SYBR Green实时定量PCR检测人原发脑胶质瘤中REV3和REV7基因的表达

目的 运用实时定量PCR检测跨损伤修复基因REV3和REV7在人脑原发脑胶质瘤组织中的表达水平,探讨其和肿瘤级别之间的关系.方法 采用SYBR Green实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测跨损伤修复基因REV3和REV7的mRNA在85例原发胶质瘤(Ⅱ级20例、Ⅲ级20例和Ⅳ级45例)和14例正常脑组织中的表达水平,统计学分析表达水平和肿瘤级别之间的关系.结果 与正常组织相比,REV3和REV7在各病理级别胶质瘤中均表达上调(P＜0.05);并且REV3在Ⅳ级胶质瘤中的表达比在Ⅱ级和Ⅲ级中都要高(P＜0.05).秩相关分析表明:REV3的表达量与胶质瘤病理分级呈正相关性(r=0.454,P＜0.001).结论 REV3和REV7在胶质瘤组织中均高表达,而且REV3表达水平和恶性程度有密切联系.     

干扰素基因激活因子激动剂对人皮肤黑色素瘤细胞的放射增敏作用研究

目的探讨干扰素基因激活因子(STING)激动剂对皮肤黑色素瘤细胞的放射增敏作用及其机制。方法为检测STING激动剂环二腺苷酸(c-di-AMP)对人皮肤黑色素瘤细胞(A375)辐射后的影响, 将人皮肤黑色素瘤细胞A375分为空白对照组、10 μmol/L c-di-AMP处理组、X射线照射组、照射+c-di-AMP组。通过CCK-8法、乳酸脱氢酶(LDH)释放实验、平板克隆形成实验以及流式细胞术等手段, 检测c-di-AMP对A375细胞的放射增敏作用。采用Western blot检测细胞死亡相关蛋白表达。结果 10 μmol/L的c-di-AMP联合10 Gy X射线照射时可见明显的放射增敏效应, A375细胞活力较X射线照射组显著下降(t=5.11, P<0.05), 细胞毒性显著增加(t=10.15, P<0.05), 细胞凋亡显著增加(t=4.41, P<0.05), 细胞克隆增殖能力显著降低(t=6.30、3.55、5.45、3.55, P<0.05)。c-di-AMP的放射增敏比(SER)为1.88。10 μmol/L的c-di-AMP联合10 Gy...     

ShRNA靶向干扰EGFR抑制结直肠癌细胞增殖的机制

目的:从细胞周期的角度探讨RNA干扰抑制表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)表达对结直肠癌细胞增殖影响的机制.方法:以人结直肠癌细胞HCT-15为研究对象,构建EGFR-短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)载体,采用脂质体转染的方法转染细胞,G418筛选稳定细胞株以获得稳定的转染细胞模型,分为4组:转染shRNA-NC,转染shRNA-1组,转染shRNA-2组,转染shRNA-3组;应用半定量RT-PCR和流式细胞术检测转染细胞模型的mRNA和蛋白表达水平;应用平板克隆实验检测转染后细胞增殖能力;应用流式细胞术检测转染后细胞周期的变化.结果:正确构建了shRNA质粒表达载体,成功转染;转染shRNA-1、2、3组较转染shRNA-NC组mRNA、蛋白表达水平均有下降,以转染shRNA-1和2组的抑制效应好(40.2%±3.2%,52.8%±11.3%);转染shRNA-1、2两组较对照组增殖能力下降,G0/G1期细胞增多(63.69±2.75%,60.10±2.00%vs51.08±3.42%)、S期细胞减少(28.20%±...     

建立与科研课题结合的分子生物学实验教学新模式分析

<正>"科研—教学—科研"成为了分子生物教学的新模式,实践证明,这是一项行之有效的教学方法,有利于建立以高校学生为主体的创新人才的培养。传统的分子生物实验教学方式,实验的设置常常是按照教学大纲机械的设定,没有灵活性[1-2]。这种模式已经沿袭了几十年,不利于学生的学习以及创新能力的培养。文     

放射性皮肤损伤的治疗进展

人体暴露于电离辐射后会引发各个组织器官的损伤,其中,皮肤是人体最先暴露于射线的器官,其损伤的机制和治疗是研究的热点。放射性皮肤损伤（RISI）最常见于放疗后,还可见于核工业生产、放射性实验室和工业探伤等意外核事故。RISI形成后影响患者的健康状况和生活质量,严重者会威胁患者的生命健康。然而,到目前为止,对于RISI尚无标准的治疗方案。笔者回顾性归纳总结了RISI的治疗方法,旨在为临床治疗和进一步研究提供参考。     

多肽类辐射防护药物应用的研究进展

近年来,核能与核技术在工业、医药、科技、军事等领域的广泛应用使人们暴露于辐射的风险增加,而临床上仍缺乏安全、高效的辐射防护药物。功能多肽在体内担负着重要的调节功能,且多肽类药物具有靶向性、高特异活性、药品安全性高、易于改造修饰等优势。因此,多肽类辐射防护药物的相关研究较多。笔者将对多肽类辐射防护药物的特性和设计思路及其应用进行综述,旨在为多肽类辐射防护药物的研究奠定基础。     

微生物对紫外线辐射的响应机制及其应用研究现状

紫外线辐射已被世界卫生组织(World Health Organization,WHO)认定为一类致癌物.近年来,由于平流层臭氧的厚度下降和气溶胶、表面反射率、太阳活动和气候的变化,导致到达地球表面的紫外线辐射水平显著增加.皮肤是人体最大、最外层的器官,也是保护机体的第一道屏障.直接暴露在紫外线辐射下会导致晒伤、炎症、光免疫抑制、光老化甚至皮肤癌.机体表面及环境中的微生物都会受到环境中紫外线辐射的影响,改变微生物组的组成和丰度.微生物组也可通过几种重要的光保护机制免受紫外线辐射的损伤.在医学领域,紫外线辐射可通过作用于某些皮肤微生物来进行疾病的治疗.多种微生物及其代谢物通过不同的分子机制也表现出了防治紫外线损伤的作用,具有良好应用前景.本文综述了紫外线辐射对皮肤微生物组产生的光生物学效应、微生物体为抵御紫外线辐射及紫外线辐射应用于临床皮肤病治疗的现状.然而,紫外线辐射对微生物组的影响仍有待进一步阐明,明确微生物对抗紫外辐射的机制,为人类预防紫外线损伤提供全新的思路.     

人染色体XIAP-3＇ UTR区域基因多态性与中国汉族人群急性胰腺炎易感性的相关性

目的探讨人染色体X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）基因3＇非翻译区（3＇UTR）rs9856位点多态性与中国汉族人群急性胰腺炎遗传易感性之间的关系。方法采用病例一对照研究,对320例急性胰腺炎患者和320例性别、年龄、籍贯频数与之相匹配的健康对照组的rs9856位点进行基因分型,并统计分析其基因频率分布与急性胰腺炎易感性的关系。结果发现等位基因比如下：病例组C／T=1．08,对照组C／T=1．51;2组C／T卡方检验P=0．003,差异具有统计学意义。这表明该位点C／T分布在胰腺炎和正常人群中有显著区别;进一步对该位点按照病情严重程度分层分析结果显示,TT型基因与CC型相比对轻症急性胰腺炎的发生具有保护作用[OR=0．59,95％CI=（0．40～0．86）,P=0．006]。结论人染色体XIAP-3＇UTR区域rs9856位点多态性与中国汉族人群急性胰腺炎易感性相关。