缺血性脑损伤诱导内源性神经干细胞的增殖和迁移

目的:观察缺血性脑损伤对内源性神经干细胞增殖、迁移的影响。方法:实验于2004-09/2005-03在新乡医学院人体解剖与组织胚胎重点实验室进行。10～12周体质量300～350g的健康雄性SD大鼠62只,由新乡医学院实验动物中心提供。按随机数字表方法将其分为正常组6只、假手术对照组14只、脑缺血再灌注组42只(分为再灌注1,3,5,7,10,15,20d7个时间点,每时间点6只)。参照Pulsinelli-Brierley法,夹闭大鼠双侧颈总动脉制作短暂性全脑缺血动物模型,全脑缺血10min后再灌注,假手术对照组不夹闭颈总动脉。于脑缺血再灌注不同时间点应用SABC免疫组化法染色显示5-溴-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞和巢蛋白阳性细胞,光镜下观察并分析脑缺血损伤后内源性神经干细胞增殖、迁移的变化过程。结果:正常组、假手术对照组大鼠均存活,脑缺血再灌注组大鼠1d、5d、15d、20d各死亡1只,共58只大鼠进入结果分析。①正常组与假手术对照组室管膜下区、海马CA1区、齿状回区域均偶见5-溴-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞和巢蛋白阳性细胞。②脑缺血再灌注后1d于海马、齿状回和室管膜下区均有5-溴-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞和巢蛋白阳性细胞,随后逐渐增加,7～10d达高峰,术后20d仍有表达;在室管膜下区的5-溴-2-脱氧尿嘧啶阳性细胞和巢蛋白阳性细胞有向皮质、海马迁移的现象。结论:成年大鼠全脑缺血后7～10d内源性神经干细胞增殖达到高峰;增殖的内源性神经干细胞存在由增殖区向靶区迁移的现象。     

脊柱胸腰段骨折的影像学表现

目的：探讨常规X线平片、CT及MRI三种影像学检查手段在脊柱胸腰段骨折中的诊断价值。方法：对131例脊柱胸腰段骨折患的X线平片、CT和MRI资料进行回顾性对比分析。结果：本组131例，151个椎体骨折，共198个骨折部位，其中83例合并椎管狭窄，73例合并脊髓损伤。结论：在脊柱胸腰段骨折影像学检查中，常规X线平片能同时检出多段椎骨骨折，并对脊柱稳定性有初步预测；CT扫描能清晰显示骨折细节，准确判断骨折类型和椎管狭窄程度；MRI检查对脊髓损伤显示最佳。三种检查方法互补性强。     

低氧与缺血诱导培养海马和皮质神经元钙应答反应的比较

目的：钙作为重要信使参与多种生理和病理代谢过程,而且在缺血性神经元损伤机制中起着重要的作用。本实验模拟脑缺血的病理生化改变,用激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）和Fluo-3荧光探针标记技术,观察低氧缺血状态下体外培养的海马,皮质神经元内钙浓度的变化。方法：用100μmol/L氰化钠造成细胞低氧;100μmol/L氰化钠和3.5mmol/L碘醋酸盐模拟在体完全性脑缺血;1mmol/LL-谷氨酸模拟在体脑缺血时兴奋性氨基酸大量释放;无葡萄糖介质剥夺细胞能量代谢的底物。结果：低氧使海马神经元[Ca^2 ]i显著升高,但有两种不同的钙振荡现象,谷氨酸引起海马神经元[Ca^2 ]i持续升高,但峰值低于低氧组,缺血组未见[Ca^2 ]i大幅升高,葡萄糖缺如不引起[Ca^2 ]i升高,结论：低氧和谷氨酸引起的神经元损害是能量依赖性的,轻度酸中毒可阻止胞内Ca^ 升高,糖对神经元具有保护作用,但单纯无糖引起的神经元损害与Ca^2 超载机制无关。     

骨质疏松股骨转子间强化的生物力学研究

目的　评价加压滑动鹅头钉 (DHS)固定时添加复合磷酸钙骨水泥 (CPC)对骨质疏松股骨转子间生物力学的性能。方法　采用 16个股骨上段标本 ,随机分为两组 ,强化组和非强化组 ,强化组添加复合CPC。结果　CPC强化可显著改善螺钉初始松动加载力 ,由灌注前的 (888.5± 114.5 )N加大至灌注后 (332 7.3± 2 6 2 .3)N ,最大轴向拔出力由 (115 8.0± 197.8)N加大至 (372 8.3± 2 2 3.1)N ,两组有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　骨质疏松股骨转子间强化后能显著提高DHS的稳定性     

细胞凋亡调控机制的研究进展

细胞的死亡同细胞的增生和分化一样,对机体发育和维持内环境稳定具有重要意义。凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是有别于坏死（ｎｅｃｒｏｓｉｓ）的细胞生理性死亡。当细胞接受诱导因子（凋亡信号）刺激后,将信号传入细胞核,启动自身遗传机制,按一定的程序,形成级联式的...     

荧光定量RT-PCR检测急性白血病患者外周血WT1基因的表达

目的　了解急性白血病患者外周血WT1基因的表达水平。方法　建立荧光定量RT -PCR方法 ,用PEABI 770 0PCR仪检测 114例急性白血病患者、2 6例非白血病患者和3 6例正常人外周血中WT1基因的表达水平。结果　 2 2例急性髓系白血病 (AML)和 15例急性淋巴细胞白血病 (ALL)初发患者WT1基因的表达量为 10 5～ 10 6拷贝 / μgRNA ,取得部分缓解的 2 6例AML和 19例ALL患者的表达水平为 10 2～ 10 4拷贝 / μgRNA ,而取得完全缓解的 17例AML和 13例ALL患者的表达水平为 0～ 10 2拷贝 / μgRNA。 结论　WT1基因在白血病外周血中有高水平的表达 ,可作为急性白血病疗效考核及监测微残留病的指标。     

大鼠背根神经节神经元H~+-门控电流及其特征

目的:探讨大鼠背根神经节(DRG)神经元H+-门控电流(也称ASICs电流)及其特征;比较在SD大鼠DRG和三叉神经节(TG)神经元电流分布的异同。方法:在急性分离的大鼠DRG神经元上,采用全细胞膜片钳技术记录电流。结果:依据在pH5.0条件下记录的ASICs电流动力学特征,将急性分离的DRG神经元上的ASICs电流分为四类:T-型、S-型、B-型和O-型;并推断此四种电流类型在周围感觉神经元上分布的一般规律。结论:在SD大鼠DRG和TG神经元ASICs电流都是以"S"型电流为主。4种电流的激活动力学τon(0～63%上升时间)和细胞直径无明显相关性。     

缺血性脑损伤诱导大鼠巢蛋白表达的实验研究

目的探讨缺血性脑损伤对内源性神经干细胞增殖、迁移的影响。方法选用健康雄性SD大鼠62只，随机分为正常组（6只）、脑缺血10min再灌流1、3、5、7、10、15、20d组（简称手术组，每时间点6只）、假手术对照组（14只，每时间点2只），参照Pulsinelli—Brierley方法制作短暂性全脑缺血动物模型：用SABC免疫组化法显示巢蛋白（nestin）阳性细胞；光镜下观察nestin阳性细胞的形态学变化并计数，半定量分析脑缺血损伤后内源性神经干细胞增殖、迁移的变化过程。结果手术组的nestin阳性细胞在缺血再灌流24h后表达增多，7～10d到高峰，15d时仍有显著表达；在室管膜下区的nestin阳性细胞有向皮质、海马迁移的迹象。结论缺血性脑损伤能诱导内源性神经干细胞增殖，这可能对脑损伤后的修复发挥作用。     

NMDA受体拮抗剂剂量与脑缺血再灌注大鼠海马内源性神经干细胞的增殖

背景: 脑缺血再灌注后,过度释放的兴奋性氨基酸可通过NMDA受体激活内源性神经干细胞,促使其增殖、分化,修复神经细胞,但同时也导致细胞内钙离子超载,引起神经细胞的损伤.通过控制NMDA受体活化的程度,刺激内源性神经干细胞激活的同时把损伤减到最小.目的: 观察NMDA受体拮抗剂MK-801质量浓度对脑缺血再灌注大鼠海马内源性神经干细胞增殖的影响.方法: 健康雄性SD大鼠54只随机数字表法分为对照组(不进行任何处理)、手术组(缺血模型制作)及不同剂量MK-801组.采用大鼠四条血管阻断方法(Pulsinelli-4VO法)制备大鼠全脑缺血再灌注模型.不同浓度MK-801组在模型制作前30 min按照0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2mg/kg侧脑室注射MK-801.Western-blot、RT-PCR技术检测各组nestin蛋白及mRNA水平及表达.结果与结论: MK-801剂量在0.8 mg/kg以下时,nestin mRNA及蛋白的表达差异无显著性意义(P>0 05),呈现高表达;当剂量为0.8 mg/kg时,可明显抑制内源性神经干细胞增殖;在0.8mg/kg以上,对神经干细胞的抑制作用随着剂量的升高呈递增趋势;在1.2 mg/kg时,大鼠有躁动、共济失调等严重不良反应.nestin mRNA表达结果与蛋白表达趋势相吻合.说明MK-801的剂量与脑梗死后神经功能的修复有一定的关系,实验中0.6 mg/kg是一个比较合适的实验应用剂量,在此剂量下既可使MK-801减少兴奋性氨基酸对神经元的毒性作用,保护神经细胞,又使内源性神经干细胞的增殖不受较大影响.