茯苓交配型的初步研究

以茯苓栽培种"大泡引"为研究材料,茯苓菌丝为无锁状联合的多核菌丝,担孢子中双核孢子占75 3%、单核孢子2 4%、无核孢子22 3%。30个单孢株进行单孢配对结果为拮抗现象(不亲和)占总数的26 7%。茯苓菌株具有单孢结实现象,占单孢株总数的18%。由以上结果可初步得出茯苓菌为同宗结合真菌。     

氧化还原电位调控对Actinobacillus succinogenes 厌氧发酵产丁二酸的影响

对氧化还原电位调控在产琥珀酸放线杆菌厌氧发酵产丁二酸过程中的代谢产物分布的作用进行了研究。在血清瓶发酵培养过程中,筛选出对发酵过程无抑制作用的氧化剂铁氰化钾和还原剂二硫苏糖醇作为发酵体系的氧化还原电位调节剂。在3L发酵罐上利用铁氰化钾和二硫苏糖醇调节发酵体系氧化还原电位值在-100～-450mV,结果表明-350mV为菌体生长和产丁二酸的最佳电位,丁二酸生产速率由0.75g/(L·h)提高到1.18g/(L·h),产物丁二酸与副产物乙酸的质量浓度比由2.5提高到3.9。     

酶法制备γ-D-glutamyl-L-tryptophan的动力学模型

以酶法合成γ-D-glutamyl-L-tryptophan (γ-D-Glu-L-Trp)为研究体系,采用D-谷氨酰胺为γ-谷氨酰基供体,L-色氨酸为受体,测定得到了转肽反应的米氏常数（K _m）为5.11 mmol·L^-1,催化常数（K_cat）为3.92 mmol·min^-1,γ-D-Glu-L-Trp的水解反应米氏常数（K′_m）为2.31 mmol·L^-1,催化常数（K′_cat）为1.46 mmol·min^-1。采用顺序反应机制建立了酶法制备γ-D-Glu-L-Trp的过程动力学模型,并进行了参数优化。经验证,所建模型可准确预测该体系中的反应进程,模型数值解与实验值的平均相对误差小于5%。     

灰兜巴蛋白超声提取及其对α-葡萄糖苷酶的抑制

以藏药灰兜巴为原料,首次采用超声波辅助提取灰兜巴蛋白。在单因素实验的基础上,用响应曲面法优化灰兜巴蛋白的提取工艺。结果表明提取蛋白的最佳工艺参数为:超声功率800W、超声时间52min、温度57℃、p H7.5和液料比54∶1m L/g,此时灰兜巴蛋白的得率是52.66%,与理论值52.59%仅相差0.07%。对蛋白提取液进行离心、微滤和透析等处理,得到的灰兜巴粗蛋白的纯度为56.75%。通过实验,确定灰兜巴粗蛋白对α-葡萄糖苷酶（AGD）有一定的抑制作用,其AGD抑制活性IC50值约为18mg/m L。      

响应面法优化灰兜巴多肽脱色工艺

本文以灰兜巴蛋白的酶解液为原料,首次采用粉末活性炭对多肽液进行脱色处理,去除灰兜巴多肽液中的色素,以利于生物活性多肽的分离纯化。在单因素实验的基础上,用响应曲面法优化灰兜巴酶解液的脱色工艺。实验结果表明脱色剂为粉末活性炭时脱色效果最佳,其工艺参数为:p H3.3、活性炭用量1.6%、温度44℃、时间53min。在此条件下,灰兜巴蛋白酶解液的脱色率为73.12%,肽回收率为82.49%,与理论值相接近。该脱色工艺简单可靠,脱色效果好,且最大限度的保留了灰兜巴蛋白酶解液中的多肽含量,为开发灰兜巴多肽提供理论基础。      

营养因子对大肠杆菌发酵产转氨酶的影响

运用“单一组分缺失法”研究了18种氨基酸,11种维生素,8种微量元素,4种嘌呤与嘧啶对大肠杆菌A5发酵产转氨酶的影响。结果表明,L-甲硫氨酸是菌体生长与产酶所必需的物质,L-缬氨酸、L-异亮氨酸和L-谷氨酸分别对菌体生长和酶转化得率的提高有显著的促进作用。在此基础上构建了一个改良的合成培养基,其组成为(g/L):葡萄糖20,(NH4)2SO45,MgSO40.5,NaCl0.5,K2HPO40.5,KH2PO40.5,氨基酸混合液(包括L-Met、L-Val、L-Ile、L-Glu)0.6,pH7.2,所产转氨酶的转化得率达到72.4%。     

啤酒废酵母酶解液作为有机氮源厌氧发酵制备丁二酸的研究

确定了以啤酒废酵母为原料,酵母酶解液中α-氨基氮含量为考察指标的蜗牛酶酶解破壁条件;并以啤酒废酵母酶解液为有机氮源,厌氧发酵制备丁二酸。结果表明蜗牛酶破壁效果最好,其最佳反应条件为蜗牛酶用量10mg/g干物质,pH6.5,40℃水浴,反应16h,酵母酶解液中α-氨基氮含量为0.504g/100mL;当发酵培养基中葡萄糖浓度为50g/L,啤酒废酵母酶解液作为有机氮源时,菌株Actinobacillus succinogenes NJ113可以产34.6g/L丁二酸,收率69%,和以酵母膏为有机氮源厌氧发酵制备丁二酸(丁二酸浓度为35.1g/L,收率70.2%)比较,产量相近,成本较低。     

甲酸脱氢酶基因在大肠杆菌Rosetta中的高效表达

甲酸脱氢酶是氧化还原酶辅酶NAD(P)~+和NAD(P)H再生循环体系中的关键酶。实验中,用PCR方法扩增了假丝酵母Candida boidinii中甲酸脱氢酶基因(fdh),分别构建了诱导型表达载体pUC-dh和pET- fdh,以E.coli Rosetta为表达宿主,获得了能够高效表达甲酸脱氢酶的重组菌。经诱导后重组菌Rosetta/pET- fdh的FDH比酶活为0.399U/mg(蛋白),Rosetta/pUC-fdh的FDH比酶活为0.163U/mg(蛋白)。经SDS- PAGE分析,Rosetta/pET-fdh和Rosetta/pUC-fdh表达的FDH蛋白分别占菌体可溶性总蛋白的17%和10%,实现了fdh基因在Rosetta中的高效表达。研究中所构建的重组菌为氧化还原反应中的辅酶再生奠定了良好的基础。     

不确定性高通量筛选系统的双子代数控制

近年来,对于高通量筛选系统的控制,在确定性情形下已进行了不少工作,其中,双子代数框架下的控制策略执行相对更灵活,效率更高.然而,现有的输出反馈优化控制对性能指标期望系统行为还有特殊的构造要求须满足;而且,实际运行中存在有人工干预、设备维护、意外干扰、故障等带来的不确定性.对这两者考虑的缺失限制了目前高通量筛选系统自动控制的效率.为进一步提高这类新兴离散事件系统的控制效率,基于区间双子代数,将该输出反馈控制结构拓展到系统参数不确定的高通量筛选系统,使之对不确定性高通量筛选系统能自动产生优化控制.继而,将输出反馈与预处理补偿相结合.后者对指标的构造并无特殊要求.综合后的控制结构亦避免了原反馈结构下对性能指标构造的限制.最后通过不同实例说明了对不确定性高通量筛选系统应用该控制结构的方法和有效性.     

生物制品冻干技术的进展

<正> 冷冻干燥是将含水物质先冻结成固态,而后使其中的水分从固态升华到气态,以除去水分而保存物质的方法。优点是保持成分不变性,抑制生长和酶的作用,保持体积和形状,保护易氧化物质,去除水分,保存期长。