Irf5对肌萎缩侧索硬化细胞模型的毒性作用

目的 观察干扰素调节因子5 (interferon-regulatory factor 5,Irf5)对肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS),TDP-25细胞模型的影响。方法 利用慢病毒感染的方法,建立过表达Irf5的TDP-25稳转细胞株,在基因及蛋白水平鉴定其表达效率,倒置显微镜下观察细胞的形态学变化,通过实时荧光定量PCR方法比较过表达Irf5后对TDP-25细胞的影响,包括细胞凋亡、细胞周期以及炎症因子的产生。结果 过表达Irf5后,与细胞凋亡有关的指标Caspase-3、Caspase-8和Bak1都较对照组有所增加。细胞周期调控蛋白,P21的表达增加。炎症因子包括肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-12p40(IL-12p40)的表达都有所增加,与对照组相比,差异有统计学意义。结论 Irf5促进TDP-25细胞的凋亡、细胞周期阻滞,以及产生促炎细胞因子,加速了细胞的死亡。     

浅谈急诊科实习护生的带教体会

<正>临床实习对于护理专业的学生非常关键,能够将课堂理论学习和今后临床实习有机联系起来。而急诊科又是一个特殊的科室,无论是带教的老师还是实习护生都会面临各种问题和挑战。急诊科是医院的前沿,是抢救急危重患者的重要场所。     

颅内外高流量分流联合颈内动脉结扎术治疗的巨大症状性颈内动脉海绵窦段动脉瘤

目的 探讨颅内外高流量分流联合颈内动脉结扎术治疗巨大症状性颈内动脉海绵窦段动脉瘤的临床疗效.方法 回顾性分析2015年5月至2020年5月运用颅内外高流量分流联合颈内动脉结扎术治疗的4例颈内动脉海绵窦段巨大动脉瘤的临床资料.结果 术后症状明显改善.出院后随访1～4年,4例GOS评分均为5分.术后1年复查颅脑CT和CTA...     

可溶性白细胞分化抗原40配体原核表达载体的构建与鉴定

目的构建原核表达载体pGEX4T含人可溶性白细胞分化抗原40配体(soluble cluster of differentiation antigen 40 ligand,sCD40L)重组质粒。方法通过反转录 聚合酶链反应扩增,获得人sCD40L的基因片段;将其连接入T载体,用5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷与异丙基-β-D-硫代半乳糖苷筛选阳性克隆,鉴定正确后经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,再与pGEX-4T原核表达载体连接,最后经酶切及测序鉴定。结果以L02细胞的互补DNA为模板,扩增出474 bp的目的基因;将目的片段与T载体连接并进行蓝白筛选得到阳性克隆;构建pGEX-4T-sCD40L重组质粒,经转化和筛选获得重组菌,经酶切、基因测序证实序列正确。结论成功构建pGEX-4T-sCD40L原核表达载体,为进一步探讨sCD40L在肝癌诊断中的作用奠定基础。     

氧化钕:分布特征及毒理学研究进展

氧化钕是最重要的稀土氧化物,随着使用量日益增多,其可能产生的毒性已经引起了人们的关注。本文介绍了氧化钕的体内代谢过程、体内外毒性作用以及可能作用机制等的研究进展,提出了现阶段研究的不足,并对今后氧化钕的毒性研究进行了展望。     

TBK1在高级别脑胶质瘤髓样细胞中的表达特征

目的 探讨TANK结合激酶1 (TBK1)在高级别脑胶质瘤髓样细胞中的表达特征。方法选取2019年4月至2021年2月就诊于河北医科大学第二医院的27例WHO分级标准为高级别胶质瘤患者作为研究对象,采用磁珠分选的方法检测胶质瘤瘤旁和肿瘤组织中整合素αM (CD11b)阳性髓样细胞中TBK1的表达,免疫荧光染色观察肿瘤微环境巨噬细胞中磷酸化TBK1 (p-TBK1)的表达,并通过流式细胞分析患者术前1d、术后10～14 d外周血经典单核细胞中p-TBK1的表达变化。结果 高级别胶质瘤肿瘤组织CD11b阳性细胞中TBK1总蛋白表达水平较瘤旁组织明显增多(P=0.006);高级别胶质瘤肿瘤组织中p-TBK1蛋白水平较瘤旁明显升高,且p-TBK1的表达与CD68阳性巨噬细胞有共定位;高级别胶质瘤患者术后外周血经典单核细胞中p-TBK1表达较术前明显降低(P=0.001)。结论 TBK1在高级别胶质瘤微环境髓样细胞中高表达,提示髓样细胞TBK1在胶质瘤的发展中可能起着关键调控作用。     

p53凋亡刺激蛋白2在HepG2215细胞中通过抑制自噬来发挥抗乙型肝炎病毒的作用

目的 研究p53凋亡刺激蛋白2(apoptosis stimulating protein 2 of p53,ASPP2)对乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）和乙型肝炎E抗原（hepatitis Be antigen,HBeAg）表达的影响。方法 HepG2.215细胞用3-甲基腺嘌呤处理来抑制自噬,或用人ASPP2重组腺病毒感染来诱导ASPP2过表达,或转染GFP-LC3质粒后观察绿色LC3-Ⅱ颗粒（自噬标志物）的变化。酶联免疫吸附测定检测培养上清和胞内HBsAg和HBeAg的水平、免疫荧光检测LC3-Ⅱ颗粒的水平、免疫印记检测自噬相关蛋白的水平、免疫沉淀检测ASPP2与自噬相关蛋白的结合。结果 ASPP2过表达明显下调了绿色LC3-Ⅱ颗粒的水平和LC3-Ⅱ/Ⅰ比例、以及明显上调p62的水平,说明ASPP2过表达可抑制HepG2.215细胞的自噬。但是ASPP2并非通过抑制Atg5、Atg14和Beclin-1等自噬相关基因的表达来抑制自噬,而是通过与Atg14结合来抑制Atg14与Beclin-1的结合,阻断自噬体膜的形成,从而抑制自噬。抑制自噬和ASPP2过表达均导致培养上清和细胞内的HBsAg和HBeAg水平明显下调,表明在Hep2.215中,ASPP2通过抑制自噬来抑制HBsAg和HBeAg的产生。结论 ASPP2通过抑制自噬的作用具有抗乙型肝炎病毒感染的潜力。     

纳米氧化铈对过氧化氢所致大鼠肺泡巨噬细胞氧化损伤的影响

目的研究纳米氧化铈对过氧化氢致大鼠肺泡巨噬细胞NR8383氧化损伤的影响。方法将对数生长期的NR8383细胞分别暴露于终浓度为5、10、20、50、100μg/ml纳米氧化铈(20 nm)悬液孵育24 h,再加入新鲜配制的终浓度为100μmol/L的过氧化氢刺激细胞2 h,另设对照(PBS)组及过氧化氢(100μmol/L)组。采用CCK-8法检测NR8383细胞的细胞活性,采用酶标法检测培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量,并测定细胞内谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)的水平。结果与对照组相比,过氧化氢对NR8383细胞造成氧化损伤,细胞的存活率下降25.25%。与过氧化氢组相比,5μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的存活率较高,而100μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的存活率较低,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);且随着纳米氧化铈染毒浓度的升高,NR8383细胞的存活率呈下降的趋势。与过氧化氢组相比,对照组NR8383细胞的LDH释放量较低,50μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的LDH释放量较高,差异有统计学意义(P0.05);而5、10μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞的LDH释放量有所降低,但差异均无统计学意义(P0.05)。且随着纳米氧化铈染毒浓度的升高,NR8383细胞的LDH释放量呈上下波动。与过氧化氢组相比,对照组NR8383细胞内GSH的水平升高,而ROS的水平上升;5、10μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞内的ROS水平均下降,而10μg/ml纳米氧化铈+过氧化氢组NR8383细胞内的GSH水平上升,差异均有统计学意义(P0.05)。随着纳米氧化铈染毒浓度的升高,NR8383细胞内的SOD、GSH呈上下波动,ROS的水平呈逐渐升高的趋势。结论低浓度(5、10μg/ml)的纳米氧化铈颗粒可以缓解过氧化氢对NR8383细胞造成的氧化损伤,对细胞起到保护作用。     

单孔腹腔镜与传统多孔腹腔镜胆囊切除术疗效对比荟萃分析

目的 对单孔腹腔镜胆囊切除术(single-incision laparoscopic cholecystectomy,SILC)与传统腔镜胆囊切除术(conventionallaparoscopic cholecystectomy,CLC)疗效进行系统评价.方法 检索2010年1月至2015年1月Medline(Ovid SP),PubMed,Embase,Science Citation Index,Cochrane Central Register of Controlled Trials等外文数据库以及中国生物医学文献数据库.按照纳入排除标准筛选符合标准的文献,Cochrane风险评估偏倚工具进行文献质量评价.使用Review Manager 5.2对术中出血量、术后疼痛评分、外观满意度评分、手术时间、术后住院时间、正常活动恢复时间及不良事件发生率等指标进行荟萃分析.结果 本研究共纳入12项随机对照试验,1022例(SILC 534例;CLC 488例)胆囊疾病患者.SILC在术后6～8h疼痛、患者外观满意度方面显著优于CLC (P=0.001;P＜0.00001),差异有显著性意义.与CLC相比,SILC手术时间相对较长(P=0.002),差异有显著性意义.SILC与CLC在术中出血、不良事件发生率、术后住院时间、正常活动恢复时间方面无差异.结论 SILC提供与CLC相当的安全性和有效性,且具有更好的微创、美观和术后疼痛减轻等特点,值得临床应用.     

纳米氧化钕致小鼠中枢神经系统毒性效应

目的探讨纳米氧化钕染毒对小鼠中枢神经系统的毒性效应。方法无特定病原级雌性ICR小鼠随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,每组12只。采用滴鼻染毒法,低和高剂量组小鼠分别予剂量为80、160 mg/(kg·d)体质量的纳米氧化钕染毒,对照组予等体积0.9%氯化钠溶液,连续染毒30 d。采用水迷宫实验和跳台实验检测小鼠的空间学习和记忆能力,取大脑海马作苏木素-伊红(HE)染色和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化染色,采用酶标仪检测脑组织中丙二醛(MDA)水平和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力。结果与对照组比较,低和高剂量组小鼠的逃避潜伏期均延长(P0.05),跳台潜伏期均缩短(P0.05)。各组小鼠大脑海马HE染色均未见明显的病理改变。免疫组化染色结果显示,低、高剂量组小鼠海马星形胶质细胞GFAP蛋白表达均较对照组增加,以高剂量组增加更明显。与对照组比较,低和高剂量组小鼠脑组织中MDA水平均升高(P0.05),SOD水平均下降(P0.05)。结论纳米氧化钕滴鼻染毒可降低小鼠的学习记忆能力,并可导致海马星形胶质细胞GFAP表达增加,其机制可能与氧化应激有关。