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1.
介绍一种改进的Oligo诱导DNA定点突变方法,此法制备的含U野生型模板DNA在JM107中的存活率从5%~10%下降至1%~2%;诱变反应终产物转染JM107产生的斑数比原法提高15~20倍,诱导连续4个核苷酸替换产生的突变频率达80%~85%,即使诱导连续12个核苷酸的缺失,也能获得40%~50%的突变频率.  相似文献   
2.
人丙型肝炎病毒I型(HCV-I)核心抗原编码区cDNA,全长573bp,编码191个氨基酸,被克隆到一种新的表达质粒pRSETHisB中,转化大肠菌BL21菌株,在1mmolL-1IPTG诱导37℃培养5h,核心抗原表达水平达到高峰,表达出分子量26×103的融合蛋白,并在细胞内形成微小晶体.表达水平达到细胞总蛋白的40%左右,通过纯化,获得的核心抗原经SDS-PAGE检查为均一分子量26×103的蛋白,用酶联免疫法进行血清学初步检查,纯化的核心抗原与HCV阳性血清显示出强烈的阳性反应,对慢性丙肝病人血清中抗HCV抗体的阳性检出率达93%,而与正常人血清则无阳性反应  相似文献   
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