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猫视神经慢性损伤相关差异表达基因消减cDNA文库的构建 总被引:2,自引:2,他引:0
目的:构建猫视神经慢性损伤相关差异表达基因消减cDNA文库.方法:15只成年家猫随机分为正常对照组、视神经压迫4周组和视神经压迫8周组(n=5),压迫4周组和压迫8周组猫利用球囊植入法建立慢性视神经损伤模型.取各组动物视神经,TRIzol法提取总RNA,SMART技术合成cDNA,随后利用抑制消减杂交方法分离受压4周和8周视神经中差异表达基因的cDNA片段,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物用氯化钙转化法转化大肠杆菌进行文库扩增和蓝白斑筛选,随机挑取300个白色克隆进行菌落PCR鉴定.结果:菌落PCR扩增显示每个文库80%的克隆中均有200~800 bp的插入片段.结论:成功构建猫视神经慢性损伤相关差异表达基因消减cDNA文库,为进一步筛选、克隆慢性视神经损伤相关差异表达基因奠定了基础. 相似文献
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超深低温和复苏对犬脑的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究超深低温对犬脑组织缺血的保护作用。方法:建立实验犬闭胸式体外循环,体内体外结合降温,并以海脉素置换行控制性放血,至红细胞比容降至5%左右。中心体温7-10℃维持低流量体外循环90 min。复温过程中回输自体血并予复苏。结果:7只犬中1只因技术因素死于术中,其余6只复苏后神经功能均恢复,但在2-4 h后均死于肺功能不全。病理检查示:脑、肝脏、肾脏正常;心脏轻度缺血性改变;肺水肿、肺泡出血明显。结论:超深低温下犬脑、肝、肾可耐受缺血90 min而无明确异常,但在复苏后维持肺功能困难。 相似文献
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U-74389G对脑外伤后神经功能保护作用的实验研究 总被引:4,自引:0,他引:4
大量实验证明,氧自由基介导的脂质过氧化反应是加重继发性脑损伤的一个重要因素。甲基强的松龙等激素类药物具有清除氧自由基的功能,多数学者认为对脑外伤有治疗作用,但同时具有激素的副作用。U-74389G{化学名:21-[4-(2、6-双-1-吡啶烷-4-嘧啶)-1-哌嗪]-孕烷-1、4、9(11)-三烯-3、20-二酮.(2)-2-丁烯二酸盐}是一类新型21-氨基类固醇,实验表明其对脑缺血及放射性损伤有显著的保护作用[1],但在脑外伤方面的研究较少。笔者通过观察U-74389G对中度液压颅脑外伤后大鼠神经行为改变的影响,探讨其在脑外伤中的神经保护作用。一、材料与方法1.动… 相似文献
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目的构建pEGFP-N1-GGF2质粒,观察其在大鼠脑组织中的表达。方法采用RT-PCR方法从人胚胎脑组织总RNA中扩增出人GGF2全长序列.并克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因真核表达载体pEGFP-N1上,构建pEGFP-N1-GGF2质粒.通过脂质体将pEGFP-NI-GGF2质粒转染大鼠脑组织.荧光显微镜下观察GGF2融合蛋白在大鼠脑内表达的时间和空间分布特征。结果成功构建了pEGFP-N1-GGF2表达载体,荧光显微镜观察可见,pEGFP-N1-GGF2表达载体转染6h大鼠脑内即可见GGF2融合蛋白表达.3d时融合蛋白表达最多,7d时表达量稍有下降但仍高,14d时表达量已明显下降。GGF2融合蛋白在脑内的表达以针道为中心向周围扩散.荧光信号可达皮层深部。结论脂质体介导的pEGFP-NI-GGF2质粒能够在大鼠脑内表达GGF2融合蛋白。 相似文献
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海水淹溺性肺水肿对大鼠创伤性脑水肿的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨海水淹溺性肺水肿对创伤性脑水肿的影响。方法将72只大鼠随机均分为9组:①侧方液压打击致单纯颅脑创伤1h组:⑦单纯颅脑创伤6h组:③颅脑创伤合并淡水淹溺1h组;④颅脑创伤合并淡水淹溺6h组;⑤颅脑创伤合并海水淹溺1h组;⑥颅脑创伤合并海水淹溺6h组;⑦单纯颅脑创伤6h电镜组;⑧颅脑创伤合并淡水淹溺6h电镜组;⑨颅脑创伤合并海水淹溺6h电镜组。检测①~⑥组大鼠伤区脑组织含水量及Na^+、K^+、Ca^2+含量,并行病理学检查;⑦~⑨组行伤区脑组织电镜检查。结果与单纯颅脑创伤组和淡水淹溺组相比.颅脑创伤合并海水淹溺组脑组织含水量和脑组织中Na^+、Ca^2+的含量显著性增加,K^+含量则显著性降低.颅脑创伤后的病理及超微结构改变加重。结论海水淹溺性肺水肿可加重创伤性脑水肿与继发性脑损伤。 相似文献
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单纯疱疹病毒胸苷激酶基因工程化细胞和更昔洛韦系统的急慢性毒性 总被引:4,自引:0,他引:4
目的:探讨单纯疱疹病毒I型胸苷激酶基因工程化细胞(pLTKcSN/VPC)和更昔洛韦(GCV)系统的动物体内急、慢性毒性。方法:将pLTKcSN/VPC和(或)以β-半乳糖苷酶基因为报告基因的PA317细胞悬液注入小鼠、大鼠和灵长类动物体内,7d后部分动物再全身应用GCV。分批处死动物,观察pLTKcSN/VPC和GCV系统在不同种属动物的体内急、慢性毒性。采用PCR和原位杂交方法直接检测胸苷激酶 相似文献
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大剂量白蛋白对大鼠液压颅脑伤后神经功能的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :探讨白蛋白在治疗大鼠液压颅脑损伤后神经功能恢复的作用及剂量效应。方法 :80只SD大鼠随机分为 4组 ,Ⅰ组 :2g·kg-1、Ⅱ组 :1 2g·kg-1、Ⅲ组 :0 8g·kg-1、Ⅳ组 :0 4g·kg-1,液压打击致伤 ,半小时内经尾静脉注射不同剂量 2 0 %人血白蛋白。伤后1~ 7d记录神经功能恢复情况。结果 :行走功能实验、平衡功能实验及记忆功能实验Ⅰ组均优于其他组 (P <0 0 1)。结论 :伤后早期使用大剂量白蛋白可明显促进大鼠液压颅脑损伤后的神经功能恢复 相似文献
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目的:急性猪在急性脑内血肿所致颅内高压时,脑组织PO2、PCO2、pH值的变化。方法:采用微量泵注射法建立猪急性脑内血肿模型,注血后连续监测平均动脉压(MAP),颅内压(ICP)、脑灌注压(CPP),脑组织氧分压(PtiO2),脑组织二氧化碳分压(PtiCO2),pH,HCO3^-及动脉血气的变化。结果:颅内注血后,ICP急剧上升,CPP下降,PtiO2下降(P〈0.01),PtiCO2升高(P〈 相似文献
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目的 观察猫视神经慢性受压后视网膜神经节细胞(RGCs)的动态变化.方法 30只成年家猫按随机数字表法等分为正常对照组、假手术组、压迫1周组、压迫2周组、压迫4周组和压迫8周组,每组5只.利用球囊植入法建立慢性视神经损伤模型.所有动物在术前2周用Dil逆行标记RGCs.取各组动物视网膜进行光镜、电镜观察,并在荧光显微镜下对RGCs进行计数.结果 正常成年猫视网膜HE染色可见三层细胞核,各层间界限较为清楚,从玻璃体腔向巩膜依次为神经节细胞层、双极细胞层和感光细胞层;视神经慢性受压4周时视网膜变化仍不明显:受压8周时可见RGCs核明显稀疏,大而染色浅的细胞核基本消失,视网膜总厚度变薄,胶质细胞增生.电镜下正常猫RGCs核呈卵圆形、核大、核质均匀,有时可见核仁,胞浆占细胞比例小,但细胞器丰富;受压2周时视网膜无明显改变;受压4周和8周时可见RGCs胞浆成分疏松、内质网扩张、线粒体肿胀、质膜下出现空泡、核膜皱缩内陷、胞浆空化、染色质边聚.正常组DiI逆行标记的RGCs的密度在406~527个/mm2之间,平均为(465±38)个/mm2,中央区密度高于周边区;视神经受压后前4周RGCs数量无明显改变;受压8周时RGCs数量有显著下降,平均密度为(293±32)个/mm2.下降约37%.结论 视神经慢性受压后RCJCs将出现延迟的变性.为视神经受压后RGCs的保护提供了时机. 相似文献
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目的:研究分泌型短蛋白聚糖(brevican)髓芯蛋白的mRNA在大鼠垂体组织中的表达。方法:采用RT-PCR和原位杂交方法。结果:RT-PCR反应得到一段约400bp的DNA片段;原位杂交结果显示,腺垂体和神经垂体均可见分泌型brevican髓芯蛋白mRNA阳性细胞,胞质中可见杂交信号。腺垂体中分泌型brevican髓芯蛋白mRNA阳性细胞大小不一。结论:神经垂体和腺垂体均有分泌型brevican髓芯蛋白mRNA表达,brevican可能不是中枢神经系统特有的细胞外基质成分。 相似文献