寻常型银屑病血清蛋白质组学研究中双向凝胶电泳-质谱技术的初步建立

目的：建立寻常型银屑病血清蛋白组学研究中双向凝胶电泳-质谱技术的实验方法与优化条件。方法：应用ProteoExtract Albumin/IgG Removal Kit纯化血清蛋白,去除白蛋白和IgG,采用固相pH梯度（IPG）、等电聚焦（IEF）为第一向、SDS-PAGE垂直电泳为第二向的双向凝胶电泳（two-dimen-sional gel electrophoresis简称2-DE）和质谱分析评价血清蛋白纯化效果。同时对标本预处理、水化、等电聚焦、SDS-PAGE等步骤进行了优化。结果：采用优化的双向凝胶电泳技术获得了重复性良好的图谱结果,2-DE图谱中分子量在20-55kDa以及pH在4-7区域之间的蛋白点分离效果较好。结论：采用优化后的双向凝胶电泳-质谱技术能够进行寻常型银屑病血清蛋白组学研究。     

脉冲染料激光联合CO_2点阵激光治疗术后瘢痕的临床观察

目的:观察585 nm脉冲染料激光联合CO_2点阵激光治疗术后瘢痕的临床疗效和不良反应。方法:使用585 nm脉冲染料激光和CO_2点阵激光对22例手术后增生性瘢痕患者进行治疗。手术后4周采用585nm脉冲染料激光能量密度如4.0～5.5 J/cm2,10.0 mm光斑和7.0～8.0 J/cm2,7 mm光斑,脉宽0.45～2 ms进行治疗;术后6周采用超脉冲CO_2(Syneron-Candela CO_2RE)进行治疗,根据瘢痕厚度选用消融模式或激光打孔技术。消融模式采用30%的点阵覆盖率,能量密度50～70 m J/cm2,光斑直径10 mm,脉宽10 ms,激光打孔点-点间距约4 mm;共治疗2～4次,间隔时间4周。结果:22例瘢痕患者中有21例瘢痕均较治疗前有显著改变,治疗总满意率达95%,平均疼痛评分为7.2,1例PIH(炎症后色素沉着),无起泡、烧伤或其他不良反应。结论:585 nm脉冲染料激光联合CO_2点阵激光是目前比较安全、高效的瘢痕治疗方法。     

中药烧伤油对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的作用

目的:探讨中药烧伤油对大鼠深Ⅱ度烫伤创面愈合的影响.方法:制备深Ⅱ度大鼠背部皮肤圆形创面,直径2.5cm,共3个,行同体对照实验.分别外用烧伤油,磺胺嘧啶锌软膏和基质软膏,1次/d.观察创面愈合情况,留取不同时相的创面组织,进行组织病理学检查,创面羟脯氨酸含量检测,ELISA法测定创面Ⅰ/Ⅲ型胶原比例和流式细胞仪测定创面真皮成纤维细胞周期.结果:外用烧伤油使创面肿胀和渗出减轻,无感染迹象及创面愈合时间缩短.病理形态学观察发现烧伤油组创面的局部组织炎症反应较轻,愈后表皮各层分化良好.羟脯氨酸和Ⅰ/Ⅲ型胶原测定显示烧伤油能促进创面胶原增生,减轻瘢痕增生.创面真皮成纤维细胞周期提示烧伤油能促进真皮成纤维细胞增殖.结论:中药烧伤油对大鼠深Ⅱ度烫伤创面具有保护和促进愈合的作用.     

负压吸引预防兔挤压综合征

目的 制作挤压综合征模型以探讨负压吸引对挤压综合征的预防作用. 方法 24只新西兰白兔按随机数字表法分为对照组、传统治疗组、负压治疗组、传统加负压治疗组,每组6只,于挤压前和解压后6,12,24,48,72 h检测血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、血钾(K)、肌酸激酶(CK)及肌红蛋白(Myo).检测局部肢体水肿程度和痛觉丧失程度,光镜下观察肾脏和肌肉组织的变化情况. 结果 各治疗组随时间的推移K、Myo无明显上升,BUN和CR未见明显增高,未发生肾功能衰竭.对照组在解压后6hK、Myo、BUN、Cr含量从挤压前的(4.61-0.98) mmol/L、(4.22-0.93) ng/ml、(7.76±1.40) mmol/L、(101.32±9.35) μmol/L分别增加至(7.88±1.95) mmol/L、(11.34±3.86) ng/ml、(15.91±1.76) mmol/L、(258.32 ±91.40) μmol/L,与各治疗组比较差异有统计学意义(P＜0.05),发生了肾功能衰竭.负压治疗组和传统加负压治疗组组织水肿程度和痛觉丧失程度较传统治疗组低.光镜下见各治疗组肾脏损伤程度较对照组低,局部肌肉损伤各组之间无明显差别. 结论 负压吸引可以预防挤压综合征的发生.     

不同时期产前应激对子代大鼠学习和记忆能力的影响

目的　观察产前应激对子代大鼠空间学习记忆能力的影响。方法　实验采取产前束缚应激模型。中、晚期应激组分别给予束缚应激。雌、雄动物各 8只 ,进行Morris水迷宫定位航行试验和空间搜索试验。结果　①中、晚期产前应激组子代与正常组相比到达平台的潜伏期延长 (P <0 .0 5 ) ;晚期产前应激组雌性子代到达平台的潜伏期较对照组长 ,同时较晚期应激组雄性也有所延长 (P <0 .0 5 )。②空间探索试验 ,中、晚期产前应激组子代在原平台所在象限停留时间较对照组短 ,但无统计学意义。结论　产前应激可引起子代学习能力的改变 ,尤其是对晚期产前应激组雌性后代更为显著。     

血清蛋白组学技术筛选寻常性银屑病相关蛋白的初步研究

目的初步探讨应用血清蛋白组学技术建立寻常性银屑病相关蛋白的优化筛选方法,筛选寻常性银屑病的相关蛋白,期望从中发现有意义的寻常性银屑病血清标志物。方法取寻常性银屑病患者及正常对照血清,应用ProteoExtract Albumin/IgG Removal Kit纯化血清蛋白,去除白蛋白和IgG,采用固相pH梯度(IPG)、等电聚焦(IEF)为第一向、SDS-PAGE垂自电泳为第二向的双向凝胶电泳(2-DE)和质谱分析鉴定差异蛋白。结果获得重复性和分辨率较好的血清双向凝胶电泳图谱,鉴定得到3个仅在银屑病组血清中表达和9个与对照组血清表达有差异的蛋白质。结论在寻常性银屑病患者血清与健康人血清中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学这一高通量的筛查技术可望从中发现与寻常性银屑病相关的标志物。     

在中国人先天性厚甲症Ⅰ型患者中检测出两种KRT6A基因突变

目的 分别研究一个先天性厚甲症Ⅰ型家系和一个散发患者基因突变,探讨基因型与表型的相关性.方法 研究对象包括6例先天性厚甲症Ⅰ型患者,其中包括家系中5例患者和1例散发病例,同时取家系中1名正常人及与该家系无关的100名正常人作为正常对照排除多态性,采用长链PCR特异扩增了外周血基因组DNA的KRT16和KRT6A两个候选致病基因全长,PCR产物直接测序检测突变.结果 家系和散发病例的KRT16基因均未发现基因突变.而两者的KRT6A基因分别出现了突变:家系中5例患者的第465位密码子由TAC突变为CAC,导致酪氨酸由组氨酸替代(Y465H);散发患者KRT6A基因第171位密码子由AAC突变为GAC,导致天门冬酰胺由天门冬氨酸替代(N171D),而该家系中的1名正常人及与该家系无关的100名正常人的DNA测序结果未发现此突变.Y465H和N171D分别位于2B的终末端和1A的起始部这两个突变热点.结论 该家系和散发病例分别存在KRT6A基因突变Y465H和N171D,其中前者为一新的错义突变,N171D近期已有文献报道.该突变可能为先天性厚甲症Ⅰ型的遗传病因.     

不同时期产前应激对子代大鼠学习和记忆能力的影响

目的观察产前应激对子代大鼠空间学习记忆能力的影响.方法实验采取产前束缚应激模型.中、晚期应激组分别给予束缚应激.雌、雄动物各8只,进行Morris水迷宫定位航行试验和空间搜索试验.结果①中、晚期产前应激组子代与正常组相比到达平台的潜伏期延长(P<0.05);晚期产前应激组雌性子代到达平台的潜伏期较对照组长,同时较晚期应激组雄性也有所延长(P<0.05).②空间探索试验,中、晚期产前应激组子代在原平台所在象限停留时间较对照组短,但无统计学意义.结论产前应激可引起子代学习能力的改变,尤其是对晚期产前应激组雌性后代更为显著.     

全细胞记录急性分离海马锥体神经元电压门控通道电流

背景:海马是涉及学习、记忆的重要脑区,已有研究者描述了急性分离海马神经元的方法。但这些方法需要多种酶联合使用、分离过程复杂。目的:建立一种适用于膜片钳研究,简单、快速地分离海马神经元的方法。设计:动物实验观察。单位:西安交通大学医学院生理与病理生理学系。材料:实验于2004-03/10在西安交通大学医学院医学实验中心完成。实验动物选用出生10～15d的Sprague-Dawley大鼠,性别不限。方法:急性分离海马神经元;应用全细胞记录模式记录延迟整流钾电流以及电压门控钙电流。主要观察指标:观察急性分离海马神经元的形态;记录海马神经元延迟整流钾电流、电压门控钙电流。结果:①倒置显微镜观察急性分离的神经元具有光滑、透亮的表面,胞体呈锥体性,有一个较长的顶树突和几个基树突。②分离过程未破坏其电生理特性,钳制电压-90mV,给予时程200ms,阶跃10mV,由-70～ 20mV去极化脉冲刺激激活钙电流得到电压门控钙电流。钳制电压-80mV,给予-50mV时程50ms去极化预刺激失活瞬时外向钾电流,再给予时程200ms,阶跃10mV,由-60mV至 50mV去极化脉冲刺激激活钾电流,得到延迟整流钾电流。结论:本方法分离的神经元,适合应用膜片钳技术进行离子通道研究。     

医学美容摄影浅谈

本文从医学美容摄影的作用和特点出发,通过医学美容摄影的要求、摄影室的建立、工作制度与工作流程、技术要求四个方面阐述了医学美容摄影的相关问题,着重强调为了使治疗前后的照片具有可比性,在拍摄过程中必须做到各种拍摄条件的一致性。