性别差异对脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4和髓样分化蛋白-2基因表达的影响

目的探讨性别差异对脓毒症大鼠肝脏组织Toll样受体4(TLR4)和髓样分化蛋白- 2(MD-2)基因表达的影响。方法以脂多糖(LPS)按5 mg/kg体重由大鼠腹腔注射制作脓毒症动物模型,注射后2 h留取肝脏组织检测TLR4、MD-2和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达,同时测定各组大鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)及雌二醇含量。结果正常雌雄性大鼠肝脏组织均可表达少量TLR4、MD-2、TNF-α基因,其中雌性组分别为0．175±0．034、0．211±0．044、0．201±0．068; 雄性组分别为0．205±0．061、0．243±0．049、0．243±0．063,两组数据差异无统计学意义(P> 0．05),但LPS刺激后雌性大鼠肝脏组织上述指标分别为0．615±0．089、0．708±0．181、0．730± 0．118,血浆中ALT含量为(81．07±10．72)U／L;雄性组分别为0．723±0．091、1．123±0．272、 0．881±0．156,ALT含量为(106．39±14．21)U／L,雌性组各项指标均明显低于雄性大鼠(P< 0．05)。相关分析表明雌性及雄性脓毒症大鼠肝脏组织TLR4及TNF-α基因表达与相应性别大鼠血浆中雌二醇含量呈显著负相关(P<0．05)。结论 LPS刺激后大鼠肝脏组织TLR4、MD-2及 TNF-α基因表达存在性别差异,内源性雌激素的作用可能导致雌性脓毒症大鼠肝脏组织损伤较雄性轻。     

脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞基因表达谱分析

目的　利用基因芯片技术分析脂多糖 (LPS)活化的小鼠腹腔巨噬细胞基因表达谱 ,以更全面地了解LPS诱导的巨噬细胞反应。方法　以未刺激的和用 1mg/LLPS刺激的小鼠腹腔巨噬细胞制备3 3 P标记的cDNA探针 ,分别与含有 1176个已知基因的小鼠cDNA芯片杂交。结果　活化组和未刺激组间的 2倍差异表达基因为 118个 ,3倍差异表达基因为 6 9个 ,其中 4 4个上调 ,2 5个下调。转录因子、细胞内信号调节蛋白、炎症细胞因子和细胞凋亡相关基因的转录发生明显的调节变化。结论提供了LPS活化的巨噬细胞综合基因表达信息 ,并筛选出一些新的可能与LPS活化相关的基因。     

促炎及抗炎细胞因子在脓毒症小鼠肠道相关淋巴组织的表达

脓毒症及其所并发的多器官功能失常综合征 (ＭＯＤＳ)是外科医生所面临的困难之一。它是由内源性介质和外源性介质所介导的全身炎症反应 ,是各种损伤因素通过机体的防御系统而启动了全身炎症系列反应 ,从而造成炎症反应的失控 ,产生过量的炎症介质和细胞调节因子损伤正常组织的结果。本研究是以脓毒症小鼠为模型 ,探讨在致伤后不同时间点 ,肠道相关淋巴组织中促炎 /抗炎细胞因子的表达情况 ,试图阐明肠道在ＭＯＤＳ时既是炎症介质细胞因子的重要来源地 ,又是参与启动全身炎症反应的重要器官。一、材料与方法1 动物模型 :8～ 10周龄ＮＩＨ小…     

淋巴结转移度对进展期结直肠癌的预后作用

目的探讨淋巴结转移度（1ymphnoderatio,LNR）对进展期结直肠癌的预后作用。方法对2007年1月-2012年1月在本院普通外科行根治手术的181例结直肠癌临床资料进行分析。结果根据LNR中位数将结直肠癌患者分为低LNR组（LNR〈0．17,96例）和高LNR组（LNR≥0．17,85例）,两组1年、3年、5年总生存率（overallsurvival,OS）分别为97．9％VS87．1％、88．8％vs61．0％、69．6％vs43．9％,差异有统计学意义。多因素分析结果显示检出淋巴结数（examinedlymphnodes,ELN）和LNR均为影响结直肠癌预后的独立相关因素,且ELN分层分析结果显示,LNR对进展期结直肠癌预后作用独立于ELN。结论LNR具有独立预后作用,可作为进展期结直肠癌淋巴结分期和预后判断的重要补充。     

一种改良小鼠脓毒症模型的建立

目的 建立一种模拟外科临床实际,早期致死率低,用于脓毒症综合治疗研究的小鼠模型.方法 小鼠随机分为3组,即对照组、盲肠结扎穿孔(CLP)组和改良组.对照组行假手术;CLP组行盲肠结扎穿孔术;改良组通过CLP后8 h行盲肠切除和腹腔生理盐水冲洗建立脓毒症模型.观察各组动物出现死亡时间及24、48、72 h累计死亡率;术后4、12、24 h分别处死动物,检测外周血白细胞计数(VC-BC),血清内毒素、肿瘤坏死因子(TNF)水平及肺、肝病理.结果 改良组动物出现死亡时间较CLP组明显延迟,术后48、72 h累计死亡率虽明显低于CLP组(P＜0.05),但仍分别高达53.3%、80%;术后各时间点WBC较CLP组与假手术组明显升高(P＜0.05);血清内毒素和TNF-α水平明显高于假手术组,但低于CLP组;光镜下见肺泡间隔增宽,间质充血、水肿、大量炎性细胞浸润,肝细胞水肿伴散在点状坏死,肝窦扩张伴间质大量炎性细胞浸润.结论 该脓毒症改良模型具有良好的外科临床相关性,早期致死率低,可重复性好.     

共聚焦显微镜监测小鼠腹腔巨噬细胞膜电位

1 材料和方法 处死小鼠,腹腔内注射 5 mL 冷 Hanks 液,轻揉腹部,抽吸细胞悬液约 4 mL。细胞洗两次后,加含 10％ 小牛血清的 RPMI 1640 培养基 10 mL,接种于 96 孔板中, 每孔 01 mL,37℃ 静置 60 min,使巨噬细胞贴壁。用无血清培养液冲洗培养孔三次,去除未贴壁细胞,剩下贴壁的巨噬细胞。加入 01 mL 5 μmol/L 的 DBAC4(3)（美国分子探针公司产品,用无水乙醇溶解,用无血清培养液稀释）,室温温育 10 min。将 96 孔板置于共聚焦显微镜（美国 Meridian 公司 Ultima 型）的载物台上,调整到最佳扫描参数后开始动态扫描。在扫…     

术后腹腔粘连动物模型的研究进展

腹部手术后腹腔粘连至今仍无有效的预防和治疗方法,是剖腹术后常见的并发症,因此预防和治疗腹部手术后腹腔粘连,仍是当今腹部外科研究的重要课题之一。虽然腹腔粘连是限制炎症扩散的一种保护性生理反应,但可给患者带来长期腹痛甚至肠梗阻等严重并发症,因此预防粘连形成显得更加重要。近年来的研究报告指出曾经历过腹部手术的病人80%~90%发生术后肠粘连,更甚者发生肠梗阻[1,2]。发生粘连的患者中,超过80%的患者在伤口与网膜之间形成粘连,50%的病例涉及小肠。粘连是影响正常组织功能的术后并发症。近年来,对粘连的大量研究仍未取得成功,其主要…     

可降解聚乳酸支架在胆管损伤治疗中作用的实验研究

目的评价一种新型的可降解聚乳酸支架在胆管损伤胆管修复中的支撑作用和其安全性以及可行性。方法选择4条犬作为实验动物，麻醉后行胆囊切除，横断胆总管，造成胆管损伤模型。行胆管对端吻合，并放置可降解聚乳酸支架支撑。分别于10周、11周、13周和15周行胆道造影，并切取胆总管组织和肝组织做组织学检查。结果所有犬血胆红素正常。胆道造影检查显示胆管支架通畅，没有胆管狭窄。支架膨胀，完好支撑在胆管内，没有移位。支架内没有胆泥形成。组织学检查显示胆管黏膜未见异常，没有明显炎症反应和上皮增生。结论可降解聚乳酸支架能有效支撑胆管，安全，可行，为胆管损伤的支撑治疗提供了一个新的材料。但尚需要对其进行进一步观察和研究。     

Sema6D与受体PlexinA1在胃癌中的表达及其临床病理意义

目的 探讨Sema6D及其受体PlexinA1在胃癌中的表达及它们与肿瘤细胞增殖和血管生成的关系.方法 应用逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测20例胃癌患者的癌组织及相应胃切缘正常胃黏膜Sema6D及其受体PlexinA1的mRNA和蛋白表达;免疫组织化学方法检测50例胃癌组织和20例胃正常黏膜中Sema6D、PlexinA1、肿瘤细胞增殖指数(Ki-67)和第Ⅷ因子(微血管密度MVD)的表达.结果 PT-PCR和Western blot示胃癌组织中的Sema6D mRNA和蛋白的表达明显高于胃正常黏膜[(0.24±0.06)比(0.19±0.07),P＜0.05,和(0.45±0.16)比(0.29±0.08),P＜0.01];同时PlexinA1 mRNA和蛋白的表达亦明显高于胃正常黏膜[(0.71±0.37)比(0.60±0.25),P＜0.05,和(0.47±0.16)比(0.21±0.08),P＜0.01].肿瘤细胞增殖指数(Ki-67)随着Sema6D和PlexinA1表达的增高而增高(r=0.5996,P＜0.01和r=0.5024,P＜0.05);胃癌组织中MVD与Sema6D和PlexinA1存在明显正相关(r=0.5759,P＜0.01和r=0.7286,P＜0.01).结论 Sema6D及其受体PlexinA1在胃癌发生发展中发挥重要作用,与促进肿瘤细胞增殖和调节血管生成有关.     

黏蛋白和黏蛋白结合蛋白与结直肠癌的关系

上皮表面包括结肠上皮均被一层黏膜覆盖与保护,黏膜中主要糖蛋白为一种大分子量的黏蛋白(mucins,MUC).MUC含有丰富的成簇低聚糖,通过O-糖苷键与富含苏氨酸、脯氨酸、丝氨酸的多肽相连.MUC除了对正常结肠具有保护作用外,结肠肿瘤形成时MUC也发生改变.本文就MUC与结直肠癌的关系进行综述.