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大环内酯类抗生素是非常重要的一类抗菌化合物,而泰乐菌素(tylosin, TYL)是最常用的预混大环内酯类抗生素。但是,这些药物的残留物会在人体中引起过敏反应,并对抗生素产生抗药性。为了评估TYL的残基,需要灵敏的分析方法以确保低浓度下的测定。该文开发了一种快速免疫层析侧流试纸条,用于专门测定牛奶样品中的TYL残留。该文筛选了抗TYL单克隆抗体。抗体滴度为2.56×10-5,IC50为4.609 1 ng/mL。该测试条由样品垫、共轭垫、包含质控线和线的硝酸纤维素(nitrocellulose membrane, NC)膜以及吸收垫组成。用试纸条测定TYL的不同标准样品(0、2、4、8、16、32、64 ng/mL)。用扫描仪计算出试纸的检出限(limit of detection, LOD)为1.543 4 ng/mL,肉眼计算为10 ng/mL,计算其IC50为7.836 2 ng/mL,无需特殊设备,测试结果将在20 min内获得。牛奶的平行分析显示从试纸条和HPLC获得的结果相当,试纸与其他兽药无交叉反应。因此,... 相似文献
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目的合成并鉴定环丙氨嗪(cyromazine,CA)人工抗原。方法采用碳二亚胺法(1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC)将环丙氨嗪与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)和鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)分别偶联;采用紫外分光光度法(ultraviolet spectrophotometry,UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和动物免疫对人工抗原进行鉴定。经过4次免疫,间接ELISA测定小鼠血清抗体效价,间接竞争ELISA测定血清灵敏性。结果 UV法和SDS-PAGE法结果初步显示半抗原环丙氨嗪和载体蛋白偶联成功;小鼠血清效价均在1:6400以上,2号小鼠多抗血清半数抑制浓度IC_(50)为27.5 ng/mL。结论本研究成功合成了环丙氨嗪的人工抗原,为环丙氨嗪单克隆抗体制备奠定基础。 相似文献
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食品安全与人类健康息息相关,快速准确的检测技术是保障食品安全的前提。电化学免疫传感器是将特异性免疫反应与高灵敏度的传感技术相结合的一类新型生物传感器,与传统方法相比有更高的灵敏度,在医疗、农业、食品卫生、环境监测等领域有广泛的应用价值。本文重点就电化学免疫传感器的原理分类、纳米材料技术及其在真菌毒素、食品添加剂、食物过敏原、致病菌、农药残留等食品安全检测领域中的实际应用进行综述,展望其在未来发展的趋势。本文旨在通过电化学免疫传感器的总结分析,为研究者提供更多的思路和方向。 相似文献
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旨在制备伏马菌素B_1单克隆抗体,并建立伏马菌素B_1免疫学检测方法。以制备的免疫原FB_1-BSA免疫小鼠,利用细胞融合技术建立能分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水的方法制备FB_1单抗。基于制备的FB_1单抗,建立间接竞争ELISA检测分析方法,并对检测方法性能进行了初步鉴定。结果表明,通过动物免疫、细胞融合筛选到1株分泌抗FB_1抗体的杂交瘤细胞株3F6。建立的间接竞争ELISA检测分析方法检测范围40~600 ng/mL之间,检测下限达到40 ng/mL,半数抑制浓度IC_(50)为136.81 ng/mL,除与FB1特异性反应外,与同系物FB2及FB3交叉反应率分别为11.65%和7.85%,与黄曲霉毒素B_1、黄曲霉毒素M_1、β-玉米赤霉烯醇、呕吐毒素、T-2毒素、玉米赤酶烯酮、赭曲霉毒素A、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇交叉反应率均低于0.2%,样品回收率在88.89%到115.45%之间,平均101.91%,变异系数为7.43%。本研究建立的ELISA方法与LC-MS-MS检测相同的样品时,二者的检测结果没有显著差异(P0.05)。本研究初步研发出灵敏度符合检测要求、特异较强、准确度较高、简便快捷的FB1免疫学检测方法 。 相似文献
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