酸法去酰胺提高大豆分离蛋白持水性的研究

为了提高大豆分离蛋白(SPI)的持水性,采用HCl对SPI进行去酰胺改性。采用响应面分析法,以持水性为响应值,研究了HCl浓度、反应温度、反应时间对SPI持水性的影响。并对去酰胺改性前后的蛋白样品进行疏水性和电镜扫描(SEM)的测定与分析,结果表明:HCl对SPI能够发挥去酰胺作用,其酸法提高SPI持水性优化的工艺条件为HCl浓度0.21 mol/L、反应温度66℃、反应时间3 h。该条件下生产的SPI样品与未改性的SPI样品相比,持水性由5.60 mL/g提高到7.82 mL/g,提高了39.6%,其脱酰胺程度为24.5%。     

转谷氨酰胺酶交联酶晶体的制备及其结构表征

采用双功能试剂戊二醛对转谷氨酰胺酶晶体进行化学变联,得到交联条件.对交联酶晶体用电镜扫描以及红外光谱和XPS进行结构表征.交联条件:戊二醛质量分数1％,交联pH 6,交联温度4℃,交联时间40min.红外光谱显示,游离酶在1 651 cm-1出现强峰,而交联酶晶体在1 634、1 281和1 241 cm-1出现峰值,在α-螺旋区域没有检测到峰值.通过X-射线光电子能谱分析证实,交联酶晶体与游离酶相比,在285.1 eV处的C1S的信号峰增强,在400.375 eV处的NlS峰几乎消失,说明酶蛋白表面的游离氨基已经与戊二醛结合,表面蛋白结构发生了变化.     

聚丙烯微孔膜固定化转谷氨酰胺酶在大豆乳清废水处理中的应用

将固定化转谷氨酰胺酶酶膜应用到酶膜反应器中,对大豆乳清废水进行催化使其发生聚合并被截留,从而减轻大豆乳清废水对环境的污染,并确定其最佳影响条件,得出在最佳条件下进行处理的蛋白截留率为78.4%。对处理前后大豆乳清废水进行分析,其主要成分指标发生了很大变化,如蛋白质含量、生化需氧量(biochemical oxygen demand,BOD)值、化学需氧量(chemical oxygen demand,COD)值、灰分含量等指标较处理前发生显著下降。     

地衣芽孢杆菌2709 蛋白酶分离纯化研究

对产自地衣芽孢杆菌(B. licheniformis)2709 的碱性蛋白酶通过乙醇沉淀、盐析、DEAE 阴离子交换层析、凝胶层析4 步纯化,最终获得电泳纯的酶。以去酰胺度及酶比活力为指标,对碱性蛋白酶分离纯化条件进行优化。结果发现：提纯酶的比活力达61069U/mg,纯化倍数为38.7,活性回收率为19.3%,去酰胺度为20.9%。并研究该酶的基本酶学特性,结果发现：该酶最适作用pH 值为10.0,最适反应温度为50℃。40℃保温2h 后该酶保持80% 以上的活力,在pH8～11 之间有较高的pH 值稳定性。     

等电点冷沉法分离大豆11S的研究

研究等电点冷沉法提取与分离低温脱脂大豆粕中11S的方法,优化11S冷沉条件,并利用SDS-PAGE凝胶电泳来评定不同条件下分离大豆11S的纯度。通过试验确定的最佳工艺条件是:pH 6.2、冷沉时间10 h、加酸搅拌速度30r/min。11S纯度达76.14%,得率40.8%。     

用拉曼光谱分析低压均质处理对大豆分离蛋白结构的影响

本文测定了不同均质处理条件下大豆分离蛋白溶液的拉曼光谱和圆二色谱,以此来研究低压均质对大豆分离蛋白结构的影响。研究表明:均质压力较低(0~8 MPa)时,大豆分离蛋白的二级结构基本保持不变;当均质压力为10~30 MPa时,α-螺旋和无规则卷曲结构明显增加,β折叠显著降低,色氨酸残基和酪氨酸残基由"埋藏态"逐渐转变为"暴露态",蛋白质分子表现出解聚的行为;均质压力继续增大到40 MPa过程中,酪氨酸费米共振线I850/I830比值略有下降,酪氨酸残基由"暴露态"向"埋藏态"转变,表明产生了蛋白聚集体,并且低压均质处理未显著改变二硫键的构型。综上可知,拉曼光谱通过对蛋白分子的二级结构和三级结构进行表征,揭露了低压均质处理使得大豆分离蛋白表现出先解聚后聚合的性质,并且圆二色谱的结果验证了上述结论。     

转谷氨酰胺酶交联酶晶体的制备及其酶学性质研究

对转谷氨酰胺酶晶体进行了交联,研究了交联酶的基本酶学性质。结果表明,交联后,酶的耐高温性增强,在酸性、碱性条件下均比原酶更稳定,具有明显抵抗Fe3+、Zn2+及Cu2+的能力,而Ca2+、Mg2+及Ba2+对交联酶晶体没有明显的影响,在有机溶剂中的酶活力损失较小。与游离酶相比较,交联酶晶体在常温下贮存15d后的酶活力保留80%以上,远远地大于游离酶的剩余酶活。      

地衣芽孢杆菌2709产碱性蛋白酶的发酵动力学研究

应用自动控制的微生物发酵罐分批发酵地衣芽孢杆菌（B.licheniformis）2709,通过获得的生长曲线、糖消耗曲线和产酶曲线探索其生长与代谢的基本规律。选择适宜动力学公式,通过分批发酵的一系列实验数据计算,获得参数K_S、μm、Y′_X/S、m_S、α和β的值,从而建立了能够描述地衣芽孢杆菌2709发酵过程的动力学模型。      

转谷氨酰胺酶交联酶晶体的制备及其酶学性质研究

对转谷氨酰胺酶晶体进行了交联,研究了交联酶的基本酶学性质。结果表明,交联后,酶的耐高温性增强,在酸性、碱性条件下均比原酶更稳定,具有明显抵抗Fe3＋、Zn2＋及Cu2＋的能力,而Ca2＋、Mg2＋及Ba2＋对交联酶晶体没有明显的影响,在有机溶剂中的酶活力损失较小。与游离酶相比较,交联酶晶体在常温下贮存15d后的酶活力保留80%以上,远远地大于游离酶的剩余酶活。     

低压均质处理对大豆分离蛋白凝胶特性的影响

通过测定凝胶的持水性、黏性、巯基含量,运用扫描电子显微镜、质构测定等方法分析探讨了低压均质处理(0～40 MPa)对大豆分离蛋白(Soy protein isolate)凝胶特性和结构的影响。结果表明,随着均质压力的增大,大豆分离蛋白内部疏水基团暴露,分子结构逐渐展开,当均质压力达到20 MPa时,疏水相互作用促进了凝胶网状结构的形成,有效提高了凝胶的弹性、回复性、黏性。扫描电子显微镜结果表明,当均质压力达到20 MPa时,凝胶结构规律,致密有序;当压力进一步增大时,产生的不溶性聚集体破坏了凝胶的网状结构,产生不均匀的空穴,立体感差。