达升高到3倍左右;同时ELF、Smad3和 Smad4均下降到原来的1%以下;而siRNA-TCF3 沉默TCF3后,Oct4的表达也升高2~3倍;ELF升高亦达2~3倍,Smad3和 Smad4也略有升高。结论 Oct4和β-catenin、Wnt10b、TCF3及 ELF、Smad3和 Smad4在肝癌组织及细胞系中同时表达提示彼此之间有相互作用。RNAi实验证明Oct4对Wnt/β-catenin及TGF-β信号通路的成员有调控作用;Oct4 与TCF3之间的负反馈作用值得深入研究。 相似文献