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1.
目的 合成和筛选nogc66-siRNA干扰片段,克隆神经生长因子-β(NGF-β),构建含nogu66-siRNA和NGF-β双基因的重组腺相关病毒穿梭质粒.方法 设计针对nogo66的siRNA,插入载体pGenesil-1.1,转染大鼠胶质瘤C6细胞,通过RT-PCR和Western-blot检测筛选有效的干扰质粒;培养人MI-Apaca-2细胞,提取总RNA,进行RT-PCR得到人NGF-β基因,插入T-easy载体;将pGenesil-1.1与pAAV-MCS进行重组,得到含U6和CMV双启动子的重组腺相关病毒穿梭质粒pAAV-U6/CMV-EGFP;将nogo66-siRNA和NGF-β分别插入pAAV-U6/CMV-EGFP中,构建含nogo66-siRNA和NGF-β双基因的重组腺相关病毒穿梭质粒.结果 干扰质粒pGenesil-nogo66-siRNA测序显示干扰序列正确;RT-PCR结果显示转染后各条带相对亮度有差异,转染pGenesil-nogo66-siRNA-1和pGenesil-nogo66-siRNA-2使nogo基因表达降低;Western-blot结果显示转染pGenesil-nogo66-siRNA-1使NOGO蛋白表达下降73%,转染pGenesil-nogo66-siRNA-2使NOGO蛋白表达下降78%,与未转染组相比,差异有统计学意义(P<0.05);质粒T-easy-NGF-β酶切可见3000 bp、736 bp条带,测序显示基因序列正确;酶切pAAV-U6/CMV-EGFP、pAAV-U6-nogo66-siRNA/CMV-EGFP可见4300 bp、800 bp条带,转染细胞后均可见绿色荧光蛋白表达;酶切pAAV-U6/CMV-NGF-β、pAAV-U6-nogo66-siRNA/CMV-NGF-β可见4300 bp、736 bp条带;质粒pAAV-U6βnogo66-siRNA/CMV-NGF-β测序显示载体中的基因序列止确.结论 成功构建了含有nogo66-siRNA与NGF-β双基因的重组腺相关病毒穿梭质粒,为深入研究脊髓损伤的修复提供了实验基础. 相似文献
2.
目的探讨细针半环形外固定架不超关节治疗波及胫骨干中下1/3的Pilon骨折的疗效。方法采用细针半环型外固定架不超关节治疗波及胫骨干中下1/3的Pilon骨折21例。按Ovadia和Beals分型:型14例,型7例,开放性骨折6例,闭合性骨折15例。结果所有患者均获随访,随访时间6~18个月,平均12.5个月。骨折愈合时间8~16周,平均12周。术后6~22个月,平均8.7个月,拆除外固定架。有3例钉道结痂、渗液、浅表炎性反应,经清除结痂、3%双氧水滴洗后痊愈。1例切口皮缘坏死,经清理延迟I期缝合后痊愈,未出现严重并发症。按Mazur踝关节症状与功能评分系统进行评分,优6例,良11例,可3例,差1例,优良率81.0%。结论细针半环形不超关节外固定架治疗波及胫骨干中下1/3的Pilon骨折,能有效维持骨折稳定,可使关节早期活动,有利功能恢复。 相似文献
3.
甲状腺机能减退症因其具有多样的临床表现,常易被误诊,为提高对此病的认识,降低误诊率,现将我院1995-2001年间误诊的甲状腺机能减退症共7例分析如下:
1. 临床资料
1.1 一般资料:
本组7例,男3例,女4例,年龄:30-39岁2例,40-49岁2例,60-69岁1例,70-79岁1例,80岁以上1例.
…… 相似文献
4.
新生儿破伤风七例临床分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的总结新生儿破伤风的临床治疗经验及预防措施.方法对7例新生儿破伤风的治疗做回顾性分析.结果 5例患儿治愈,1例转院,1例死亡.结论大剂量应用破伤风抗毒素(TAT)及地西泮,积极防治感染,保证热量供应,保持环境安静是治疗的主要措施,小剂量TAT治疗可能会延误或加重病情.推广新法接生可预防新生儿破伤风. 相似文献
5.
血清TNF-α、IL-1β、NO水平在成人大骨节病手术治疗中的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的通过检测不同严重程度大骨节病(KBD)患者实施分级手术治疗前后炎症细胞因子TNF-α、IL-1β和一氧化氮(NO)表达水平,了解大骨节病患者不同临床分期及实施手术治疗前后的细胞炎性因子表达,探讨大骨节病手术治疗的意义。方法陕西咸阳地区KBD患者45例,临床分期后采用分级手术治疗。健康对照组25例。采集KBD组手术前、术后3月和健康对照组的血清标本,检测IL-1β、TNF-α和NO的水平。结果 KBD患者血清IL-1β、TNF-α和NO的水平分别为(13.6±2.9)pg/ml、(18.2±4.8)pg/ml和(53.2±10.2)μmol/L,与健康对照组比较均具有显著差异(P<0.05);实施分级手术治疗,临床表现为I-IV级患者的TNF-α和NO水平在治疗前后均明显下降(P<0.05),III-IV级患者手术前后IL-1β减低,但无显著差异(P>0.05),I-II级患者手术前后具有显著差异(P<0.05)。结论 KBD中IL-1β、TNF-α和NO的高水平表达,在KBD发病机制中具有重要作用;实施关节置换、关节清理等手术方案,关节炎性指标减低,达到改善病情的目的。 相似文献
6.
例1:沈某,男,62岁。患者于1993年7月,患急性脊髓蛛网膜下腔出血在市某医院住院治疗,因出现“应激性溃疡、消化道出血”而在该院输血及输注血浆,1个月后患者出现皮肤、巩膜发黄,诊断为急性丙型肝炎转市级专科医院治疗。住院治疗半年,症状元明显缓解,自动出院。1994年10月因出现浮肿、腹胀1周而至本院住院治疗。体查:皮肤、巩膜轻度黄染,皮肤无出血点及蜘蛛痣,心肺正常,腹稍膨隆,有移动性浊音,肝右肋下0.5cm,质中,脾左肋下未触及,双下肢轻度凹陷性水肿,ALT2000.4nmol·S-1/L,AS… 相似文献
7.
目的 构建能够表达神经生长因子-β重组腺相关病毒穿梭质粒,为进一步包装腺相关病毒奠定基础.方法 利用高保真酶分别扩增pAAV-MCS的结构元件和pGenesil-1.1的功能元件,连人T-easy载体,限制性核酸内切酶酶切并回收目的片段,T4酶连接,得到含U6和CMV双启动子的重组腺相关病毒穿梭质粒pAAV-U6/CMV-EGFP;培养人MIApaca-2细胞,提取总RNA,进行RT-PCR得到人ngf-β基因,插入T-easy载体,得到T-easy-ngf-β;将ngf-β插入pAAV-U6/CMV-EGFP,构建ngf-β重组腺相关病毒穿梭质粒.结果酶切pAAV-U6/CMV-EGFP可见4250 bp、800 bp条带,质粒转染293细胞后可见绿色荧光蛋白表达;质粒T-easy-ngf-β酶切可见3 kb、736 bp条带,测序显示基因序列正确;酶切pAAV-U6/CMV-ngf-β可见4300 bp、736 bp条带;质粒pAAV-U6/CMV-ngf-β测序显示载体中的基因序列正确.结论 成功构建ngf-β重组腺相关病毒穿梭质粒,包装表达神经生长因子的腺相关病毒,为进一步深入研究脊髓损伤的修复提供了实验基础. 相似文献
8.
9.
目的探讨后稳定型全膝关节置换治疗成人膝大骨节病混合内翻畸形的手术方法及临床疗效。方法应用后稳定型全膝关节置换治疗晚期成人膝大骨节病混合内翻畸形29例(31膝),男16例(17膝),女13例(14膝)。年龄56~79岁,平均65.2岁。病程3.9~29年。术前屈曲挛缩畸形5°~40°,平均12.4°,膝内翻畸形5°~20°,平均11.5°,术前内旋转度7°~14°。用膝关节HSS评分标准及畸形矫正角度进行效果评价,术前平均40.98分。结果本组有1例下肢血栓性静脉炎经保守治疗痊愈,1例术后心肌梗死经抢救治愈,对全部病例进行了平均28个月(2个月~6年)的随访,术后6个月髌前痛1例,行股四头肌功能锻炼疼痛消失,随访期间无假体周围透明带出现,无假体下沉或松动,无植骨块移位、骨折、骨吸收、不愈合及胫骨平台塌陷。终末随访HSS评分为86.34分。优21膝(67.7%),良9(29%),尚可1膝(3.23%)。结论应用后稳定型全膝关节置换治疗成人膝大骨节病,可有效矫正内翻、屈曲、内旋混合畸形,缓解疼痛,重建膝关节功能,近期疗效满意。 相似文献
10.
目的:探讨双钩张力克氏针治疗合并复杂肘关节骨折脱位的尺骨冠状突骨折的疗效。方法:1998年1月~2012年1月,采用双钩张力克氏针治疗26例合并复杂肘关节骨折脱位的尺骨冠状突骨折,男17例,女9例,年龄17~67岁,平均39岁,O’Driscoll分型,I型6例,II型2例,III型18例,开放性损伤1例,合并神经损伤2例,其中伴肘关节恐怖三联征13例,鹰嘴骨折肘关节后脱位(后方孟氏骨折)5例,鹰嘴骨折肘关节前脱位(经鹰嘴)6例,内翻后内侧旋转半脱位(VPMRI)2例。结果:26例患者获13~30个月,平均21个月随访,平均手术时间65分钟(55~130分钟)。损伤愈合后肘关节伸屈活动平均110。(70。~125。)。根据Mayo肘关节功能评定标准评定疗效,Mayo评分71~94分,平均86分,优8例,良11例,可6例,差1例,优良率73.1%,无表浅感染或深部感染、皮肤坏死、肘关节脱位、肘关节强直等并发症,有1例肘关节骨化性肌炎。结论:双钩张力克氏针内固定治疗伴复杂肘关节骨折脱位的冠状突骨折,简单易行,固定可靠,利于早期功能锻炼,减少并发症,疗效满意。 相似文献