125I标记重组L-天冬酰胺酶

重组L－天冬酰胺酶样品经SDS－PAGE和反相HPLC检测分别为单一蛋白带和单一峰，采用氯胺T法对重组L－天冬酰胺酶进行125I标记，再经Sephadex G-25柱分离纯化，收集第一峰放射活性最高的溶液，经反相HLPC分离，γ－计数器检测，125I重组L－天冬酰胺酶的放化纯度为95％，双向免疫扩散法检测结果表明，标记物具有与重组L－天冬酰胺酶一样的生物活性。     

鲨鱼肝再生因子对大鼠慢性肝损伤的治疗作用

目的 探讨鲨鱼肝再生因子(sHRF) 对大鼠慢性肝损伤的治疗作用。方法 CCl₄ 致大鼠慢性肝损伤模型, 给药后取血清及肝组织测定各项肝指标。结果 当用药8 周时, 对CCl₄ 引起的肝损伤大鼠血清中AST 、ALT 活性的升高和羟脯氨酸含量的升高均有抑制作用, 且0.8 、1.6 mg/kg 剂量组的作用差异均有统计学意义。此外, sHRF 能在一定程度上增加白蛋白含量, 并使白蛋白 球蛋白比值有一定程度的升高。肝组织病理切片亦显示sHRF 能减轻CCl₄ 所致大鼠肝细胞脂肪变性及纤维组织增生。结论 sHRF 对CCl₄ 所致大鼠慢性肝损伤有一定的治疗作用。     

灰树花多酚的提取和活性研究

从灰树花菌丝体中提取多酚类物质，并研究其性质和活性，采用弱极性的大孔吸附树脂从灰树花菌丝体粗提物中吸附多酚类物质，吸附量大，解吸容易，获得褐色粉末状产物，应用红外、紫外扫描和鉴别试验证明其主要为多酚类物质，用F-D法以间苯三酚为标准测得酚类物质质量分数为9．3％,平板系列稀释法测定体外抗菌活性，灰树花多酚对金黄色葡萄球菌等具一定的抑制作用，红细胞氧化溶血和MDA试验测定其抗氧化活性，实验显示：对于红细胞的自氧化和H202所致的氧化均具有一定的抑制活性，可显著抑制小鼠肝匀浆自发生成MDA。碘呈色法和DNS比色法试验结果显示灰树花多酚可抑制α-淀粉酶活性，减少酶对淀粉的水解，树脂法适合从灰树花菌丝体中提取多酚类物质，灰树花多酚具有抗氧化、抗菌及抑制α-淀粉酶等活性。     

西德与美国的药物生物技术发展近况

1986年暑假,国家医药局生物技术考察团对西德的BASF、汉诺威大学、GBF、BM和美国的阿鲍特、赛忒斯公司等教学、科研、生产机构进行了实地考察。重点学习和考察了基因工程、动物细胞工程和酶工程技术的研究现状、工业化水平及其在医药工业上的应用状况,并对生物技术在医药领域的发展前景进行了交流和讨论。一、药物生物技术发展的特点1、结合原有工作需要,为产品的更新换代和技术开发,对生物技术的研究开发进行巨额投资,在短时间内建成现代化规模的生物技术研究中心。如西德的BASF,仅用     

鲨鱼肝活性肽S-8300 的降血糖作用机制初探

目的:探讨鲨肝活性肽S-8300 的降血糖作用机制。方法:观察S-8300 对四氧嘧啶糖尿病小鼠的血浆总胆固醇(CHOL), 血浆甘油三酯(TG), 血浆游离脂肪酸(NEFA), 肝、肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力, 肝、肾组织中丙二醛(MDA)含量, 心肌ATP 酶活力的影响及红细胞在体外所发生的自氧化溶血和H₂O₂ 在体外对红细胞膜的损伤的影响。结果:S-8300 显著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血浆CHOL、 TG、 NEFA 水平及肝、肾组织中MDA 含量, 提高肝、肾组织中SOD活力和心肌ATP 酶活力, 显著抵抗红细胞在体外所发生的自氧化溶血及H₂O₂ 在体外对红细胞膜的损伤。结论:降低糖尿病小鼠血浆中脂质, 减轻自由基的氧化损伤可能是S-8300 降血糖作用的机制之一。     

L-苹果酸(L-Malic acid)

苹果酸是一种重要有机酸,有D—型与L—型两种几阿异构体。L—型苹果酸广泛存在于蔬菜及水果中,尤其是苹果、香蕉、桔子、豆类、马铃薯和胡罗卜中。由于体内只有L—苹果酸脱氢酶,所以人体只能利用L—型苹果酸。D—型苹果酸不仅不能为人体所利用,而且还会增加机体的代谢负担。化学合成dl—苹果酸是L—型与D—型的等量混合物,所以只有一半能被人体所利用,其生理价值也就远不如天然存在的L—型苹果酸。“中国药科大学南京生物工程实验工厂”在国内首创应用近代酶工程技术大量生产L—苹果酸。产品特性与天然品L—苹果酸完全一样,结构式是(?)。     

DRG2基因的克隆、表达及抑瘤活性研究

目的　克隆、表达抑癌基因NDRG2 ,纯化后考察其对肿瘤细胞的抑制作用。方法　将NDRG2基因克隆进pQE30 M15表达载体 ,经DNA测序 ,IPTG诱导表达 ,SDS PAGE测定表达量及相对分子质量 ,复性后浓缩 ,脱盐 ,亲和层析纯化 ,对纯化表达产物进行一系列检测 ,考察其抑瘤作用。结果　克隆构建的表达载体经DNA测序证明构建正确 ,表达产物相对分子质量为 39977,表达量为 4 0 0 5 % ,纯度为 94 % ,等电点为 6 3,表达蛋白N端氨基酸序列正确 ,NDRG2蛋白对肿瘤细胞有较强抑制作用。结论　构建了NDRG2的pQE30 M15表达载体并取得高表达 ,该蛋白对 790 1和HHCC肿瘤细胞均有抑制作用 ,为基因功能研究奠定了基础     

蛋白质分子量测定方法比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,高效凝胶过滤色谱以及电喷雾离子化质谱三种方法对新发现的一种蛋白质的分子量进行了测定。聚丙烯酰胺凝胶电泳非还原电泳测得的分子量为 2 6 .2kDa ,还原电泳测得的分子量为2 9kDa,高效凝胶过滤色谱测得的分子量为 2 4.5kDa ,电喷雾离子化质谱测得的分子量为 30 2 98Da。对以上三种方法的优缺点进行了分析比较。     

条纹斑竹鲨鱼再生肝组织cDNA质粒文库的构建和鉴定

建立了鲨鱼肝脏的部分切除模型,获得了再生2 4h的鲨鱼肝组织,分离了再生肝组织的总RNA ,纯化了mRNA ,利用含BamHI酶切位点的Oligo(dT) 16 为引物合成cDNA第一链,通过末端转移酶在cDNA第一链3’末端加入Oligo(dC)尾,进而以Oligo(dT) 16 和含HindIII酶切位点的Oligo(dG) 10 为引物,通过LD PCR (long distance PCR)方法合成双链cDNA ,将双链cDNA经BamHI和HindIII双酶切,通过T4 DNA连接酶连接到经相同酶切的pUC19载体后构建成cDNA文库。对文库质量的分析结果表明,通过本方法构建的鲨鱼再生肝组织cDNA文库容量至少为4 .92×10 5个/ μgdscDNA ,重组率达96 .7%。对随机提取30个克隆的质粒进行分析,获得了其中2 5个插入片段的序列,未见重复序列,经与GenBank和dbEST数据库比对分析发现新基因在其中占较大的比例(76 % )。鲨鱼再生肝组织cDNA文库的成功构建为进一步通过差异显示技术筛选、克隆肝再生过程中差异表达的相关功能基因奠定了一个良好的基础。     

灰树花子实体多糖的降血糖活性和对α- 葡萄糖苷酶活性的影响

研究灰树花子实体多糖MT-α-glucan 对自发性2 型糖尿病模型KKay 小鼠降血糖作用的量效关系和时效关系,对KKay 小鼠空腹血糖、口服葡萄糖耐量、糖原合成的影响,以及对α- 葡萄糖苷酶活性的影响。结果表明：随着MT-α-glucan 给予剂量的增加,降血糖作用逐渐增强,以112、225、450mg/kg bw 剂量组降血糖作用较为明显;MT-α-glucan 450mg/kg bw 单次给予后8h 降血糖作用最为明显,随后血糖水平逐渐恢复,给予后24h 恢复到给予前水平。MT-α-glucan(450、150mg/kg bw)多次给予具有降低KKay 小鼠空腹血糖、提高口服葡萄糖耐量、促进糖原合成的作用,并可使小鼠24h 内随机血糖维持在较低的稳定水平。而且,MT-α-glucan 对α- 葡萄糖苷酶活性具有较强的抑制作用。因此,MT-α-glucan 具有明显的降血糖活性,作用机理与抑制α- 葡萄糖苷酶活性有关。