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为了提高鲜味八肽LGAGGSLA发酵菌融合蛋白的酶切得率,对鲜味八肽LGAGGSLA的工程菌进行了工业化发酵,并对表达的融合蛋白中的鲜味肽的酶切工艺采用响应面法进行优化,结果显示:工业化发酵所得融合蛋白与理论预测结果相符;响应面法优化酶切工艺建立的EK酶浓度、酶切时间、酶切温度与酶切率的相关性模型具有较高的可靠性,能很好地反映酶切率与EK酶浓度、酶切时间及酶切温度的相互关系。利用该模型对酶切工艺进行优化,得出EK酶浓度2μL/mL、酶切时间15h、酶解温度24℃时,融合蛋白的酶切率最高,酶切率达93.4%。经HPLC验证,分离纯化后的鲜味八肽与人工合成的鲜味八肽对照品的保留时间基本一致,所得生物源鲜味八肽的纯度高达98%。 相似文献
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鲜味肽是近年来新发现的呈味物质,但国内外对其呈味效果存在争议。导致这一争议的可能原因是验证鲜味肽呈味效果的方法主要是采用化学合成法。为了制备生物源鲜味肽,以便对鲜味肽呈味效果进行再评价,本文以争议性鲜味八肽为目标肽,采用基因工程法,构建了制备生物源鲜味肽的表达载体,并对其表达效果进行了验证。根据争议性鲜味八肽的一级结构Lys-Gly-Asp-Glu-Glu-Ser-Leu-Ala和大肠杆菌E.coli BL21(DE3)的密码子偏爱性,设计了该鲜味八肽的DNA序列,并将其克隆在pET-32a(+)上形成表达载体。通过菌落PCR检测阳性克隆、重组质粒鉴定及工程菌的诱导表达,结果发现,鲜味八肽的目的基因成功重组在pET-32a载体上,所得pET-32a鲜味肽重组载体转化大肠杆菌后能够正常表达融合蛋白。这为后续获得生物源鲜味八肽奠定了基础。 相似文献
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为了分析骨粉的粉碎程度对其消化率及骨粉的氨氮含量的影响,本文以猪大骨为原料,经高压蒸煮酶辅助水解后粉碎,制得颗粒尺寸大于150μm、小于37.4μm,以及尺寸介于150μm~92.9μm、92.9μm~75μm、75μm~58.9μm、58.9μm~48.9μm、48.9μm~41.8μm、41.8μm~37.4μm的骨粉,并对其氨氮含量、脂肪及水分含量,蛋白质消化率,碎骨蛋白的形态及碎骨的外观结构进行分析,结果发现,所得碎骨中尺寸小于37.4μm骨粉占83.2%。粉碎的骨粉随着颗粒尺寸减小,其中的脂肪含量增加,氨氮含量减小。粉碎骨粉中蛋白质的消化率随骨粉尺寸减小呈现增加趋势,尺寸小于37.4μm骨粉的消化吸收率显著(P0.05)高于其他尺寸骨粉。粉碎骨粉的电泳图显示,粉碎骨粉中低分子量蛋白含量呈增加趋势。骨粉的微观结构显示,粉碎骨粉的表面呈圆润光滑状态。 相似文献
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胶原蛋白酶解制备肽工艺研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
胶原蛋白是畜禽及水产品加工副产物中具有较高潜在利用价值的物质,将其高效利用,不仅有利于降低畜禽及水产品生产成本,而且有利于减少环境污染。随着我国绿色发展理念的不断推进,更多绿色制造技术将被广泛应用。生物酶解技术以其高效、低污染等特点,在畜禽及水产品加工副产物利用方面应用之初就备受广泛关注。为了进一步促进酶解技术在畜禽及水产品加工副产物中胶原蛋白水解工艺探索,并进一步发掘酶解胶原肽的功能性,文章对近年来国内外关于酶解胶原制备肽的研究进展进行了综合分析。通过分析发现,在胶原酶解工艺方面,主要以单酶水解居多,其次是多酶水解技术。在原料方面,涉及更多的是骨、鳞及皮。在产物评价方法,更多的是采用水解度、自由基抑制率及肽的提取率、ACE抑制活性。 相似文献
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鲟鱼肉不仅含有优质的蛋白质,而且含有丰富的不饱和脂肪酸,具有良好的潜在利用价值,但目前市场上的鲟鱼肉制品单一。为了丰富鲟鱼肉制品种类,提高鲟鱼肉产品附加值,以鲟鱼肉为原材料,研究鲟鱼肉干制作工艺。通过分析腌制和熟化处理单因素试验发现,腌制和熟化处理均对鲟鱼肉干的质构特性有一定的影响。在单因素试验结果基础上,采用响应面法对制作工艺进行优化得出最佳工艺条件:腌料中的盐含量为0.923%、腌制时间为27.351 min、熟化油温为157.575℃、熟化时间为2.750 min,在此条件下,鱼肉干硬度、胶着性、咀嚼性分别为6 065.246、4 626.384、5 987.760 g。 相似文献
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