表达PD-1受体的Tfh细胞促进复发-缓解型多发性硬化急性期发作

目的：探讨多发性硬化(MS)患者外周血滤泡辅助性T淋巴细胞表面PD-1受体表达及其与临床特征的关系。方法：研究人群包括43例复发-缓解型MS急性期发作患者和43例健康志愿者,流式细胞仪检测CD4⁺CXCR5⁺CCR7^loPD-1^hiT细胞,ELISA检测血清IL-21水平。对MS患者治疗前、治疗后4周进行扩展残疾状况评分量表(EDSS)评分并统计头颅MRI增强病灶数目。结果：MS患者治疗后较治疗前EDSS评分降低(P<0.05),但头颅MRI增强病灶数目无明显变化(P>0.05)。MS患者CD4⁺CXCR5⁺T细胞中CCR7^loPD-1^hi亚群细胞比例及血清IL-21水平明显高于健康对照组(均P<0.05),且治疗后两者均降低(均P<0.05)。MS患者MOG-Ig G和MBP-Ab表达阳性者CD4⁺CXCR5⁺T细胞中CCR7^lo     

多发性硬化患者外周血T细胞PD1表达的研究

目的探讨程序性死亡分子1(PD1)在多发性硬化(MS)患者外周血T细胞上的表达及临床意义。方法急性发作期的复发-缓解型MS患者和健康者各39例,采用酶联免疫法检测血浆IL-17、IL-23的水平变化,流式细胞仪检测外周血T细胞上PD1表达(MFI和百分率),对MS患者进行扩展残疾状况评分量表(EDSS)评分和头颅MRI增强病灶数目的评估。结果 MS患者治疗前较健康者PD1表达(MFI和百分率)水平、IL-17和IL-23水平、EDSS评分、头颅MRI增强病灶数目均较高(P0.05);MS患者治疗前比治疗后PD1表达(MFI和百分率)水平、IL-17和IL-23水平、EDSS评分均较高(P0.05)。MS患者治疗前PD1表达(MFI和百分率)水平分别与IL-17和IL-23水平、EDSS评分、头颅MRI增强病灶数目均呈正相关(P0.05)。结论 MS患者急性发作期外周血T细胞表达PD1升高,且与IL-17和IL-23炎症因子水平具有相关性,可能在MS严重程度和疾病进展起重要作用。     

白桦脂醇对慢性应激抑郁模型大鼠行为及神经营养因子表达的影响*

目的：探讨白桦脂醇对慢性不可预知温和应激抑郁（ CUMS）模型大鼠的抗抑郁作用，为治疗抑郁症提供 基础理论依据。方法：大鼠随机分为正常组、模型组、氟西汀组和白桦脂醇组，采用氟西汀和白桦脂醇干预改进 CUMS模型大鼠，通过行为学观察抑郁行为，TUNEL法检测海马神经元凋亡，HPLC-ECD法检测5- 羟色胺（5-HT）、 去甲肾上腺素（ NE）和多巴胺（ DA）神经递质水平，免疫印迹检测脑源性神经营养因子（ BDNF）、神经营养 蛋白3（NT-3）和神经生长因子（ NGF）蛋白水平。结果：氟西汀组和白桦脂醇组较模型组大鼠的体质量在3、4 周增加，且在4 周时白桦脂醇组较氟西汀组的大鼠体质量增加；氟西汀组和白桦脂醇组较模型组大鼠悬尾静止时 间、强迫游泳不动时间均延长，且氟西汀组较白桦脂醇组明显延长；氟西汀组和白桦脂醇组较模型组海马凋亡细 胞数下降，且白桦脂醇组高于氟西汀组；氟西汀组和白桦脂醇组较模型组大鼠脑组织中5-HT、NE和DA含量均 减少，且氟西汀组较白桦脂醇组减少；氟西汀组较模型组大鼠脑组织BDNF、NT-3 和NGF 蛋白相对表达水平均 降低，氟西汀组较白桦脂醇组降低。结论：白桦脂醇能够改善CUMS模型大鼠的抑郁行为，且对其海马神经元具 有一定保护作用。     

仙茅苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠轴突再生及Akt/GSK-3β/CRMP-2表达的影响

目的:研究仙茅苷对局灶性脑缺血/再灌注大鼠轴突再生的作用并探讨其机制。方法:健康成年雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组、模型对照组、仙茅苷给药组,用线栓法建立局灶性脑缺血/再灌注大鼠模型(MCAO),大鼠神经功能损伤采用Zea-Longa标准评价,Western Blot法检测大鼠缺血侧脑组织p-Akt、Akt、p-GSK-3β、GSK-3β、p-CRMP-2、CRMP-2蛋白的表达,免疫荧光染色法检测大鼠缺血侧脑组织NF200蛋白的表达。结果:与MCAO组比较,仙茅苷能明显改善大鼠的神经功能损伤,促进NF200、p-Akt、p-GSK-3β蛋白的表达,抑制p-CRMP-2蛋白表达。结论:仙茅苷能改善局灶性脑缺血/再灌注大鼠的神经功能缺损,可能通过促进Akt、GSK-3β的磷酸化,抑制CRMP-2的磷酸化,进一步促进轴突再生。     

血管性认知功能障碍与雄激素受体基因启动子区甲基化状态、同型半胱氨酸水平的相关性研究

目的检测血管性认知功能障碍(VCI)患者的雄激素受体(AR)基因启动子区Cp G岛甲基化状态和同型半胱氨酸(HCY)水平,从分子水平探讨VCI与AR基因启动子高甲基化、HCY的关系。方法采用病例对照研究方法,选取脑卒中慢性期的VCI患者46例组成病例组,随机选取年龄相同的健康人92例组成对照组。MSP法和RT-PCR法检测研究对象AR启动子区Cp G岛的甲基化状态及mRNA表达水平,采用酶转换免疫法检测HCY水平。结果 VCI患者中甲基化率为71.74%,对照组患者中甲基化率为19.57%,病例组与对照组甲基化率相比较,差异有统计学意义(P0.05)。VCI组患者较对照组患者AR基因mRNA表达缺失5.24倍,两组患者AR基因mRNA表达缺失率比较,差异有统计学意义(P0.05)。病例组HCY水平为14.73±5.31,对照组为7.12±4.19,病例组显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。AR基因启动子区甲基化程度与HCY相关系数为r=0.534,差异具有统计学意义(P0.05);随HCY水平升高,病例组甲基化程度亦递次升高。结论 AR基因启动子区高甲基化与VCI发病相关;高HCY水平与AR基因启动子区高甲基化相关。     

两性霉素B通过NF-κB通路对小鼠隐球菌性脑膜炎脑组织中小胶质细胞及炎性因子的影响

目的探讨两性霉素B是否通过NF-κB通路对小鼠隐球菌性脑膜炎脑组织中小胶质细胞及炎性因子产生影响。方法以C57BL/6小鼠为研究对象,分为假手术组(sham组)、隐球菌性脑膜炎模型组(CM组)、两性霉素B低剂量组(CM+AmB-L组,0.5mg/kg)和两性霉素B高剂量组(CM+AmB-H组,1 mg/kg),HE染色观察小鼠脑组织病理变化,ELISA检测小鼠脑脊液中TNF-α、IL-6和IL-10的水平变化,提取原代小胶质细胞并测定小胶质细胞活力,免疫组化检测小胶质细胞中Iba1的表达情况,免疫荧光染色检测小胶质细胞中Rab5的表达情况,流式细胞仪检测小胶质细胞中Caspase-3活性的变化,Western blot检测NF-κB信号通路相关蛋白的表达水平。结果 CM组小鼠脑组织中发现大面积炎症部位和隐球菌生物,CM+AmB-L组和CM+AmB-H组小鼠脑组织中炎症部位和隐球菌生物明显减少;CM组小鼠脑脊液中TNF-α、IL-6的含量明显升高(均P0.01),IL-10的含量明显下降(P0.01),CM+AmB-L组和CM+AmB-H组小鼠脑脊液中TNF-α、IL-6的含量下降(均P0.05),IL-10的含量升高(均P0.05);CM组小胶质细胞活力明显升高(P0.01),CM+AmB-L组和CM+AmB-H组小胶质细胞活力降低(均P0.05);CM组中Iba1呈阳性表达(P0.001),Rab5的表达明显下调(P0.001),CM+AmB-L组和CM+AmB-H组中Iba1的阳性表达降低(均P0.05),Rab5的表达上调(均P0.05);CM组小胶质细胞中Caspase-3活性显著降低(P0.001),CM+AmB-L组和CM+AmB-H组小胶质细胞中Caspase-3活性升高(均P0.05);CM组小鼠脑组织中TLR4、NF-κB p65蛋白显著上调(P0.001),CM+AmB-L组和CM+AmB-H组小鼠脑组织中TLR4、NF-κB p65蛋白下调(均P0.05)。结论两性霉素B通过抑制NF-κB通路的激活,下调小胶质细胞活力来治疗隐球菌引起的脑膜炎。     

白桦脂醇的选择性雌激素受体调节作用实验研究

目的对白桦脂醇的选择性雌激素受体调节作用进行研究,探讨其植物雌激素活性。方法将40只性未成熟雌性小鼠采用随机数字表法分为空白组,雌激素组,白桦脂醇低、高剂量组4组,每组10只,分别给予生理盐水及17β-雌二醇(17β-E₂)、白桦脂醇混悬液灌胃7 d。灌胃结束后,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测小鼠血清雌二醇(E₂)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平;剖取子宫称重,计算子宫增重率和子宫指数;通过Western bolt法检测小鼠子宫组织中雌激素受体(ER)α、ERβ和雌激素膜受体G蛋白偶联受体30(GPR30)蛋白的表达;通过细胞增殖实验观察白桦脂醇对人乳腺癌细胞(MCF-7)的促增殖作用;通过细胞增殖拮抗实验观察ER阻断剂ICI182 780、ERα阻断剂MPP、ERβ阻断剂THC、雌激素膜受体GPR30阻断剂G15等4种阻断剂对白桦脂醇促MCF-7细胞增殖作用的影响。结果白桦脂醇能明显升高性未成熟雌性小鼠的子宫增重率、子宫指数,血清E₂、FSH水平,以及子宫组织中ERα、GPR30蛋白的表达水平(...