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采用热不对称交错聚合酶链式反应(Tail-PCR)克隆云南磷矿来源昆明假单胞菌(Pseudomonas kunmingensis)HL22-2的海藻糖合酶(TreS)基因HL22-2TreS,将该基因与表达载体pETM3C连接后在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)pLysS中进行异源表达,通过Ni-NTA柱纯化重组酶HL22-2TreS,并对其酶学特性进行分析。结果表明,HL22-2TreS基因全长3 336 bp,编码1 111个氨基酸,氨基酸序列与Genbank数据库中相关的海藻糖合酶具有极高的相似性。重组酶HL22-2TreS的分子质量约126 kDa,该酶的最适反应温度和pH值分别为40 ℃和7.0,在温度20~50 ℃及pH值6.0~9.0条件下比较稳定,Cu2+、Hg2+、Ba2+及Al3+对海藻糖合酶的活力有强烈的抑制效果。HL22-2TreS基因对麦芽糖和海藻糖的米氏常数(Km)分别为20.6 mmol/L和87.5 mmol/L,对麦芽糖具有更高的亲和性,更容易将麦芽糖转化成海藻糖。 相似文献
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高海拔寒冷地区隧道修筑技术 总被引:4,自引:0,他引:4
介绍青海省大坂山公路隧道在修筑中解决防寒保温、防冻融、防冻胀等技术问题的措施。 相似文献
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主要阐述京秦提速改造工程桩板式挡土墙在电气化接触网密布、既有线行车频繁、紧邻村庄民房的条件下,解决不同岩石桩孔爆破的炮眼布置、药量控制、网路连接及覆盖防护等技术措施。 相似文献
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主要阐述京秦提速改造工程桩板式挡土墙在坡度较陡,全面开挖较易坍方的条件下,采用先成桩法施工,进行护壁装修、护壁拆除等工艺,保证桩面平整光滑的技术措施。 相似文献
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