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目的研究大鼠肝移植后自发免疫耐受的形成与移植肝内CD4~ CD25~ 调节性T细胞(Tr细胞)的关系。方法按供、受者不同将实验分为3组。急性排斥组:DA大鼠为供者,LEW大鼠为受者;自发耐受组:LEW大鼠为供者,DA大鼠为受者;同基因组:供、受者均为DA大鼠。各组均建立大鼠原位肝移植模型。分别在肝移植术后4、7、14、30和90 d时采用密度梯度离心法分离移植肝内淋巴细胞,免疫磁珠分离(MACS)法分选出CD4~ CD25~ Tr细胞;用流式细胞术(FCM)检测细胞纯度,同时分析CD4~ CD25~ Tr细胞比例的变化;体外细胞增殖试验研究CD4~ CD25~ Tr细胞对CD4~ CD25~-T细胞的免疫抑制作用。结果肝移植早期,急性排斥组和自发耐受组移植肝内CD4~ CD25~ Tr细胞比例均明显增加,其中急性排斥组增加更为明显;移植后4 d左右,两组CD4~ CD25~ Tr细胞比例开始下降,急性排斥组的下降幅度较大;移植后30 d,自发耐受组受者的移植肝内CD4~ CD25~ Tr细胞比例达到第2次高峰,约在移植后90 d时下降至正常生理水平。移植后7 d左右,急性排斥组受者均因发生排斥反应而死亡,而自发耐受组受者均存活。此外,CD4~ CD25~ Tr细胞能有效抑制CD4~ CD25~-T细胞的增殖。结论CD4~ CD25~ Tr细胞是一种具有特异免疫调节功能的T细胞亚群,其主动的免疫抑制功能可能是诱导大鼠肝移植自发免疫耐受的机制之一。 相似文献
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2020年初始新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情爆发,国家经济和人民生活受到重创,临床试验行业深受影响,也给研究机构管理和试验项目实施带来前所未有的挑战。通过分析各大研究机构针对COVID-19防控要求下的应对措施,选取2020年1月23日至2020年4月8日,整理出本研究中心试验进展情况、处理方式、随访用药、脱落失访等情况,探讨疫情期间降低临床试验影响的可行性方法,旨在为今后探索临床试验的远程执行积累经验,为建立特殊时期临床试验应对策略提供参考依据。 相似文献
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目的:研究大鼠CD4 CD25 T调节细胞(Tr)的分离培养,并对其功能进行初步分析。方法:无菌条件下切取大鼠脾脏分离脾淋巴细胞。用免疫磁珠细胞分离系统(MACS)分选CD4 CD25 T细胞,并以流式细胞术检测其纯度后,对其进行扩增。采用混合淋巴细胞反应研究CD4 CD25 Tr细胞对CD4 CD25-T细胞的免疫抑制作用。用ELISA法检测培养上清中IL-2、IFN-γ及IL-10水平的差异。结果:MACS分离的CD4 CD25 T细胞的纯度达86%~93%。该细胞与CD4 CD25-T细胞相比能特异性地表达Foxp3基因。体外培养中能明显抑制效应T细胞增殖及其分泌IFN-γ、IL-2,但其自身能分泌Th2型细胞因子IL-10。结论:采用MACS系统阴性加阳性分选,可高效快速的获得理想纯度和免疫抑制功能的大鼠CD4 CD25 T调节细胞,该细胞对CD4 CD25-T细胞具有明显的免疫抑制作用,并能特异性的表达Foxp3基因。 相似文献
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导入FasL基因对荷肝癌裸鼠肿瘤增殖影响的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 对 PA 317/ Fas L - p L XSN在裸小鼠体内抗肿瘤作用及机理作进一步探讨。方法 制备 PA317/ p KXSN -Fas L +病毒上清及转 Fas L CBRH7919细胞株。 6 0只实验动物 ,随机分成 4组。收集处于对数生长期的 CBRH 7919肝癌细胞 ,A、C、D三组每只裸小鼠接种肝癌细胞于腋窝皮下。 A组 (对照组 ) :接种 5天后 ,在腋窝部肿瘤内注射生理盐水 ;B组 :接种Fas L - CBRH7919制备模型 ;C组 :实验方法同 A组 ,在腋窝部肿瘤内注射 PA 317/ p L XSN- Fas L +病毒上清 ;D组 :实验方法同 C组 ,在腋窝部肿瘤内注射 PA 317/ p L XSN空载体。肿瘤细胞接种后测量、计算肿瘤的体积 ;间接免疫荧光流式细胞仪(flowcytom eter,FCM)检测各组肿瘤组织 Fas L的表达情况。采用 PI- Annexin V方法 ,用 FCM检则各组肿瘤细胞凋亡情况。结果 观察时间为 2 0天 ,B、C组肿瘤生长受到明显抑制 ,但并未完全消退 ,且与对照组有显著差异 ;D组肿瘤生长与对照组无显著差异。 B、C组肿瘤组织中 Fas L表达显著高于 A、D组 (分别为 72 .3% ,6 8.6 % vs7.2 % ,11.3% ,P<0 .0 1) ;与此对应 ,B、C组肿瘤组织中细胞凋亡显著高于 A、D组 (分别为 30 .5 % ,31.3% vs 12 .1% ,19.4 ,P<0 .0 1)结论 采用逆转录病毒载体将Fas L基因导入裸小鼠肝癌组织 , 相似文献
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目的 探讨肝素结合的类表皮生长因子(heparin binding epidermal growth factor—like growth factor,HB-EGF)对大鼠减体积肝移植术后肝细胞再生的促进作用。方法 采用改良“二袖套法”建立大鼠原位减体积肝移植模型,分为实验组和对照组,术后即刻经尾静脉分别给予HB-EGF(500μg/kg)和相同体积的生理盐水,2次/d。2组分别在术后第6h、2d、4d及7d随机挑取5只大鼠处死,称取移植物湿重,采血检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)及白蛋白(Alb),流式细胞仪检测移植肝细胞的增殖活性,免疫组织化学法检测移植肝Ki-67的表达情况。结果术后第6h、2d和4d,实验组移植物湿重较对照组相应时相明显增加(P〈0.05);术后第6h、2d、4d和7d,实验组血清ALT水平较对照组相应时相明显降低(P〈0.05),而第4和7d时Alb水平较对照组相应时相明显增高(P〈0.05);术后第2和4d时,实验组的移植肝细胞增殖指数和Ki-67表达较对照组高(2d:P〈0.01;4d:P〈0.05)。结论 大鼠原位减体积肝移植术后使用HB-EGF能够明显促进移植肝细胞的再生。 相似文献
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放射线敏感性自杀基因体外杀伤肝癌细胞的实验研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的观察可被放射线转录激活的早期生长反应基因 1(earlygrowthresponse 1,Egr 1)启动子驱动的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因 (herpssimplexvirusthymidinekinase ,tk)对肝癌细胞的高效杀伤作用。方法构建以Egr 1为启动子 ,以tk为目的基因的重组质粒pET ,经脂质体介导转染人肝癌细胞株SMMC 772 1,命名为SMMC/ET细胞 ,经G418抗性筛选、60 Co γ射线照射后 ,加入前药丙氧鸟苷 (ganciclovirGCV) ,测定其对肝癌细胞的杀伤作用。结果与对照组肝癌细胞 ( 0 88± 0 12 )相比 ,经γ射线照射后 ,前药GCV可明显提高对SMMC/ET肝癌细胞的杀伤效率 ( 0 0 7± 0 0 3) (P <0 0 0 1)。结论放射敏感性自杀基因在γ射线作用下可以显著提高对肝癌细胞的杀伤作用。 相似文献
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目的 分析腹膜良性囊性间皮瘤的声像图特征.方法 回顾性分析8例经手术病理证实的腹膜良性囊性间皮瘤的声像图特征,并结合病理结果进行对照分析.结果 8例腹膜良性囊性间皮瘤超声均表现为单发的囊性或囊性为主包块,囊壁光滑,边界清晰,形态较规则,4例囊内可见带状中强回声分隔或密集点状回声,CDFI均未探及血流信号.结论 腹膜良性... 相似文献