养阴清热化瘀方对急性放射性肺炎大鼠TLR-4/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨养阴清热化瘀方对大鼠急性放射性肺炎的防护作用及可能机制。方法:采用随机数字表法将48只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组(NC)、模型组(MD)、养阴清热化瘀方提前干预组(YHF-EI)及养阴清热化瘀方组(YHF-ST),分别于照射后4周时采集血清及取出右肺。观察大鼠的一般情况,应用HE染色观察肺组织病理改变,ELISA法检测血清中含量, RT-PCR和Western-blotting法分别检测肺组织内TLR4、NF-κB p65 mRNA和蛋白的水平。结果:养阴清热化瘀方能显著减轻大鼠放射性肺炎的炎症表现;与空白对照组比较,血清中TNF-α、IL-6、TGF-β的含量升高,TLR4和NF-κB p65 mRNA转录活性增强,肺组织中TLR4和NF-κB p65的蛋白表达水平升高;与模型组比较,两组养阴清热化瘀方组血清中TNF-α、IL-6、TGF-β的含量降低,TLR4和NF-κB p65 mRNA转录活性下降,肺组织中TLR4和NF-κB p65的蛋白表达水平降低。结论:养阴清热化瘀方可能通过抑制"TLR4/NF-κB"信号通路,从而抑制TNF-α、IL-6、TGF-...     

基于络病理论对放射性肺损伤的理论探讨

放射线属于中医六淫中的火热毒邪,中医肺络概念包括西医解剖肺脏;肺络病是肺脏疾病一种病理状态,放射性肺损伤是一种特殊类型的肺络病,包括肺络自病和久病入络;放射性肺损伤是胸部肿瘤患者在放疗过程不可避免的一种毒副作用,同时加剧了肿瘤患者本身虚实夹杂的病机状态;放射性肺损伤的病理演变过程符合中医久病入络的病机概念。从络病理论出发,结合放射性肺损伤的病理生理特点,探讨络病理论指导治疗放射性肺损伤的可行性。     

3-甲基腺嘌呤增强食管鳞癌Eca-109细胞放射敏感性的研究

目的 研究自噬在照射致人食管鳞癌Eca-109细胞死亡过程中的作用。方法 选用食管鳞癌Eca-109细胞,分为对照组、5 mmol/L给药组、10 mmol/L给药组、单纯照射组、照射+5 mmol/L组、照射+10 mmol/L组,共6组。采用Western blot检测不同处理组自噬标志物LC3B表达水平;GFP-LC3转染食管鳞癌Eca-109细胞后监测自噬体数量变化;MTT法检测不同处理组细胞活力;荧光染料Hoechst 33342观察不同处理组细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测不同处理组细胞周期和细胞凋亡;克隆形成实验检测食管鳞癌Eca-109细胞不同处理组放射敏感性。结果 Western blot显示,照射后自噬水平升高,自噬抑制后LC3BⅡ和LC3BⅡ/LC3BⅠ比值明显下降(F=25.64,P<0.05);GFP-LC3转染食管鳞癌Eca-109细胞后,可见照射后自噬体荧光斑点明显增多,自噬抑制后自噬体明显减少(F=127.36,P<0.05);抑制自噬协同照射后细胞活力明显低于单纯照射组(F=129.54,P<0.05);抑制自噬后也增加了照射诱导的凋亡率和G₂/M期阻滞细胞比;线性二次模型拟合剂量存活曲线显示,抑制自噬能增加食管鳞癌Eca-109细胞的放射敏感性。结论 抑制自噬能提高食管鳞癌Eca-109细胞的放射敏感性,协同杀伤肿瘤细胞,提示抑制自噬或可用于辅助食管鳞癌的放射治疗。     

非小细胞肺癌组织促血管生成素-2及缺氧诱导因子-2α和血管内皮生长因子的表达及其临床意义

目的探讨促血管生成素-2(Ang-2)、缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)及血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学方法测定59例NSCLC和14例肺部良性病变病理切片中Ang-2、HIF-2α和VEGF的表达并计数微血管密度(MVD),分析其与患者的性别、年龄、病理类型、临床分期、分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移情况等临床病理参数的关系。结果 NCCLS组织中,Ang-2、HIF-2α和VEGF的表达率分别为52.5%、71.2%和76.3%,明显高于肺部良性病变组织(P<0.01),且三者两两之间在P=0.01水平上呈明显正相关,Ang-2与VEGF阳性表达组MVD明显高于阴性表达组(P=0.028,P=0.001),且在Ⅲ期NSCLC组织中,Ang-2和VEGF的阳性表达率高于Ⅰ期和Ⅱ期(P<0.05),HIF-2α和VEGF的阳性表达率淋巴结转移阳性组较阴性组高(P<0.05)。结论 Ang-2、HIF-2α和VEGF在NSCLC中均有高表达且与肺癌的新生血管形成有关,并可能影响NSCLC的生物学行为。     

端粒双靶点抑制对肺癌细胞A549衰老的影响

目的观察两种端粒相关的反义寡核苷酸对人肺腺癌细胞A549形态、功能、凋亡及细胞传代的影响。方法将培养的A549细胞随机分为空白对照组、端锚酶正义寡核苷酸对照组（sTANKS）、端粒酶催化亚单位正义寡核苷酸对照组（shTERT）、端锚酶反义寡核苷酸实验组（asTANKS）、端粒酶催化亚单位反义寡核苷酸实验组（ashTERT）、端锚酶及端粒酶催化亚单位反义寡核苷酸联合实验组（asTANKS+ ashTERT）,分别与不同的正、反义寡核苷酸作用,光学显微镜下观察细胞形态,细胞氚摄取率（[3H]-TdR）监测细胞利用合成DNA的胸腺嘧啶的能力,β-半乳糖苷酶（X-Gal）转染效率评估细胞衰老状态下的应激能量代谢,hoechst33342荧光染色检测A549细胞凋亡,通过传代实验分析细胞寿命。结果联合作用的两种反义寡核苷酸（ashTERT+asTANKS）能明显诱导A549细胞的衰老及凋亡,抑制DNA合成的含氚的胸腺嘧啶的摄取,增加细胞衰老状态的β-半乳糖苷酶（X-Gal）转染效率;并使A549细胞平均寿命明显缩短,在经过（24.53±0.40）次倍增后发生传代终止,与单独作用的asTANKS或 ashTERT相比均有明显的差异。结论两种针对端粒的反义寡核苷酸的联合作用,使A549细胞从形态及功能上倾向于衰老、“去永生化”,有可能成为新的抗肿瘤药物靶点。     

胃癌组织NPM表达及对胃癌患者预后的预测价值

【摘要】 目的 探讨胃癌组织中核磷蛋白（NPM）的表达与各临床病理因素的关系,评估其在胃癌侵袭转移过程中的作用及预测胃癌患者预后的价值。方法 采用免疫组化法检测胃癌和癌旁组织中NPM的表达情况,并评估NPM表达与临床病理因素之间的关系。用Kaplan Meier法及单因素和多因素分析来评估胃癌患者的术后生存率。结果 胃癌组织中NPM阳性表达率为659%（54/82例）,与癌旁组织中的阳性表达率(194%)比较差异有显著性（P＜0001）;NPM阳性表达率与Lauren’s分型（P=0.025）、淋巴结转移(P=0.001)、浸润深度（P=0.010）、临床分期（P=0.033）及复发（P=0.006）等显著相关。 胃癌患者的生存分析显示,NPM阴性组和阳性表达组生存率之间差异有显著性（P=0.021）。结论 NPM 高表达与胃癌的浸润和转移密切相关,可以作为预测胃癌预后的一个生物学指标。     

水蛭抑制肿瘤血管生成的作用及其机制

目的 探讨水蛭能否通过改善肿瘤细胞缺氧微环境来抑制肿瘤血管生成及其相关机制.方法 以氯化钴模拟化学缺氧,采用MTT法观察水蛭含药血清对EA.hy926细胞的增殖抑制作用;采用RTPCR法检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA、血管内皮生长因子(VEGF) mRNA的表达;Western blot法检测HIF-1α蛋白水平;Matrigel基质胶模拟体外小管形成实验检测小管生成情况.结果 在缺氧条件下,水蛭含药血清能抑制EA.hy926细胞的增殖,且呈时间和剂量依耐性.水蛭含药血清在低氧时可显著抑制HIF-1α mRNA、VEGF mRNA的表达和HIF-1α蛋白水平,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);水蛭高剂量组和阳性对照组HIF 1α mRNA表达及其蛋白表达水平相当(P＞0.05),而VEGF mRNA在高剂量水蛭作用后的表达更少(P＜0.05).小管形成实验中,水蛭含药血清作用后小管数目与阴性对照组相比明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05),与阳性对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 水蛭能通过改善肿瘤缺氧微环境抑制肿瘤血管生成来发挥抗肿瘤作用,其机制可能是通过降低HIF-1α蛋白水平和mRNA的表达,以及降低由HIF-1α所介导的靶基因VEGF mRNA的表达来实现的.     

当归补血汤对急性放射性肺损伤大鼠NF-κB和ET-1的影响

目的:探讨当归补血汤对大鼠急性放射性肺损伤的防护作用及可能机制。方法:将50只Wistar大鼠随机分为空白对照组(NC)、模型组(Model)、当归补血汤低剂量组(DBT-L)、当归补血汤中剂量组(DBT-M)和当归补血汤高剂量组(DBT-H);分别于照射后28 d时采集血清和取出右肺。照射后观察大鼠的一般情况,应用HE染色观察肺组织病理改变,ELISA法检测血清中NF-κB和ET-1含量,RT-PCR和Western-blotting法分别检测肺组织内NF-κBp65和ET-1 mRNA和蛋白表达水平。结果:当归补血汤能显著减轻大鼠急性放射性肺损伤的炎症表现;与正常组比较,血清中NF-κBp65和ET-1的含量升高(P 0. 05),NF-κBp65和ET-1mRNA转录活性增强(P 0. 05),肺组织中NF-κBp65和ET-1的蛋白表达水平升高(P 0. 05);与模型组比较,当归补血汤中剂量组和高剂量组血清中NF-κBp65和ET-1的含量降低(P 0. 05),NF-κBp65和ET-1mRNA转录活性下降(P 0. 05),肺组织中NF-κBp65和ET-1的蛋白表达水平降低(P 0. 05)。结论:当归补血汤可能通过抑制急性放射性肺损伤大鼠肺脏NF-κBp65和ET-1的表达及活性而发挥放射防护作用。