海藻酸钠固定细胞产D-阿洛酮糖的研究

D-阿洛酮糖3-差向异构酶(DPEase)是一种能催化D-果糖转化为D-阿洛酮糖的异构酶。本实验采用海藻酸钠作为载体,包埋重组大肠杆菌催化D-果糖生成D-阿洛酮糖。以固定化细胞的酶活活力回收率为指标,优化出最佳固定化条件为:海藻酸钠浓度3%,细胞包埋量60g/L,Ca Cl2浓度2%,固定化时间4h,0.01%浓度戊二醛溶液中交联4h。该条件下所得固定化细胞的酶活回收率高达76%,且具有较好的操作稳定性,重复操作8次后酶活回收率仍然保持61%。固定化后DPE细胞的最适酶反应温度提高了5℃、最适pH与游离细胞基本一致,耐热性明显提高,p H稳定性与游离细胞一致。     

超高压处理对轻度加工茭白保鲜的影响

探讨了超高压处理对微加工茭白货架期保鲜效果的影响,在25℃、600 MPa下处理10 min,贮藏至第7天,对照组和超高压处理组茭白的失重率分别达到10.9%、7.2%,呼吸强度分别为56.63、64.24 CO2mg/(kg.h),细胞膜透性分别为53.3%、45.5%,VC含量下降了56.3%、48.2%,纤维素含量分别为1.49%、1.37%,L值分别下降至70.35、62.45,a值分别上升至-0.54、-0.38,b值分别上升至16.7、15.5。     

化学法合成D-塔格糖的研究

研究了D-塔格糖的化学法生产工艺过程,通过单因素实验,确定了以D-半乳糖为原料进行化学法合成D-塔格糖的工艺条件.结果表明,当CaCl2:(催化剂)的添加量在0.01～0.03mol/L,反应时间在20～40min,并用醋酸、CO2、磷酸中和时,D-塔格糖产率较高.通过正交实验优化反应条件,最终确定以0.02mol/L的CaCl2为催化剂.反应时间30min,用醋酸中和金属氢氧化物D-塔格糖复合物时,D-塔格糖的产率最高,可达到49.05%.     

重组L-乳酸脱氢酶在大肠杆菌中的表达、纯化及活性研究

乳酸脱氢酶是生物法转化苯丙酮酸为苯乳酸的一种有效的酶。实验克隆到一种新型L-乳酸脱氢酶基因ldhL,来源于Lactobacillus plantarumSK-2(植物乳杆菌SK-2),GenBank接受号为FJ392647。以pET-22b(+)为载体质粒,E.coliBL21(DE3)为宿主细胞,构建了基因重组菌,IPTG可诱导目的蛋白的过量表达;经亲和层析纯化的重组蛋白样品进行SDS-PAGE电泳分析,约在37ku处出现显著的特征蛋白条带;重组LDH的比酶活为0.06U/mg。     

银杏外种皮多糖的提取和纯化工艺研究

考察温度、料液比、时间以及提取次数对多糖提取率的影响,确定最佳提取条件。水提醇沉得到的银杏外种皮中多糖(GBEP)含有一定的蛋白质,以多糖的损失率和蛋白质的去除率为指标,比较三种方法:三氯乙酸法、Sevage法、酶法去除GBEP中蛋白质的效率。结果表明,用酶法除蛋白时,多糖的损失率最低;Sevage法除蛋白最彻底,重复多次操作后可以得到不含蛋白质的多糖,虽然多糖损失较多,但有利于进一步的实验研究。AB-8树脂对多糖脱色率为66.35%。     

4-羟基苯乳酸的HPLC检测研究

建立了高效液相色谱法测定发酵液中4-羟基苯乳酸含量的方法,同时研究了Lactobacillus sp.SK007发酵过程中4-羟基苯乳酸的定量分析与生产进程。该方法可用来进行产4-羟基苯乳酸微生物的快速筛选及发酵液中4-羟基苯乳酸的快速检测,具有准确度高、重现性好、操作简单等优点。     

苯丙氨酸及苯丙酮酸对Lactobacillus sp. SK007合成苯乳酸的影响

从自然发酵泡菜中分离筛选到一株乳杆菌(Lactobacillus sp.)SK007,研究了Lactobacillus sp. SK007利用苯丙氨酸合成苯乳酸的过程,结果发现,在MRS培养基中最高可产生0.55 mmol/L苯乳酸,苯丙氨酸剩余94%,但检测不到中间产物苯丙酮酸,这表明苯丙氨酸的转氨反应是苯乳酸合成的限速步骤. 用苯丙酮酸代替苯丙氨酸作为底物可有效突破这一瓶颈,进一步优化了Lactobacillus sp. SK007利用苯丙酮酸合成苯乳酸的发酵条件. 当苯丙酮酸为18.3 mmol/L, 30℃静置培养24 h,苯乳酸产量可达10.25 mmol/L.     

慢消化淀粉的研究与分析

慢消化淀粉是一种新型的食品资源,因其特殊的功能性质而日益成为食品科学和现代营养学领域研究的热点。文中综述了近年来国内外慢消化淀粉的研究进展,并简要介绍了其保健功效、制备及体外检测方法的研究状况,展望了其在食品领域中的应用前景。     

一种新型纤溶酶SPFE-Ⅲ的分离纯化和纤溶机理研究

本实验室从亚洲传统发酵食品--虾酱中筛选到一株产纤溶酶能力较强的芽孢杆菌(Bacillus sp.nov.SK006),发酵液经乙醇沉淀、离子交换色谱(DEAE-Sepharose CL 6B)、凝胶过滤色谱(Superdex75)后分离纯化出一种电泳纯的纤溶酶SPFE-Ⅲ,分子量约为42.6 kDa,酶活为7.1 U/mg(以plasmin为标准).SPFE-Ⅲ对纤维蛋白原的降解过程为最先降解α链,其次是γ链,而对β链的降解最缓慢;利用加热纤维蛋白平板法研究纤溶酶SPFB-Ⅲ,结果发现该酶对纤维蛋白有直接降解作用,而对纤维蛋白溶解酶原的敏感性较低.     

γ-氨基丁酸结晶热力学的研究

研究了γ-氨基丁酸（GABA）的结晶热力学特性,分析了温度、溶剂的组成、pH、杂质等因素对GABA溶解性的影响。结果表明,GABA极易溶于水,25℃时饱和浓度达到774.49g/L,且GABA在水中的溶解性随温度的变化不大。GABA微溶于乙醇,采用水-乙醇复合溶剂可以降低GABA的饱和浓度,在水与乙醇的体积比为1∶4,温度为25℃时GABA的饱和浓度可降低至75.9g/L;酶反应液中杂质的存在会降低GABA的饱和浓度;当pH为7.3时GABA的饱和浓度最小;进一步测定了γ-氨基丁酸酶反应液处理液的介稳区宽度,为酶反应液中GABA的结晶提供了热力学基础。