MTT法和CCK-8法检测悬浮细胞增殖的比较

在细胞学实验中,MTT比色法和1H-TDR掺入法常用于细胞毒性、细胞活性和细胞增殖的检测。因MTT法具有简便、经济、安全等特点,而被广泛使用,但其操作较繁琐,需加入DMSO溶解甲躜颗粒,且往往因溶解不全而对实验结果造成影响;而。H-TDR掺入法虽然灵敏度高、特异性强、稳定性好,但由于操作步骤多、存在放射性危害等限制了其使用。近年来,国外研发出了一种新型的检测方法CCK-8（cell counting kit-8）,其原理为活细胞线粒体脱氢酶转化的黄色结晶为高度水溶性,不需要裂解细胞,可直接进行比色。该法步骤简便,且准确性得到提高。     

靶向B淋巴细胞的治疗策略

在一些自身免疫性疾病和B细胞淋巴瘤中,B淋巴细胞（简称B细胞）表现为异常活化或恶性增殖。靶向B细胞的免疫治疗包括直接治疗策略和间接治疗策略。直接治疗策略采用抗CD20抗体、抗CD22抗体等与B细胞特异性结合,诱导B细胞凋亡或通过抗体的Fc段介导的抗体依赖的细胞毒作用、补体依赖的细胞毒作用发挥直接的清除作用。间接治疗策略通过干扰其他免疫细胞（如T细胞）与B细胞的作用,阻断B细胞活化所需的第二信号;或者靶向一些能促进B细胞活化、增殖、分化的因子,通过拮抗这些因子的功能间接影响B细胞的功能。本文将简要介绍B细胞靶向治疗策略。     

新型免疫抑制剂芬戈莫德的研究进展

芬戈莫德(fingolimod,FTY720)是冬虫夏草中提取的有效成分多球壳菌素(myriocin,ISP-1)通过结构改造而合成的一种新型免疫抑制剂。与传统的免疫抑制剂不同,它不影响淋巴细胞的活化和增殖,主要作用于细胞表面的鞘氨醇-1-磷酸受体(S1PR)来发挥免疫抑制和免疫调控作用。本文介绍FTY720对T、B淋巴细胞和天然免疫细胞(树突状细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞、自然杀伤性T细胞)的分布和细胞因子产生的影响,探讨FTY720对炎症的免疫抑制和免疫调控作用;对FTY720在自身免疫病、移植物抗宿主病和肿瘤治疗等方面的研究进展,FTY720的副作用及可能的解决方案做了简要总结。     

一种表现为皮肤胶原沉着病的小鼠慢性移植排斥模型的建立

目的建立一种小鼠慢性移植排斥模型。方法将6～8周龄BALB／c（雌性）小鼠经6Gy”Co全身照射后随机分为同基因移植组和异基因移植组。并基因组尾静脉输注未经照射的BIO．D2（雄性）小鼠的骨髓细胞和脾细胞的混合悬液。移植术后通过小鼠性染色体基因组检测、组织病理学分析,以及流式细胞仪和实时定量PCR检测确定小鼠病变的发生。结果病理学分析显示,异基因组小鼠主要表现为皮肤损伤,与同基因组相比,皮肤明显增厚,皮肤弹性降低,真皮层炎性细胞浸润,毛囊和脂肪减少或消失,大量的纤维组织增生,皮下组织出现明显结构改变;性染色体基因组分析显示,畀基因组受者小鼠皮肤内有供者小鼠细胞的浸润;流式结果显示,畀基因组小鼠皮肤内CDllb、CIM5和CD3表达明显增强;实时定量PCR检测结果显示,异基因组小鼠皮肤RANTES、TGF．8,以及胶原蛋白ImRNA水平明显升高。结论与同基因组小鼠相比,异基因组小鼠表现为皮肤胶原沉着病损伤;CDllb’、CD45’和CD3’细胞以及趋化因子RANTES和细胞因子TGF—p】参与了这一病理过程的发生。本研究建立了一种表现为皮肤胶原沉着病的小鼠慢性移植排斥反应模型,为相关后续研究提供了有益的基础。     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子对结肠癌肝转移的促进作用及其可能机制

目的：探讨粒细胞-巨噬细胞集落因子（granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF）对结肠癌肝转移的促进作用及其可能机制。方法：采用稳定转染方法将GM-CSF 基因以及靶向GM-CSF 的shRNA 分别导入人结肠癌细胞系HCT116 和SW480,用ELISA法检测GM-CSF表达水平。脾内注射结肠癌细胞建立结肠癌肝转移模型,部分模型小鼠隔天腹腔注射不同剂量（3、0.6 μg）的重组人GM-CSF。模型建立后4 周后观察肝大体及肿瘤转移灶,实时荧光定量PCR检测神经钙黏素（Ncadherin）和基质金属蛋白酶2（matrix metalloproteinase 2,MMP2）的表达,Western blotting 检测上皮钙黏素（E-cadherin）的表达。结果：根据GM-CSF表达量建立GM-CSF低、中、高表达细胞系（GMlo、GMint、GMhiHCT116）和GMKDSW480 细胞系。大体和病理结果均显示,接种高表达GM-CSF的HCT116 细胞或外源性给予GM-CSF明显增加小鼠结肠癌肝转移灶数量,而敲低GM-CSF的作用则相反。GM-CSF能够显著上调N-cadherin 和MMP2 的表达,同时下调E-cadherin 的表达（P<0.05）。结论：GM-CSF能够促进结肠癌移植瘤的肝转移,该效应可能与E-cadherin表达的下调和N-cadherin以及MMP2表达的上调有关。     

FTY720介导的淋巴细胞归巢作用对外周淋巴细胞的影响

FTY720是由ISP-I衍生而来的一类新型免疫抑制剂。近年来的研究显示，FTY720在器官移植排斥以及自身免疫性疾病的一系列模型中显示出良好的治疗效果。研究表明，FTY720主要通过减少外周淋巴细胞数目发挥免疫抑制作用，但其具体作用机制仍存在争议。一部分观点认为FTY720是通过诱导外周淋巴细胞发生凋亡而引起白细胞数急剧下降；另一部分观点则认为FTY720是通过阻断淋巴细胞外流，即将淋巴细胞阻断在次级淋巴组织中，从而阻止活化的淋巴细胞迁移至移植器官或炎症组织部位，达到免疫抑制作用。本研究通过流式细胞技术以及荧光染料标记细胞跟踪技术证实：FTY720主要是通过促进外周循环中的淋巴细胞归巢而发挥其免疫抑制作用。     

黄病毒治疗性抗体效应优化的研究进展

黄病毒属病毒是一类主要通过节肢动物媒介传播的正链RNA病毒, 在世界范围内可引起高死亡率和高发病率。目前, 尚无特效疗法。黄病毒治疗性抗体为治疗黄病毒感染带来了希望, 但与此同时, 通过感染而引发的抗体依赖性增强(antibody-dependent enhancement, ADE)效应可导致黄病毒感染患者疾病恶化。理想的黄病毒治疗性抗体既能治疗黄病毒感染, 又可以避免ADE带来的危害。因此, 研究者们将已发现的一些抗体进行优化以寻求最佳治疗抗体。本综述简单阐述了黄病毒治疗性抗体的研究进展、作用机制, 以及降低ADE效应的相关策略。     

化学诱导二聚化模型FKBP12-CID的应用

细胞通过许多信号途径调控自身的生长和分化。受体是细胞所具有的一种非常重要的信号分子,它通过与其相应的配体识别结合,诱导激活相关的信号通路,最终导致一系列生物学效应的发生。其中,受体二聚化是包括红细胞生成素、粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、凝血素、泌乳刺激素、肿瘤坏死因子等在内的许多细胞因子传递信号的关键步骤。目前,许多研究者利用FK506结合蛋白12-二聚化化学诱导子（FK506 binding protein 12-chemical inducers of dimerizations,FKBP12-CID）系统诱导受体二聚化,起始信号的传递。另外, FKBP12-CID系统还可介导不同蛋白质分子之间的缔合,通过蛋白质与蛋白质之间的相互作用调控细胞的增殖、分化及代谢。这种化学诱导二聚化的模型已被广泛用于细胞生物学的研究,并有望在临床上用于基因及细胞治疗。     

两种小鼠一次性灌胃器性能比较

随着科学技术的发展,动物实验已成为实验研究中不可缺少的部分,在实验中往往需对实验动物进行长期定量给药。由于灌胃给药方法简便、给药时间易于掌握,因此成为一种比较理想的长期给药途径。本文就2种灌胃器的使用进行了比较。