几种牛结核病检疫方法在结核污染牛群中的应用研究

牛结核病主要是由牛分枝杆菌引起的一种人畜共患病,皮内变态反应是牛结核病检疫国家规定的检疫方法和有效手段,本文阐述了皮内变态反应与比较变态反应、γ-干扰素检测及病理剖检的相关性和符合率,对确诊结核病阳性牛有一定的指导作用.     

羊梭菌性疾病的诊治与体会

致病性梭菌引起羊发病,病程短,死亡率高,以散发为主.该病结合流行病学和发病特点,重在早发现,早诊断,早免疫.轻症者对症综合治疗,效果较好.     

传统方法和PCR法在结核分枝杆菌复合群菌种鉴定中的对比研究

目的 对结核分枝杆菌复合群菌种鉴定的传统方法与PCR法进行对比研究,为临床应用提供科学依据。 方法 分别采用传统结核分枝杆菌菌种鉴定方法（对硝基苯甲酸和噻吩-2-羧酸肼）和PCR法,对2010年4月至2011年5月新疆喀什胸科医院住院、临床确诊肺结核患者的313份（例）晨痰标本临床分离株进行菌种鉴定。立意抽样法抽出100份结核分枝杆菌、牛分枝杆菌及非洲分枝杆菌Ⅰ型菌株,用Spoligotyping法检测前两种方法结果的可靠性。 结果 传统方法检测出结核分枝杆菌253株,牛分枝杆菌60株;而PCR法检测出结核分枝杆菌306株,牛分枝杆菌1株,非洲分枝杆菌Ⅰ型6株,两者间差异无统计学意义(χ²=5.05, P=0.08),两者检测的一致率为79.87%（250/313）。传统方法和PCR法鉴定结果差异虽无统计学意义,但传统方法检测出牛分枝杆菌60株,而PCR法仅检测出牛分枝杆菌1株,差异有统计学意义(χ²=4.16, P=0.04),故用立意抽检100份菌株,用Spoligotyping检测出牛分枝杆菌2株,结核分枝杆菌90株、非洲分枝杆菌Ⅰ型6株,2株未能检出菌型;其和传统方法与PCR法的一致率分别为38.78%［（2+36）/98］、98.98%［（1+90+6）/98］。 结论 经过Spoligotyping法检测可知,在结核分枝杆菌复合群菌种鉴定中传统方法较PCR法耗时、繁琐,且不能较准确地鉴定出菌种,而PCR法可准确、快速的将其鉴定到亚种。     

以西红花为主药配伍的油剂治疗严重糖尿病足溃疡临床研究

目的:探究以西红花为主药配伍的油剂治疗严重糖尿病足溃疡的临床疗效。方法:将80例糖尿病足溃疡患者随机分为研究组40例,创面给予以西红花为主药配伍的油剂治疗;对照组40例,创面给予磺胺嘧啶银水胶体敷料治疗。对比两组创面一般情况、实验室指标、临床疗效、不良反应。结果:研究组PUSH计分、创面愈合时间明显低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05);研究组治疗后的创面羟脯胺酸含量高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);两组治疗后的创面溶菌酶含量比较,差异无统计学意义(P0.05)。研究组治疗后创面愈合的总有效率92.5%,显著大于对照组总有效率82.5%,差异具有统计学意义(P0.05)。两组均无不良反应情况发生。结论:严重糖尿病足溃疡采用西红花为主药配伍的油剂治疗,能明显缩短溃疡愈合时间,提高溃疡创面的愈合率,从而减轻患者病痛,改善临床疗效。     

牛结核分枝杆菌ESAT-6蛋白的原核表达和纯化

构建牛结核分枝杆菌ESAT-6基因的原核表达载体,诱导表达、纯化并初步鉴定该蛋白。方法:以牛型分枝杆菌基因组DNA为模板,PCR方法扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-22b(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21(DE3)polys菌体,经IPTG诱导表达蛋白;利用Western-blot鉴定重组蛋白后,纯化目的蛋白。结果:所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致。经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定均发现在6kDa处有特异性蛋白条带。纯化的蛋白的大小与蛋白质分子量标准比较一致。结论:成功表达纯化并鉴定构建了ESAT-6融合蛋白。     

奶牛结核病皮内变态反应与病理剖检对比实验

奶牛结核病是一种人畜共患病,皮内变态反应是检验牛结核病国家规定的检验方法和有效手段,本文阐述了皮内变态反应与病理割检的相关性和符合率,对确诊结核病阳性牛具有一定的指导作用.     

新疆部分地区牛场隐性乳房炎奶样中大肠杆菌的分离鉴定与药物敏感性研究

对新疆部分地区8个奶牛场280头奶牛的1020份奶样进行了隐性乳房炎检测和大肠杆菌分离鉴定,并选择部分菌株进行了药物敏感性研究。结果表明:隐性乳房炎奶样中大肠杆菌平均头分离率和乳区分离率为29.64%和11.86%;所分菌株对环丙沙星、头孢噻唑、丁胺卡那、恩诺沙星高度敏感。     

牛分枝杆菌ESAT-6蛋白抗体间接ELISA方法的建立

利用分子克隆技术,提取结核分支杆菌早期分泌性抗原靶ESAT-6基因,然后对其进行克隆表达,获得高效表达的ESAT-6蛋白,Westem blot证实ESAT-6蛋白可与结核牛阳性血清发生特异性反应.以纯化复性的ESAT-6重组蛋白作为诊断抗原建立的间接ELISA特异性为94%、敏感性为63.35%.交叉反应试验表明,该抗原只与牛副结核病阳性血清有交叉反应,而不与其他5种常见的牛病阳性血清发生交又反应.用间接ELISA方法对285份PPD阳性牛血清、对74份PPD阴性牛血清、79份牛γ-干扰素(IFN-γ)检测阳性血清进行检测,其负荷率分别为62.1%、98.64%、83.5%.实验结果表明建立的间接ELISA方法可以用于牛结核病感染和免疫抗体检测,且具有很好的开发和应用前景.     

一株牛分枝杆菌的分离与鉴定

采集一头检疫阳性的结核牛病变的淋巴组织进行细菌分离.分离物(Z-N)染色为阳性.提取细菌DNA,用PCR检测结核分枝杆菌特异性插入片段IS1081,确定该细菌为结核分枝杆菌.将PCR扩增出的特异性片段克隆到PMD-18T载体上.重组质粒经酶切和PCR鉴定均为阳性,测序结果与牛分枝杆菌标准菌株的同源性为100%.对其用Richard C.Huard等公布的PCR分型方法设计引物进行基因分型,确定该菌株为牛分枝杆菌BCG(M.bovis BCG).     

乌鲁木齐市人畜间结核病的流行病学特点

牛结核病被世界动物卫生组织(OIE)列为B类动物疫病,是一种人兽共患传染病,可通过病畜传染给人和其他动物。其传播流行影响着畜牧业的持续发展和人类的健康。由于卡介苗(BCG)的使用,结核病的发病率比过去有所下降。但近年来该病发病率又呈上升趋势。通过对乌鲁木齐市2007-2010年人畜间结核病的流行病学进行调查,找出结核病流行的规律和特点,为更好地控制结核病的传播提供一定的帮助。