食管安颗粒治疗反流性食管炎30例

反流性食管炎（RE）是由于胃或十二指肠内容物反流至食管引起的炎症，是临床常见病、多发病，病程长，复发率高。我们自2007年4～10月运用我院制剂食管安颗粒治疗本病30例，疗效满意，并与奥美拉唑胶囊治疗的30例作对比观察，现报告如下。     

海洛因所致的广泛神经系统损害(附1例报告)

近年来 ,海洛因对人体免疫功能的影响已引起国内学者的重视 ,本文报道 1例海洛因致中毒性脑病、多发性周围神经病、肌炎及关节炎的患者 ,并探讨海洛因对神经系统损害的临床表现及其发病机制。患者男 ,2 2岁。饮酒后肌注海洛因 ,3～ 5分钟后突然意识丧失 ,在当地医院治疗后于次日神志转清 ,但出现双下肢麻木、无力 ,不能站立行走 ,双髋关节疼痛 ,平卧时双下肢强迫性屈曲。患者吸食海洛因 2年 ,已戒断半年。查体 :神志清 ,颅神经检查无阳性发现 ,双上肢肌力肌张力正常。双髋关节强迫性屈曲位 ,双侧托马斯征阳性 ;双下肢近端肌力 2～ 3级 ,远端…     

RNAi下调survivin表达诱导成人神经细胞瘤细胞凋亡

目的利用RNA干扰技术下调凋亡抑制因子survivin在人成神经细胞瘤细胞系SH-SY5Y中的表达,并评价其对肿瘤细胞凋亡的影响。方法将设计合成的寡核苷酸片段退火后连入pBSHH1构建survivin的短发夹RNA表达质粒pBSHH1-survivin;通过RT-PCR和Western印迹评价其对SH-SY5Y细胞内源性survivin表达的抑制作用;运用Hoechst33258核染色、DNA凝胶电泳以及AnnexinFITC染色检测survivin表达下调对SH-SY5Y细胞凋亡的影响。结果酶切和DNA测序证实survivin的短发夹RNA表达质粒构建成功;RT-PCR和Western印迹表明质粒转染SH-SY5Y细胞后能明显下调survivin的表达;Hoechst33258核染色、DNA凝胶电泳以及AnnexinⅤFITC染色显示下调survivin的表达能诱导SH-SY5Y细胞凋亡。结论成功构建了有效针对survivin的短发夹RNA表达质粒;下调survivin的表达能诱导SH-SY5Y细胞凋亡。     

肝欣康丸治疗慢性乙型肝炎120例

1 资料与方法 1.1 病例选择 本文198例慢性乙肝患者,均系1996年11月～1998年12月门诊病人,均符合1990年5月上海全国第六届病毒性肝炎会议修订的诊断及分型标准。中医辨证参照中华全国中医学会内科肝胆病专业委员会(天津,1991年12月)会议标准。其中治疗观察组120例,对照组78例。 1.2 一般资料 治疗组120例中,男性79例,女性41例;年龄在13～52岁之间,平均年龄31.25±8.37岁;病程6个月～7年,平均2.62±1.97年;肝功能异常者88例,肝功能正常者     

汤建光教授治疗消化性溃疡经验

汤建光教授对于消化病的辨证治疗颇有心得,他从气虚、血瘀入手,辨证理论联系临床运用,在临床治疗消化性溃疡方面,收效甚好。     

PJ综合征疾病基因STK11/LKB1转录调控的生物信息学分析

目的初步了解STK11／LKB1的转录起始位点信息，分析其可能的候选启动子区段，为以后进行STK11／LKB1的转录调控研究作准备。方法通过检索网上数据库资料，获得STK11／LKB11的转录本信息；运用MethPrimer和FirstEF两种程序，对包含STK11／LKB1基因“第一外显子”、“第一内含子”及其5’UTR区上游的gDNA片段序列，分别进行CpG岛分析和第一外显子预测；利用PromoterInspector等预测程序，对STK11／LKB1的启动子进行预测。结果目前已知的STK11／LKB1转录本中，5’UTR区最长的序列为BC007981(GenBank登录号)；STK11／LKB1基因属于典型的CpG岛相关基因，现有的“第一外显子”之5’上游已不再有外显子，已有的5’UTR区基本已基本接近STK11／LKB1的转录起始位点；在BC007981的5’上游约200bp到400bp内很可能存在有启动子。结论STK11／LKB1已有的5’UTR区基本已基本接近STK11／LKB1的转录起始位点，在BC007981的5’上游数百bp内很可能能找到具有启动活性的区段从而有利于进行下一步的转录调控研究。实验明确其真实的转录起始位点应已相对容易，     

质粒介导的RNAi对神经母细胞瘤细胞Survivin基因表达的抑制作用

目的构建Survivin的短发夹RNA表达质粒并通过由其介导的RNA干扰来下调神经母细胞瘤细胞株SH—SY5Y细胞中Survivin的表达。方法针对人Survivin的mRNA序列设计合成两对寡核苷酸序列，退火后将其连入pBSHH1．对重组质粒pBSHH1—S1和pBSHH1-S2进行酶切和测序鉴定，然后将质粒转染SH-SY5Y细胞，运用RT—PCR和Western印迹检测Survivin基因的表达。结果酶切和测序证实目的寡核苷酸片段已被克隆到pBSHH1，pBSHH1-S1和pBSHH1—S2转染SH—SYSY细胞后，Survivin基因的mRNA以及蛋白水平的表达量均受到明显抑制结论成功构建了人Survivin基因的短发夹RNA表达质粒，并在SH—SYSY细胞中验证了它们对Survivin基因的表达抑制作用，为神经母细胞瘤等肿瘤的基因治疗研究奠定了基础。     

蛋白酶体抑制剂诱导帕金森病PINK1蛋白聚集物的形成与特征

目的研究在蛋白酶体抑制剂作用下，帕金森病PINK1蛋白聚集物的形成及其特征。方法应用PCR从胎脑cDNA文库扩增全长PINK1基因，亚克隆至增强型绿色荧光蛋白载体（pEGFP-N1），经测序证实载体构建正确。PINK1-pEGFP-N1表达载体转染非洲绿猴。肾细胞株（COS-7细胞），应用MG-132抑制蛋白酶体活性，Western blot检测PINK1蛋白表达量，荧光染色观察PINK1蛋白是否形成蛋白聚集物，免疫荧光观察构成Lewy小体的两种主要成分：泛素和α-突触核蛋白是否存在于蛋白聚集物中。结果应用MG-132诱导后PINK1蛋白表达量明显增加，PINK1蛋白形成了蛋白聚集物，泛素和α-突触核蛋白与PINK1蛋白聚集物共定位。结论在蛋白酶体抑制剂作用下，PINK1蛋白可形成蛋白聚集物，泛素和α-突触核蛋白是其组成成分。     

MJD1基因真核表达载体的构建及其在SH-SY5Y细胞中的表达

目的：分别构建野生型MJD1以及CAG三核苷酸重复扩展突变型MJD1的真核表达载体;明确ataxin-3的多聚谷氨酰胺扩展突变是否可导致细胞核内蛋白聚合体形成。方法：分别以pAS2-1-MJD20Q和pAS2-1-MJD68Q为模板,通过PCR扩展野生型MJD1以及CAG三核苷酸重复扩展突变型MJD1的编码序列。PCR产物经Bam HI和Hind III双酶切后连入pcDNA3.1-Myc-His(-)B,通过酶切以及DNA测序鉴定重组质粒pcDNA3.1-Myc-His(-)B-MJD20Q和pcDNA3.1-Myc-His(-)B-MJD68Q。重组质粒转染SH-SY5Y细胞,通过Western印迹验证ataxin-3的表达,应用激光共聚焦显微镜观察转染细胞的核内蛋白聚合体形成情况。结果：酶切和DNA测序证实目的基因已被克隆入pcDNA3.1-Myc-His(-)B;其在转染细胞中的表达亦经Western印迹得以验证;SH-SY5Y细胞转染pcDNA3.1-Myc-His(-)B-MJD68Q后可见核内蛋白聚合体形成,而转染pcDNA3.1-Myc-His(-)B-MJD20Q后未见核内蛋白聚合体形成。结论：成功构建了MJD1的真核表达质粒;ataxin-3的多聚谷氨酰胺扩展突变可导致细胞核内蛋白聚合体形成。