类鼻疽血清ICA诊断试纸的研制及初步应用

目的　研制免疫层析法类鼻疽血清诊断试纸 (ICA) ,用于检测哺乳动物血清中类鼻疽特异性抗体 ,从而诊断类鼻疽病。方法　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,并标记上金黄色葡萄球菌蛋白A ;用类鼻疽多糖抗原致敏硝酸纤维素膜 ;最后组装成免疫层析检测条。用该检测条检测了 3份兔血清、16份猪血清、2 6份人血清标本。结论　我们所研制的类鼻疽血清ICA诊断试纸检测不同哺乳动物血清标本的结果与IHA结果与ELISA实验结果一致 ,具有较好的特异性和敏感性 ,并且更简便快速 ,适合基层单位使用。     

新分离呼肠病毒BYD1株实验感染食蟹猴的病理学改变及发病机制

目的：系统观察新分离呼肠病毒感染食蟹猴的病理学变化，探讨其发病机制。方法：用从SARS患者分离的呼肠病毒BYD1株通过滴鼻和静脉注射两种途径，感染4只食蟹猴(每组2只)。每组分别在感染后7d和33d各处死1只，进行肺脏、心肌、肝脏、脾脏、肾脏、肠、脑和淋巴等组织病理学检查。结果：肉眼观察感染猴肺组织可见水肿和红白相间的实变。病理组织学变化主要集中在肺脏、脾脏、淋巴结和全身小静脉。肺脏表现局部肺泡腔出血，并有蛋白液渗出。肺泡间隔充血、淤血、水肿，导致肺泡壁增厚。支气管上皮细胞和黏膜纤毛脱落，支气管周围单核细胞浸润。脾脏、淋巴结白髓减少，红髓淤血，发生中心淋巴细胞数量减少。全身组织器官小静脉明显淤血。结论：食蟹猴实验感染呼肠病毒BYD1株后，出现间质性肺炎，脾脏、淋巴结萎缩和全身小静脉淤血等一系列组织病理学特征。病毒感染后，受侵害肺脏出现血氧交换障碍和免疫器官功能下降是导致食蟹猴发病的内在机制。新分离的呼肠病毒感染食蟹猴出现的病理学变化提示可以作为严重呼吸综合征的病理学模型。     

霍乱弧菌外膜蛋白W的原核表达及抗原性分析

目的在大肠杆菌中表达霍乱弧菌种特异性外膜蛋白（Omp）W,纯化后制备检测用OmpW抗体。方法采用PCR法以霍乱弧菌基因组为模板扩增ompW基因,插入表达载体pET-32a（＋）的多克隆位点,构建重组表达质粒pET-32a-ompW;重组质粒转化至大肠杆菌BL21（DE3）中,筛选阳性重组菌株,经IPTG诱导获得目的蛋白,纯化后免疫新西兰大耳白兔,制备OmpW的多克隆抗体并进行鉴定。结果扩增得到ompW基因片段,并成功构建pET-32a-ompW原核表达系统,重组蛋白OmpW以包涵体形式高效表达;制备的OmpW抗体能与天然的O1群和O139群霍乱弧菌结合。结论霍乱弧菌OmpW可由原核系统高效表达,免疫获得的抗体具有较好的效价,为进一步制备霍乱弧菌检测用抗体奠定基础。     

利用BioNumerics软件读取API50CH试验条方法的建立

目的建立一种利用BioNumerics生物软件分析API细菌鉴定系统50CH试验条发酵反应结果的方法。方法将70株芽孢杆菌属（Bacillus）细菌API 50CH试验条发酵反应结果储存为数码图像,用BioNumerics软件将图像中的红黄颜色转换为数值,再运用百分位数统计方法分析上述数值并计算出每个反应的阈值,定义大于或等于阈值的反应结果为＂＋＂,小于阈值的反应结果为＂-＂。将＂＋/-＂输入apiweb-API 50CHB V3.0细菌鉴定数据库获取鉴定结果。结果与结论该方法对Bacillus的鉴定结果与API经典方法鉴定结果一致。应用上述方法可帮助初级实验人员客观地获得生化反应结果,有利于实验室检测的标准化建设。     

MLVA和SNP分析在炭疽芽孢杆菌基因分型中的应用

炭疽芽孢杆菌是分子多样性较低的革兰阳性菌,具有高度基因单态性。现有的基因分型方法中仅有少数几种适用于该菌株间的基因分型研究,如多位点可变数串联重复序列分析（multiple locus variable number tandem repeat analysis,MLVA）和单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）分析等。该文综述了MLVA法和SNP法在炭疽芽孢杆菌菌株间分型中的应用进展。     

沙门菌属pad蛋白的原核表达及抗原性的鉴定

目的在大肠杆菌中表达沙门菌属pad蛋白,纯化后制备兔抗pad抗体。方法利用PCR方法从肠炎沙门茵中扩增出pad基因,构建pET一32a（＋）一pad重组表达质粒;将重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21（DE3）中,筛选阳性克隆,测序鉴定后,优化IPTG浓度、诱导温度和诱导时间以诱导重组蛋白的表达;以纯化的pad蛋白免疫家兔,制备抗pad多克隆抗体并进行鉴定。结果与结论成功扩增得到pad基因,经双酶切和测序证实重组表达质粒构建成功,经过诱导条件的优化,在大肠杆菌中表达出相对分子质量为41×10。的目的蛋白;纯化的重组蛋白免疫家兔后,能够有效地刺激家兔产生特异性抗体,经琼脂糖双向扩散测定抗血清效价达到1：32以上。为进一步研制沙门茵属体外快速检测试剂打下了基础。     

呼肠病毒感染实验动物致病性的研究进展

呼肠病毒属于呼肠病毒科正呼肠病毒属,是无包膜、有双层蛋白衣壳、分节段的双股RNA病毒,被广泛用于感染动物模型,研究无包膜病毒的致病机制.本文综述了呼肠病毒感染实验动物的致病性研究进展.     

1例伤寒散发病例的实验室诊断

2007年4月6日,香港注册 Anglo-Eastern 集团的一艘"Genco Commander"号货船在从印度驶往我国秦皇岛港口途中,一句印度籍船员发病,主要症状为乏力、头痛、高热(最高体温达40.1℃)、寒战,于靠岸次日(4月14日)被送入秦皇岛第三人民医院.患者接受了头颅及胸部CT、腹部超声、心电图等各项检查，均未见异常.应用四环素、头孢噻肟、左氧氟沙星和罗红霉素搞生素治疗，病情未见好转.     

从SARS患者标本中分离的呼肠病毒的分纯及鉴定

目的：对SARS患者标本中分离的4株呼肠病毒进行分纯和鉴定。方法：根据呼肠病毒与有膜的冠状病毒对乙醚敏感性的不同对呼肠病毒进行分纯；对分纯后的呼肠病毒进行理化性质鉴定和血凝试验；用抗呼肠病毒猴血清对4株呼肠病毒进行抗原性分析。结果与结论：4株新分离呼肠病毒的理化性质符合呼肠病毒科呼肠病毒属的特性；4株呼肠病毒的抗原性相同；该病毒尚人“O”型红细胞未见有血凝，与已报道的呼肠病毒有所不同。