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体外诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞的定向分化及其鉴定 总被引:3,自引:2,他引:3
目的: 体外诱导骨髓间充质干细胞(MSC)向软骨细胞定向分化, 并对分化后的细胞进行鉴定。方法: 由健康成人骨髓中分离出MSC, 取第 3代细胞进行实验。鉴定后, 将微小细胞团在TGF -β1、地塞米松(Dex)及维生素C(VitC)等诱导下分化。14d后, 细胞团经石蜡包埋、切片及HE染色后, 进行甲苯胺蓝染色及II型胶原(ColII)的免疫组化染色。采用Westernblot和RT- PCR, 分别检测诱导前后MSC中ColII及前ColIImRNA的表达。结果: HE染色显示, 诱导后细胞呈软骨细胞样形态; 甲苯胺蓝及ColII染色的细胞外基质呈阳性。Westernblot和RT PCR的结果显示, 诱导分化后的MSC可表达ColII和前ColII的mRNA。结论: MSC在TGF- β1、Dex及VitC等诱导后, 可分化为软骨细胞。 相似文献
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CD147分子和基质金属蛋白酶在类风湿关节炎滑膜中的表达 总被引:7,自引:4,他引:7
目的 探讨类风湿关节炎(RA)滑膜组织CD147的表达及其与基质金属蛋白酶(MMP)-01和MMP-2表达的相关性。方法 采用免疫组织化学SP(streptavidin/peroxidase)染色方法检测11例RA患者受损关节软骨-血管翳接合部(CPJ)滑膜组织中CD147和MMP-1及MMP-2的表达,并与3例骨关节炎(OA)患者滑膜组织CD147和MMP-1及MMP-2的检测相对照。结果 3例OA滑膜组织CD147和MMP-1及MMP-2的表达均为阴性,而11例RA滑膜组织中均有CD147和MMP-1及MMP-2的表达。其中,表达CD147的细胞为单核-巨噬细胞、淋巴细胞和滑膜成纤维样细胞,表达MMP-1及MMP-2的细胞为滑膜成纤维样细胞。统计学分析表明RA滑膜细胞CD147的表达和MMP-1及MMP-2的表达间存在显著相关性。结论 CD147在RA滑膜组织中表达增高,可能是导敏RA受损关节软骨、骨基质降解的重要因素之一。 相似文献
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类风湿关节炎滑膜侵蚀软骨SCID鼠模型的建立及初步实验研究 总被引:3,自引:2,他引:3
目的建立类风湿关节炎(RA)-SCID小鼠模型,观察滑膜对软骨的侵蚀情况,为探讨RA滑膜侵蚀软骨机制及治疗奠定基础。方法70只SCID小鼠,3~6周龄。无菌获得12例非关节炎患者正常关节软骨,修剪成约2 mm×2 mm×1 mm后备用。同时取10例RA患者(膝关节或髋关节)滑膜组织修剪成约3 mm×6 mm的小块(片),这些小块包裹软骨后共植入SCID鼠肾包囊处,4例骨关节炎(OA)患者滑膜及2例正常滑膜同样处理作对照。术后观察小鼠和移植物的一般情况,从第4周开始分批处死SCID小鼠并切除移植物,进行苏木素-伊红(HE)染色病理分析。结果大部分滑膜及软骨在SCID小鼠体内存活,4周开始滑膜黏附并侵蚀软骨,12周后RA滑膜明显破坏软骨,移植物细胞浸润、软骨破坏与RA病理类似,OA滑膜轻微破坏软骨,而正常滑膜几乎不破坏软骨。结论RA滑膜植入SCID可成活并能侵蚀软骨,RA-SCID小鼠可作为人源化滑膜侵蚀软骨模型,在探讨机制特别是软骨破坏及治疗方面可能有明显优势。 相似文献
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目的 观察类风湿关节炎(RA)患者和健康对照组外周血中CD4+ IL-17+T细胞(Th17)和CD4+ CD161+ IL-17+T细胞(CD161+Th17)的水平,探讨其在RA发病过程中的意义.方法 采用流式细胞术测定36例RA患者和11例健康对照组外周血中Th17细胞及CD161+ Th17的细胞百分率.结果 RA患者外周血Th17及CD161+ Th17细胞水平明显高于健康对照组(P<0.01)且与疾病活动指数(DAS28)、血沉和C-反应蛋白水平呈显著正相关(P <0.05);RA患者和健康对照组外周血中CD161+ Th17细胞百分率明显高于Th17细胞百分率(P<0.01);Th17细胞百分率与CD161+ Th17细胞百分率显著正相关(P<0.01).结论 Th17及CD161+ Th17细胞在RA患者外周血中均增高且与疾病活动度正相关. 相似文献
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目的 了解北京市朝阳区工业企业职业病危害状况,为制定切实可行的防治对策提供科学依据。方法 对1998~2002年该区职业病危害因素监测与健康监护情况进行统计分析。结果 生产环境有害因素监测平均合格率90.8%。5a间各类职业病观察对象检出率平均为1.56%,听力损伤人数呈上升趋势;各种职业病累计新发病例83例,尘肺病和急性职业中毒居前2位。结论 朝阳区乡镇企业职业病危害因素监测合格率与工人职业健康受检率最低,应加强该区尤其是乡镇企业职业病危害因素监测和健康监护工作,切实保障劳动者的身体健康。 相似文献
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Ⅱ型胶原蛋白的提取纯化和鉴定 总被引:6,自引:0,他引:6
1 材料和方法1.1 材料 胃蛋白酶及 型胶原蛋白 (C )标准品购自美国Sigma公司 . Mr14 .4~ 97.4× 10 3低分子标准蛋白购自上海丽珠东风生化技术有限公司 .CS- 90 0 0薄层扫描仪购自日本岛津公司 .1:Protein marker;2 :C (Sigma) 2 g·L- 1 ;3 :C (Sigma) 1g·L- 1 ;4:C 1g· L- 1 ;5 :C 0 .5 g·L- 1 ;6:C 0 .2 5 g·L- 1 ;7:0 .12 5 g· L - 1 .图 1 SDS- PAGE分析经 DEAE- 5 2纤维素柱层析纯化的 C 1.2 方法 新鲜牛软骨剥去骨膜 ,在液氮冷冻下磨成粉 ,称质量 ,用 10倍体积的 4 mol· L- 1 盐酸胍 - 0 .0 5 mmol· L… 相似文献
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目的:观察类风湿性关节炎(RA)患者血清基质金属蛋白酶MMP - 2 ,MMP - 9与病情活动及早期关节破坏的关系。方法:用双抗体夹心ELISA法测定98例病史少于12个月未经治疗的早期RA患者及2 0例健康人血清中MMP - 2、MMP - 9,并分析其与RA患者X线表现积分(△Larsen)及健康评分(△HAQ)、CRP的关系。结果:血清MMP - 2、MMP - 9水平与C反应蛋白(CRP)、△Larsen、△HAQ显著相关,相关系数及P值分别为r=0 .4 2 ,0 .4 9,P <0 .0 1;r=0 .2 3,0 .32 ,P <0 .0 5 ;r =0 .32 ,0 .30 ,P<0 .0 1。MMP - 2、MMP - 9与关节侵蚀改变的出现相关(r=0 .6 5和0 .5 2 ,P <0 .0 5 )。Larsen积分显示骨侵蚀进展与MMP - 2水平关系更密切(r=0 .30 ,P <0 .0 1)。结论:血清MMP - 2、MMP - 9水平与RA患者病情活动及早期关节骨侵蚀显著相关,可以作为早期患者出现骨侵蚀的有益预测指标。 相似文献
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风湿性关节炎患者T细胞表达CCR5和CXCR3的三色流式细胞分析 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 在单细胞水平上,研究类风湿性关节炎(RA)患者滑液及外周血中T淋巴细胞上CCR5及CXCR3的表达,并结合临床资料分析其在RA发病中的可能作用机制及临床应用。方法 分离15例RA患者的滑液单个核细胞(SFMC)、外周血单个核细胞(PBMC),及15正常人PBMC(对照),以三色荧光素标记物进行流式细胞术分析T细胞上CCR5及CXCR3的表达。结果 与PBMC相比较,RA患者SFMC中T细胞上CCR5及CXCR3的表达显著增高(特别是CCR5);而CXCR3的表达个体差异较大;与正常人相比较,RA患者初发或活动期未治时,PBMC中CCR5及CXCR3的表达明显增多。CCR5及CXCR3的表达率与患者的ESR及CRP相关。结论 CCR5^ T细胞积聚在RA患者的病变关节内,且与RA的病情密切相关。 相似文献
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目的:观察细胞环亲素A(CyPA)对人中性粒细胞HL-60株和类风湿关节炎(RA)患者外周血中性粒细胞的趋化和产生IL-8的作用.方法:选择12例RA患者,分离外周血中性粒细胞,采用Boyden小室趋化实验比较CyPA和/或IL-8对HL-60和RA患者粒细胞的趋化作用,采用ELISA检测CyPA促进培养的粒细胞产生IL-8作用,并与健康人比较.结果:CyPA组、 IL-8组及CyPA+IL-8组较阴性对照组趋化性显著增强( P <0.05);与IL-8组相比,CyPA抗体+IL-8组趋化指数降低( P <0.05);与CyPA组或IL-8组相比,CyPA+IL-8组趋化指数有所增加.RA患者中性粒细胞培养上清中IL-8水平较健康人显著增加( P <0.05);经CyPA刺激后,RA患者中性粒细胞培养上清中IL-8水平较CyPA刺激前增加,差异有统计学意义( P <0.05);阻断CyPA后,RA患者中性粒细胞培养上清中IL-8水平较CyPA刺激前无明显差异.结论:CyPA影响IL-8对中性粒细胞的趋化作用并对其分泌有影响. 相似文献