Lipofectin介导转移的外源性ADA基因在反复上感儿T淋巴细胞的表达

本文对４１例健康儿童和１７例反复上呼吸道感染患儿外周血淋巴细胞腺苷脱氨酶（ＡＤＡ）活性进行了检测。在此基础上筛选出２例反复上感伴ＡＤＡ活性低下患儿。在体外对这２例患儿的外周血Ｔ淋巴细胞进行培养后，以Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ（脂质体）介导的方法对其进行了外源性ＡＤＡ基因的基因转移。结果显示：２例患儿体外培养淋巴细胞ＡＤＡ活性较转基因前升高。同步进行的标志基因ｐＢＬａｃＺ的基因转移的检测结果也直观地证实了Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导的基因转移是成功的。该研究为ＡＤＡ－ＳＣＩＤ淋巴细胞基因治疗的研究提供了初步的体外实验资料。     

ADA活性紫外吸收测定法的改良及复感儿淋巴细胞该酶活性的检测

检测了42例健康儿童和17例反复上呼吸道感染患儿（复感儿）的血淋巴细胞腺苷脱氨酶（ADA）活性，结果表明：复感儿的血淋巴细胞中ADA活性较健康儿童低下，且大多同样伴有不同程度的免疫功能低下；从复感儿组中筛选了两侧ADA活性和免疫功能明显低下的患儿，拟采用这两例患儿的血淋巴细胞进行ADA－SCID基因治疗的实验研究。     

Cloning and identification of a novel variant of human vascular endothelial growth factor

Vascular endothelialgrowth factor ( VEGF) is amultifunctional cytokine thatexerts in vivo a key rolein physiologicalneoangiogenesisduring embryonicde-velopmentor the female cycle and pathologicalneoan-giogenesis of many diseases including hypervascular-ized tumors,rheumatoid arthritis,and retinopathiesdiseases[1— 3] by stimulating endothelial cell prolifera-tion and vessel hyperpermeability.VEGF exists asone of five different isoforms,VEGF1 2 1 ,VEGF1 65 ,VEGF1 83,VEGF1 89and VEGF2 …     

鸡贫血病毒VP 3基因的克隆及其体外凋亡诱导效应的研究

用PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的vp3基因,并将其克隆于真核表达载体pcDNA3上,构建了重组体pcDNA-vp3.经酶切鉴定及测序分析表明,该片段和预期相符.在体外利用LipofectAMINETM介导的基因转染,将pc-DNA-vp3、pcDNA3分别转入肝癌细胞系HepG2和二倍体肝细胞系L-02中,转染后的RT-PCR结果证实vp3基因在细胞中得到了表达.同时利用筛选稳定表达细胞株的技术和原位细胞凋亡检测法,证明了鸡贫血病毒是以凋亡的方式诱导细胞死亡,并且只诱导癌细胞的凋亡,而不诱导正常或二倍体细胞死亡.表明鸡贫血病毒vp3基因很可能成为一种极具潜力的抗肿瘤生物制剂.     

Experimental study on the antitumor effect of mouse B7-1 gene

ＴｗｏｓｉｇｎａｌｔｈｅｏｒｙｆｏｒＴｃｅｌａｃｔｉｖａｔｉｏｎｐｒｏｖｉｄｅｄａｎｅｗａｐｐｒｏａｃｈｆｏｒｔｕｍｏｒｇｅｎｅｔｈｅｒａｐｙ［１－２］．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｃｏｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙｍｏｌｅｃｕｌｅｇｅｎｅｉｎｔｒａｎｓｆｅｃｔ...     

瑞芬太尼用于儿童扁桃体或腺样体切除术的麻醉体会

目的比较瑞芬太尼和芬太尼用于儿童扁桃体或腺样体切除术麻醉时的血流动力学变化、苏醒时间。方法选择扁桃体或腺样体切除术的患儿30例,分为瑞芬太尼组(R组,n=15)和芬太尼组(F组,n=15)。麻醉诱导采用咪达唑仑0.1mg/kg、丙泊酚2.5mg/kg、维库溴铵0.1 mg/kg;R组瑞芬太尼1μg/kg,F组芬太尼2μg/kg,以2%利多卡因1.5-3ml行咽、喉、气管表面麻醉后气管插管。气管插管后R组立即持续泵注瑞芬太尼〔0.1μg/(kg.min)〕,F组术中吸入异氟烷、氧化亚氮,术中根据麻醉深度调整吸入浓度。手术开始前局部注射1%盐酸利多卡因,预计手术结束前10分钟停止吸入麻醉药。结果两组患儿插管前、插管后、手术开始5分钟的HR、MAP无显著差异,R组手术开始后30分钟的HR低于F组(P<0.05),苏醒时间短于F组(P<0.05),恶心呕吐率无明显差异。结论瑞芬太尼可安全地用于儿童扁桃体或腺样体切除术。     

β极低密度脂蛋白经细胞外信号调节激酶信号途径诱导其受体表达上调

为探讨β极低密度脂蛋白诱导极低密度脂蛋白受体表达上调的信号转导途径及其对巨噬细胞胞内脂质堆积的影响，采用Westem Blot方法检测β极低密度脂蛋白温育后巨噬细胞内的细胞外信号调节激酶活性，在体外培养的巨噬细胞中加入不同信号途径关键激酶的抑制剂，观察各信号途径对受体调控的阻断效应，测定胞内胆固醇和甘油三酯的含量，观察泡沫细胞的形成。结果发现，β极低密度脂蛋白以蛋白激酶C依赖的方式激活巨噬细胞中的细胞外信号调节激酶1／2活性。细胞外信号调节激酶1／2抑制剂和蛋白激酶C抑制剂可显著阻断β极低密度脂蛋白诱导巨噬细胞极低密度脂蛋白受体转录的效应，而P38抑制剂和蛋白激酶C激动剂对G极低密度脂蛋白诱导极低密度脂蛋白受体表达上调无明显影响。细胞外信号调节激酶1／2抑制剂可抑制β极低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞内胆固醇和甘油三酯含量升高。上述结果表明，蛋白激酶C依赖的细胞外信号调节激酶1／2信号级联可能是介导8极低密度脂蛋白诱导极低密度脂蛋白受体表达上调的主要信号转导途径，特异地抑制此信号途径可抑制β极低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞胞内脂质堆积。     

电针对大鼠颈肌慢性损伤模型肌电活动及细胞凋亡的影响

目的：观察电针对大鼠颈肌慢性损伤模型肌电活动、颈后肌细胞凋亡的影响。方法：34只Wistar大鼠选取7只为空白对照组,其余大鼠复制颈肌慢性损伤模型备用。(经超声诊断仪检测,6只大鼠模型复制不成功,剔除。)将模型大鼠随机分为模型组、电针组、美洛昔康组,每组7只。电针组针刺双侧“风池穴”,1次/d, 25 min/次,连续治疗10 d为1个疗程,疗程之间间隔2 d,共2个疗程。使用超声诊断仪检测大鼠颈后肌组织的形态学变化,电生理记录大鼠颈后肌肌电变化,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡率,免疫组织化学法标记B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、Caspase-9蛋白的表达情况。结果：超声检测结果显示：与模型组比较,电针后肌纤维排列较整齐,肌厚度增粗。肌电生理检测结果显示：模型组肌电波幅及频率明显发生了衰减,电针后肌电波幅和频率明显高于模型组。TUNEL结果显示：与模型组比较,电针组凋亡细胞数目明显减少,差异有统计学意义(均P<0.05)。免疫组织化学结果显示：与空白对照组比较,...     

一种血管内皮生长因子变异体的结构与功能的初步探讨

目的针对发现的一种血管内皮生长因子变异基因(h′VEGF),利用计算机软件模拟预测其空间结构,并对其功能进行初步探讨。方法将pCD-hVEGF165及pCD-h′VEGF165重组真核表达载体导入CHO细胞,收集培养上清,进行ELISA分析、血管通透性实验(Miles实验)、内皮细胞增殖实验(MTT法)。结果h′VEGF165能使豚鼠的血管通透性增高,并促进ECV-304细胞增殖,但ELISA实验结果显示h′VEGF165与抗hVEGF165单抗未发生抗原抗体反应。结论h′VEGF165与hVEGF165在空间结构上可能存在差异,但现有的实验结果未见两者在功能上的明显差异。     

《仁斋直指方论》“五藏所主”学术思想研究

南宋·杨士瀛《仁斋直指方论》以内科杂病、外科、妇科证治为纲,广撷诸家名方及家传良方,识证施方清晰独到,善于灵活化裁经典名方,是一部颇具影响的临床参考书。书中提出"五藏各有所主,至其病证莫不随所主而见焉",强调五脏所主与天地自然之气相应,外之六气相乘、内之七情相感皆为五脏之邪。五脏所主内涵丰富,内藏神志,上应官窍,外应肢体。五脏病证以五脏所主、虚实、阴阳为纲辨治,脏病属阴,腑病属阳,贼风客邪阳受之,饮食居室阴受之,复杂病证以病证表现、脉象特点细加辨别。诊察五脏之脉、五脏之色,可判明脏气郁畅、四时平贼、形气逆顺,诊察脉形、脉位以辨别病所、病性,亦需圆机活法,诊视相参;证治尤重五脏所主、五脏相关,依脏气虚实而补泻,依六气标本而调治,依火、湿、热、痰而祛邪,依脏腑相关而主次论治。